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AP-2α、Bcl-2及C-myc在重度子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义
目的 探讨在重度子痫前期患者胎盘组织中转录因子激活蛋白-2α(AP-2α)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)及原癌基因(C-myc)的表达情况及临床意义.方法 选取86例于2013年5月至2014年5月期间行剖宫产术分娩的产妇,分为正常对照组(n=43)与重度子痫前期组(n=43),应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和免疫组化法检测两组产妇胎盘组织中AP-2α、Bcl-2和C-myc的表达.结果 重度子痫前期组胎盘组织中AP-2α蛋白阳性表达显著高于对照组(P<0.05),C-myc、Bcl-2蛋白阳性表达均显著低于正常对照组(P<0.05);相较于对照组,重度子痫前期组中AP-2α mRNA表达明显升高,Bcl-2 mRNA和C-myc mRNA表达明显降低(P<0.05).结论 在重度子痫前期胎盘组织中C-myc、Bcl-2的表达下降,AP-2α表达上升,这种差异表达可能参与疾病的病理生理过程.
关键词： 重度子痫前期 胎盘组织 转录因子激活蛋白-2α B淋巴细胞瘤-2基因 原癌基因 -
AP-2α对滋养细胞凋亡、侵袭作用的影响
目的 研究转录因子激活蛋白-2α(Transcription factor activator protein-2 α,AP-2α)对滋养细胞BeWo凋亡、侵袭等生物学功能的影响,探讨在子痫前期(preeclampsia,PE)发生发展中的作用.方法 将已构建的pIRES2-EGFP/AP-2α真核表达载体,采用瞬时转染的方法转入滋养细胞系BeWo细胞中,应用real time-PCR及Western blot方法,检测各组BeWo细胞中AP-2αmRNA及蛋白表达;采用流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell法检测转染后各组细胞侵袭力.结果 AP-2α转染BeWo细胞后AP-2αmRNA和蛋白表达量较对照组显著增加,其差异有统计学意义(P＜0.05).流式细胞仪检测细胞凋亡结果显示:与对照组比较,AP-2 α转染组细胞凋亡数量明显增多,差异有统计学意义(P＜ 0.05);Transwell检测细胞侵袭能力实验结果显示:与对照组比较,AP-2α转染组细胞侵袭的数量显著减少,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 证明AP-2α促进滋养细胞凋亡并降低其侵袭力,造成滋养细胞层浅表植入,从而为子痫前期致病机理研究提供了理论依据.
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转录因子激活蛋白-2α在肿瘤中的作用与研究进展
转录因子激活蛋白-2α (transcription factor AP-2 alpha,TFAP2α)是一种能与DNA特异性结合的转录因子,它参与调节正常细胞增殖分化及胚胎发育,并通过调控信号转导来开启、关闭、增强或减弱多种靶基因的表达,对肿瘤细胞的增殖、分化、侵袭及转移发挥重要调控作用.近年来国内外对TFAP2α基因在肿瘤中的作用进行了大量研究,TFAP2α在多种肿瘤组织中存在异常表达,且表达程度与肿瘤类型、临床分期、病理分化程度等有着密切的关系,它在不同肿瘤中发挥促癌或抑癌的作用.本文重点介绍TFAP2 α基因的结构和功能及其在肿瘤发生发展中的作用.
关键词： 转录因子激活蛋白-2α 基因 肿瘤 分子生物学 -
转录因子激活蛋白-2α重组质粒的构建及其对肾透明细胞癌细胞增殖能力的影响
目的 构建转录因子激活蛋白-2α(transcription factor AP-2 alpha,TFAP2α)重组真核质粒及其稳转细胞株,研究过表达TFAP2α对肾透明细胞癌细胞增殖能力的影响.方法 采用反转录PCR方法从293T细胞全基因组DNA中扩增TFAP2α基因编码序列,运用质粒酶切、连接及转化构建重组真核质粒pLV-EGFP(2A)Puro-TFAP2α,测序鉴定.利用慢病毒包装系统将重组质粒转染人293T细胞,制备病毒悬液转染质粒入肾透明细胞癌细胞系786-O和Caki-2中,嘌呤霉素加压筛选,形成稳定转染细胞株后扩大培养,并通过实时定量PCR法和Western Blot法检测转染细胞中TFAP2α的mRNA和蛋白的表达.通过MTS实验、平板克隆实验和细胞周期检测,观察未转染质粒组、转染空载体组和转染重组质粒组细胞增殖和周期的变化.结果 成功构建重组真核质粒pLV-EGFP(2A)Puro-TFAP2α和稳定转染过表达TFAP2α的786-O和Caki-2细胞株.重组质粒组TFAP2αmRNA表达水平和蛋白表达水平均明显高于未转染组和空载体组(P＜0.05).MTS实验中,重组质粒组490 nm处光吸收值较未转染组和空载体组显著降低(P＜0.05).平板克隆实验中,重组质粒组的平板克隆率较未转染组和空载体组亦显著降低(P＜0.05).与未转染组和空载体组比较,重组质粒组G0/G1期细胞比例显著升高(P＜0.05),S期细胞比例显著降低(P＜0.05),G2/M期细胞比例无统计学差异(P＞ 0.970).结论 过表达TFAP2α能明显降低肾透明细胞癌细胞系786-O和Caki-2细胞增殖能力,影响细胞周期变化,停留在G0/G1期的细胞明显增加,而S期的细胞明显减少,使其发生G1/S期阻滞从而抑制细胞增殖.
