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改良法检测乙型肝炎病毒核心抗体结果的评价
目的:探讨竞争ELISA改良法对乙型肝炎病毒核心抗体结果的影响.方法:收集乙型肝炎病毒核心抗体阳性标本156份及随机血清标本85份,用常规法和改良法两种加样方式检测核心抗体,并以层析ELlSA作为对照.结果:两种加样方式检测的核心抗体结果A值存在统计学差异(t=4.121,P<0.01);对随机收集的血清标本,常规法与层析法存在统计学差异(X2=6.01,P<0.05).结论:在竞争ELISA法中,改良法的应用可有效降低核心抗体的假阳性率.
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酶标板法测定GPT的内部质量控制
目的:为提高GPT测定结果的准确性,保证血液质量.方法:酶标板法测定GPT原理是速率法,其实验参数是根据IFCC推荐的方法建立的,该方法操作简单,自动化程度高,设备性能价格比较适中,尤其适用于大量标本的检测.结果:实验过程中的影响因素多,易造成检测结果失控.结论:除参加卫生部临床检验中心和全国血液质量管理委员会的室间质评外,还应建立开展GPT的室内质量控制,保证检验结果的精密度和准确性,保证检测结果有效性.现将结果报告如下.
关键词： 丙氨酸转氨酶/血液 酶联免疫吸附测定/方法 人类 -
金标法检测HBsAg漏检原因分析
光敏复合树脂是临床治疗龋齿广为认可的材料.众所周知光敏合树脂对牙髓具有刺激性,在治疗深龋时会采取先垫底再充填的方法.但是人们在治疗中龋时,往往忽略了垫底问题,导致治疗的失败.本文选取了182颗患中龋的牙齿,分别用光敏复合树脂直接充填和水门汀垫底后充填,观察1a后牙髓炎的发生率,并作一分析报告如下.
关键词： 肝炎表面抗原 乙型/分析 胶体金/诊断应用 酶联免疫吸附测定/方法 指示剂和试剂 -
ELISA法检测梅毒螺旋体抗体钩状效应2例分析
酶联免疫吸附试验(ELISA)检测梅毒螺旋体抗体(TP～Ab)由于其试剂成本低、灵敏度及特异性高、可采用自动化分析、结果易保存等优点,已成为健康人群筛查的首选方法[1].
关键词： 酶联免疫吸附测定/方法 密螺旋体 苍白/免疫学 病例报告[文献类型] 人类 -
酶联免疫吸附试验一步法检测HBsAg的分析体会
乙型肝炎表面抗原的检测是诊断乙型肝炎的主要指标.随着检测技术的不断发展,ELISA一步法检测HBsAg的试剂、方法均已成熟,因其方法简便、灵敏度高、特异性强、实验要求条件不高而被各级医疗机构广泛采用[1].但其方法的缺点是干扰因素特别多,在实际操作中每一步控制不好都可能影响检测结果的质量,现针对操作中可能出现的问题进行分析,旨在提高HBsAg检测结果的准确性.
关键词： 肝炎表面抗原 乙型/分析 酶联免疫吸附测定/方法 -
临床ELISA检测干扰因素分析及处理
ELISA即酶联免疫吸附试验,是常用于各种抗原和抗体的测定.其操作简便、快速、消耗成本低,被临床实验室广泛用于传染病、肿瘤等的筛查和诊断.但ELISA测定中的干扰因素较多,而且操作中有一定的技术要求,在测定中常出现检测结果重复性较差或假阴性、 假阳性结果.因此,学会分析和处理引起ELISA测定误差的干扰因素就尤为重要.
关键词： 酶联免疫吸附测定/方法 -
ELISA测定结果的影响因素及其排除方法
目前酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA,简称酶免)是临床实验室常用的一种标记免疫方法.ELISA在基础研究和常规的临床实验室中有着广泛的适用性,具有操作简便,灵敏度较高,试剂成本低,环保,适于大批量人群抗原抗体筛查等优点,已广泛应用于肝炎病毒,艾滋病毒筛查,癌胚抗原,甲胎蛋白和激素等项目的检测.但ELISA法测定结果的影响因素较多,影响因素主要有:(1)试剂因素;(2)标本因素;(3)实验原理或操作方法;(4)环境因素等.因此在临床检验工作中,除正常反应外,还常会出现一些假阳性和假阴性等异常结果.总结如下.
