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一氧化氮在血管内皮生长因子效应中作用的研究
目的观察血管内皮生长因子(VEGF)对兔离体主动脉内细胞增殖的影响,了解一氧化氮(NO)在其中所起的作用,明确VEGF的作用机制.方法先进行兔主动脉内皮细胞的培养和鉴定,然后行传代培养.在第3～5代主动脉内皮细胞培养液中加入不同浓度的VEGF培养48 h,测定主动脉内皮细胞的吸收光密度(OD)值来观察其增殖程度.并应用一氧化氮合成酶(NOS)抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)后观察内皮细胞OD值的变化情况.结果 VEGF可使血管内皮细胞(VEC)的OD值的升高,并呈剂量依赖性(r＝0.9727;P＜0.01),L-NAME可剂量依赖性地抑制其效应(P＜0.01).结论 NO在VEGF促VEC增殖中起中介作用 .
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一氧化氮抑制单核-内皮细胞粘附的机制
目的:研究一氧化氮(NO)抑制单核-内皮细胞粘附的机制.方法:以硝普钠作为NO的供体,用细胞粘附实验、流式细胞仪荧光强度测定、细胞ELISA、Northern blot等方法分别从细胞、蛋白表达、基因表达方面研究NO对内皮细胞粘附分子(vascular cell adhesion molecule, VCAM-1)表达的影响.结果:NO抑制IL-1α诱导的单核-内皮细胞粘附,抑制IL-1α诱发的VCAM-1的表达并呈时间依赖性及浓度依赖性,NO在粘附分子VCAM-1的基因表达水平上亦呈现抑制作用.结论:NO抑制VCAM-1的表达是其抑制单核-内皮细胞粘附及抗动脉粥样硬化的机制之一.
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一氧化氮及一氧化碳对碱性成纤维细胞生长因子促血管平滑肌细胞增殖作用的影响
目的:研究一氧化氮(NO)及一氧化碳(CO)对碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)促平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMC)增殖作用的影响及其机制.方法:以3H-TdR参入法测定平滑肌细胞增殖程度,放射活性法测定VSMC内蛋白磷酸化程度、蛋白激酶C(protein kinase C, PKC)及丝裂素活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)活性.结果:孵育24 h后,bFGF刺激的VSMC增殖较对照组增加1.1倍(P<0.01),细胞内蛋白磷酸化程度增加38.2%(P<0.01),PKC及MAPK活性分别增加1.5和2.5倍(P<0.01);CO前体heme-L-lysinate(H-L-Lys)及NO前体L-Arginine(L-Arg)对静止期VSMC生长无显著影响,亦未引起细胞内蛋白磷酸化、PKC及MAPK活性发生显著改变; 5、10、20μmol.L-1 H-L-Lys使bFGF刺激的VSMC增殖分别减少43.4%、46.6%和47.6%(均P<0.01),细胞内PKC活性分别下降25.6%、31.8%和33.9%(均P<0.01),MAPK活性分别降低15.0%、25.5%和40.1%(均P<0.01); 5、10、20mmol.L-1 L-Arg使bFGF刺激的VSMC增殖分别降低30.2%、40.5%和51.9%(均P<0.01),细胞内PKC活性分别降低29.8%、28.9%和36.6%(均P<0.01),MAPK活性分别降低19.4%、32.4%和44.4%(均P<0.01);10 μmol.L-1 H-L-Lys和10 mmol.L-1 L-Arg引起bFGF促进的VSMC内蛋白磷酸化程度分别下降31.8%和37.4%(均P<0.01).结论:NO和CO可抑制bFGF刺激的大鼠VSMC增殖,其机制与它们抑制bFGF促进的细胞内蛋白磷酸化及PKC和MAPK活性有关.
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一氧化氮对肺动脉平滑肌细胞HO-1 mRNA表达的影响
目的:研究一氧化氮(NO)供体sodium nitroprusside (SNP)对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)HO-1 mRNA的表达及CO含量影响,以探讨NO对血红素加氧酶/一氧化碳(HO/CO)体系的调节作用.方法:体外培养大鼠肺动脉平滑肌细胞,分别与10-3 molL-1和10-4 mol*L-1的SNP在常氧及低氧12和24 h条件下共同孵育.用荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)对大鼠PASMC HO-1 mRNA表达进行检测,并用分光光度计检测PASMC培养液中CO与NO相对含量的变化.结果:低氧使大鼠PASMC HO-1 mRNA的表达及CO含量呈一致性增高.给予SNP,HO-1 mRNA的表达在常氧及低氧时呈剂量和时间依赖性增高趋势,并伴随CO含量的一致性改变.结论:外源性NO能够诱导常氧及低氧大鼠PASMC HO-1 mRNA的表达,使PASMC CO释放增多,上调HO/CO体系功能.