关键词： 转录因子激活蛋白-2α 质粒 肾透明细胞癌 增殖 -
大肠癌中转录因子激活蛋白-2α与癌胚抗原的表达及其相关性
目的 探讨转录因子激活蛋白-2 α(AP-2α)与癌胚抗原(CEA)在大肠癌发生、发展过程中的表达情况及其表达的相关性.方法 采用实时荧光定量PCR的方法分析60例大肠癌组织及正常组织中AP-2α mRNA及CEA mRNA表达差异,分析其与患者临床资料、病理参数之间的关系,研究60例大肠癌组织中AP-2α mRNA及CEA mRNA表达的相关性.结果 大肠癌组织、正常组织AP-2α mRNA相对表达值(RQ)分别为3.264±0.877、17.484±3.608；CEA mRNA RQ值分别为16.421±4.987、2.219±1.313；大肠癌组织中AP-2α mRNA的表达显著低于正常组织,CEA mRNA显著高于正常组织,差异均有统计学意义(P＜0.01)；大肠癌组织AP-2αmRNA和CEAmRNA表达情况在不同性别、年龄、肿瘤部位中差异均无统计学意义(P＞0.05)；大肠癌的不同组织学分级及Dukes分期中,CEA呈现出过表达状态,而AP-2α呈现出表达降低或缺失状态；60例大肠癌组织中AP-2α和CEA的表达具有相关性(r=-0.790,P＜0.01),且呈负相关关系(-1＜r＜0).结论 转录因子AP-2α在大肠癌组织中呈现低表达或表达缺失状态,AP-2α和CEA的表达呈现一定的负相关关系,提示AP-2α和CEA可为肿瘤的诊断和治疗提供新的依据.
关键词： 大肠癌 转录因子激活蛋白-2α 癌胚抗原 实时定量PCR -
AP-2α、Bcl-2及C-myc在重度子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义
目的：探讨转录因子激活蛋白-2α（ AP-2α）与B淋巴细胞瘤-2基因（ Bcl-2）、C-myc在重度子痫前期胎盘组织中的表达及其意义。方法采用免疫组化法及实时荧光定量-PCR（ RT-PCR）的方法，检测重度子痫前期组胎盘组织及正常对照组胎盘组织中AP-2α及Bcl-2、C-myc蛋白及mRNA的表达。结果重度子痫前期组胎盘组织中AP-2α蛋白明显高于正常对照组（P﹤0.05），Bcl-2和C-myc蛋白表达明显低于正常对照组（P﹤0.05）；重度子痫前期组胎盘组织中AP-2α mRNA明显高于正常对照组（P﹤0.05），C-myc和Bcl-2 mRNA表达明显低于正常对照组（ P﹤0.05）。结论 AP-2α和Bcl-2、C-myc在重度子痫前期患者胎盘组织中的差异表达参与重度子痫前期的病理生理过程。
关键词： 转录因子激活蛋白-2α B淋巴细胞瘤-2基因 c-myc 重度子痫前期 -
转录因子激活蛋白-2α在急性肺损伤大鼠肺组织中的表达
目的：观察转录因子激活蛋白-2α（ AP-2α）在急性肺损伤（ ALI ）大鼠模型肺组织中的表达差异，为ALI的治疗提供新的思路。方法将40只健康SPF 级成年SD大鼠，随机分成对照组（ A组）、油酸组（ B组）、盐酸组（C组）和脂多糖（LPS）组（D组）。 A组：不做任何处理；B组：尾静脉注射高浓度（99％）油酸0.04 mL／kg；C组：经气管导管给予0.1 mol／L的盐酸1.0 mL／kg；D组：经气管导管给予LPS 16 mg／kg。均在4 h后，取动脉血清测定转化生长因子-β1（TGF-β1）和单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的浓度，立即处死大鼠后取肺组织光镜下进行病理学分析，并用免疫组化和Western blot方法检测AP-2α的阳性表达。结果（1）在光镜下，与A组比较，B、C、D组均可见肺泡间隔增宽，有明显肺间质及肺泡水肿，肺泡腔内有浆液性渗出物及大量炎性反应细胞、红细胞渗出，部分可见“透明膜”样改变；B、C、D组肺组织光镜下病理评分均高于A组。（2） B、C、D组肺组织中AP-2α的表达较A组明显升高（P＜0.05）。（3）B、C、D组动脉血清中TGF-β1和MCP-1浓度较A组明显升高（P＜0.05）。结论 ALI大鼠模型动脉血清中的TGF-β1和MCP-1的含量明显升高；AP-2α的表达在ALI大鼠模型肺组织中存在明显升高，可能与ALI的发生、发展有关，为ALI的治疗提供新的思路。
关键词： 转录因子激活蛋白-2α 急性肺损伤 大鼠模型