关键词： 酶联免疫吸附测定/方法 -
非小细胞肺癌患者血清TGF-β1升高的临床研究
目的:观察肺癌患者与正常人血清转化生长因子β1(TGF-β1)含量的差异,探讨血清TGF-β1含量与肺癌组织学类型、分化程度、TNM分期等的相关性.方法:收集正常入与肺癌患者的血清,血清TGF-β1的含量用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定.结果:68例肺癌患者血清TGF-β1的含量为(37±13)ng/mL,16例正常人血清TGF-β1的含量为(30±13)ng/mL,两组比较差异有显著性(P＜0.05).血清TGF-β1的含量与肺癌TNM分期有关,统计学处理结果表明,Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期肺癌患者的血清TGF-β1含量差异有显著性(P＜0.05),随着肺癌TNM分期的升高,血清TGF-β1的含量逐渐升高.结论:肺癌患者血清TGF-β1含量可能与肺癌的病情进展有关,由于TGF-β1具有较强的免疫抑制作用,因此,TGF-β1的基因表达增强可能是肺癌晚期患者较早期患者免疫功能降低更为明显的原因之一.
关键词： 肺肿瘤 转化生长因子/血液 酶联免疫吸附测定/方法 -
重症肌无力乙酰胆碱受体抗体的研究
重症肌无力(mysthenia gravis)是累及神经肌肉接头处乙酰胆碱受体抗体(acatylcholine receptor antibody,AchRab)的自身免疫性疾病[1].近年来发现一系列的非AchRab骨骼肌抗体[2],Kyanodine受体抗体及补体C9等均与重症肌无力的发病有关[3].其发病与患者体内异常增高的AchRab造成骨骼肌终板上AchRab数目减少及功能障碍有关.目前常用检测方法主要有放射免疫法(radio immunization assay,RIA)和酶联免疫吸附法(enzyme linked immunororbent assay,ELISA),而后者更易推广应用.本文从1997年7月～1998年11月采用ELISA的方法对384例重症肌无力患者及正常人血清进行了检测,现将结果报道如下.
关键词： 重症肌无力 受体 胆碱能/分析 抗体 酶联免疫吸附测定/方法 -
荧光定量PCR在手足口病早期诊断中的应用价值
目的 评价荧光定量PCR技术在手足口病早期诊断上的应用价值. 方法 采用荧光定量PCR和ELISA法,检测97份疑似手足口病患者的咽拭子及血清标本. 结果 97份咽拭子标本:荧光定量PCR检测肠道病毒EV71型阳性41例,阳性率42.27％;血清ELISA检测肠道病毒EV71抗体,阳性34例,阳性率35.05％.2种方法阳性符合率为82.93％. 结论 荧光定量PCR是一种特异、敏感、高效、快速的实验室检测方法,对于手足口病的早期诊断,早期救治非常重要.
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梅毒螺旋体重组蛋白rTpN17或rTpN47为抗原的ELISA与TRUST和TPHA血清学检测效果的比较
目的:克隆并构建梅毒螺旋体tpn17、tpn47基因原核表达系统,建立基于rTpN17、rTpN47的ELISAs,并对其用于梅毒血清学诊断的敏感性和特异性进行评价.方法:采用PCR扩增tpn17和tpn47基因并构建tpn17和tpn47基因原核表达系统.采用SDS-PAGE检测目的重组蛋白rTpN17和rTpN47 表达情况,Ni-NTA亲和层析法提纯rTpN17和rTpN47,Western blot检测rTpN17和rTpN47免疫反应性.分别以rTpN17和rTpN47为包被抗原,建立检测血清标本中梅毒抗体的ELISAs(rTpN17-ELISA和rTpN47-ELISA),检测200例健康人、25例类风湿关节炎(RA)和17例系统性红斑狼疮(SLE)患者血清样本,并与甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和梅毒螺旋体间接血凝试验(TPHA)检测效果进行比较.结果:克隆的tpn17和tpn47基因与GenBank中相关序列相似性为100%.rTpN17和rTpN47表达量分别为细菌总蛋白的37.2%和26.8%.提纯后的rTpN17和rTpN47能与梅毒抗体阳性血清发生明显的结合反应.TPHA检测阳性率高(99.1%,P<0.001),rTpN17-ELISA和rTpN47-ELISA检测阳性率相近(85.3%和84.3%,P=0.427),TRUST检测阳性率低于rTpN17-ELISA(P=0.001),但与rTpN47-ELISA相近(P=0.014).所有健康人血清、RA和SLE患者血清标本的rTpN17-ELISA、rTpN47-ELISA和TPHA检测结果均为阴性,但有7.1%(3/42)RA和SLE患者血清标本TRUST检测结果阳性.结论:以rTpN17和rTpN47为抗原的ELISAs可作为快速、简便、敏感性和特异性较高的梅毒血清学筛查方法,而且rTpN17和rTpN47仍保持原有免疫反应特异性.