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吸入左旋精氨酸对心内直视术后肺缺血再灌注损伤的保护作用
[目的]本实验旨在评估风湿性心脏病术后雾化吸入左旋精氨酸对肺缺血再灌注的保护作用.[方法]将32例风湿性心脏病行瓣膜置换术的患者随机分成两组,精氨酸组(A组)于术后雾化吸入左旋精氨酸,对照组(B组)雾化吸入同等剂量的生理盐水.观察患者治疗前后氧合指数(OI),肺泡一动脉氧分压差(PaaO2),肺内分流差(QS/Qt)以及血浆一氧化氮(NO)及丙二醛(MDA)浓度的变化.[结果]处理组与对照组比较,能增加血浆NO含量(P<0.01)并能减少血浆MDA水平(P<0.05)且PA-a02及QS/Qt低于对照组(P<0.05),OI高于对照组(P<0.01).[结论]术后雾化吸入左旋精氨酸能有效缓解肺缺血再灌注损伤,改善肺功能.
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一氧化氮在大鼠肝缺血预处理中的作用
目的探讨一氧化氮(NO)在大鼠肝脏缺血预处理(IP)中的作用.方法 131大鼠随机分为缺血再灌注(I/R)组、IP组及假手术(S)组,观察术后2h,24h及1周后血浆NO,AST及ALT以及大鼠死亡率及肝脏组织病理改变. 结果 (1)血浆NO IP组在术后即升高,3个时段均明显高于S组(P<0.05,P<0.01,P<0.05);I/R组在2h后低于S组(P <0.05),24h与S组无显著差异(P>0.05),1周时高于S组(P<0.05);IP组于2h(P<0.01)及24h(P<0.01)时均高于I/R组.(2)ALT IP组及I/R组在2h(P<0.05)及24h(P<0.01)时均高于S组;IP组显著低于I/R组(P<0.05);1周时IP组与S组间差异无显著性,I/R组显著高于IP组(P<0.05)及S组(P<0.01).(3)IP组及I/R组血浆NO与ALT呈负相关(P<0.01,P<0.05).(4)肝脏病理改变IP组较I/R组为轻.(5)术后2h及累计动物死亡率I/R组显著高于S组及IP组(P<0.05),而IP组与S组无统计学差异.结论 IP对肝脏I/R具有保护作用,该作用可能与血浆NO升高有关,NO升高的峰值提前在经典IP中具有重要的作用.
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一氧化氮对庆大霉素耳毒性的影响
目的研究耳蜗内不同水平的一氧化氮(NO)含量对庆大霉素(GM)耳毒性的影响.方法将实验动物豚鼠随机分为GM组;庆大霉素加左旋精氨酸(GM加L-Arg)组;庆大霉素加NG-单甲基-L-精氨酸(GM加L-NMMA)组和正常对照组.实验过程中观察动物体重变化,检测ABR反应阈;取标本检测血清和耳蜗组织NO含量,耳蜗铺片观察毛细胞损失程度.结果对照组动物体重增加明显,各实验组体重增加缓慢,其中GM加L-Arg组体重略有下降.实验第4周,GM加L-Arg组ABR反应阈升高明显,与GM组比较有统计学意义(P<0.05),GM加L-NMMA组ABR反应阈升高较少,与GM组比较有统计学意义(P<0.05).GM加L-Arg组血清和耳蜗NO含量明显升高,GM加L-NMM A组NO含量升高不明显,与GM组比较差异具有显著性(P<0.05).耳蜗铺片各组毛细胞损失程度与ABR变化相对应.结论增加耳蜗NO含量可增加GM耳毒性,减少耳蜗NO含量可减轻GM耳毒性.
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大鼠肝缺血预处理过程中一氧化氮对IL-1β及TNF-α的影响
目的探讨大鼠肝脏缺血预处理(IP)过程中一氧化氮(NO)合成对血清白细胞介素-1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响.方法 169只大鼠随机分为缺血再灌注(I/R组)、IP组、左旋精氨酸加IP(L-Arg+IP)组及假手术(S)组.检测术后1h、24h及1周时血浆NO浓度及血清IL-1β.TNF-α的浓度.结果 1.血浆NO水平:IP组及L-Arg+IP组均明显高于S组(P＜0.01),在2h及24h显著高于I/R组(P＜0.01),且L-Arg+IP组在2h时显著高于IP组(P＜0.05);2.血清IL-1β的水平:IP组在2h及24h均显著低于I/R组(P＜0.01,P＜0.05)及S组(P＜0.01),在1周时显著低于I/R组(P＜0.01);L-Arg+IP组在术后2h显著低于IP组(P＜0.05).3.血清TNF-α的水平:IP组在三个时间点均显著低于I/R组(P＜0.01),在24h时显著高于S组(P＜0.01);在2h及24h时显著高于L-Arg IP组(P＜0.05,P＜0.01).L-Arg+IP组与S组均无统计学差异(P＞0.05).结论肝脏缺血预处理能下调血液TNF-α及IL-1β水平,且这种下调作用可能与NO合成增加有关;增加NO的合成可增强这种下调效应,进一步增强缺血预处理对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用.
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一氧化氮在顺铂耳、肾毒性中的作用
目的:探讨一氧化氮在顺铂的耳毒性、肾毒性机制中的作用.方法:应用免疫组织化学的方法研究顺铂中毒对诱导型一氧化氮合酶活性的影响.结果:正常对照组豚鼠的耳蜗螺旋器、肾小球、肾小管的上皮细胞呈免疫组化阴性染色;而实验组的耳蜗螺旋器的内、外毛细胞,肾近曲小管、远曲小管的上皮细胞呈免疫组化阳性染色.结论:一氧化氮可能在顺铂的耳毒性、肾毒性中起重要作用.