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基于问号钩端螺旋体rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2融合抗原的ELISAs建立及应用
目的:建立基于问号钩端螺旋体(简称钩体)rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2融合抗原的ELISAs,并应用于检测钩体病患者血清特异性IgG和IgM.方法:采用显微镜凝集试验(MAT),检测钩体病患者血清及rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2兔抗血清对我国问号钩体参考标准株的效价.分别以rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2、rLipL32/1、rLipL21和rOmpL1/2为包被抗原,建立检测血清特异性IgM和IgG的ELISAs,并用于检测107份MAT阳性钩体病患者血清标本.结果:MAT结果证实,66%(71/107)患者感染黄疸出血群问号钩体,rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2兔抗血清对我国15株问号钩体参考标准株的凝集效价为1∶20～1∶160.rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2、rLipL32/1、rLipL21、rOmpL1/2抗原用于检测IgM的ELISA阳性率分别为89.7%、75.7%、85.1%和79.4%,用于检测IgG的ELISA阳性率分别为99.1%、99.1%、94.4%和86.0%.rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2-IgM-ELISA检测阳性率高于其它3种检测IgM的ELISAs(P<0.05),rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2-IgG-ELISA检测阳性率高于rOmpL1/2-IgG-ELISA(P<0.05),但与rLipL21-IgG-ELISA及rLipL32/1-IgG-ELISA接近(P>0.05).结论:rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2-ELISAs可作为敏感、特异的通用型钩体病血清学早期诊断方法.
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酶联免疫吸附试验、胶体金法和化学发光法检测孕妇人巨细胞病毒感染的对比研究
目的：分析酶联免疫吸附试验（ELISA ）、胶体金法和化学发光法检测孕妇人巨细胞病毒（HCM V ）特异性抗体IgG、IgM 的价值。方法：纳入862例孕妇，分别采用ELISA法、胶体金法和化学发光法检测IgG及IgM 抗体水平，并计算3种方法诊断孕妇HCM V感染的灵敏度、特异度和阳性预测值，对3组结果进行比较。结果：ELISA法、胶体金法及化学发光法检测得HCM V IgG抗体的阳性率分别为90．37％、46．06％、91．88％，ELISA 法及化学发光法的阳性率高于胶体金法（P＜0．01）；ELISA法、胶体金法及化学发光法检测得HCMV IgM 抗体的阳性率分别为69．72％、49．54％、91．07％，化学发光法及ELISA法的阳性率显著高于胶体金法（P＜0．01），化学发光法的阳性率高于ELISA法（P＜0．05）。3种方法检测HCMV感染的灵敏度、特异度及阳性预测值差异均有统计学意义（P＜0．05），其中化学发光法的灵敏度、特异度及阳性预测值均显著高于ELISA法和胶体金法。结论：化学发光法检测孕妇 HCM V IgG、IgM 抗体水平阳性检出率高，诊断灵敏度、特异度及阳性预测值高，可以为临床诊断及治疗提供可靠的依据。
关键词： 巨细胞病毒感染/诊断 酶联免疫吸附测定/方法 胶体金法 化学发光法
