首页 > 文献资料
-
髓系细胞触发受体-1对大鼠肠巨噬细胞凋亡的影响
目的 探讨髓系细胞触发受体-1 (triggering receptor expressed on myeloid cells-1,TREM-1)的表达对大鼠肠巨噬细胞凋亡的影响.方法 体外培养肠巨噬细胞,实验3分组,每组6孔:对照组、LPS组及LPS+LP17组.加入药物LPS(1 mg/L)和LP17 (0.1 mg/L),培养6h后用TUNEL试剂盒及流式细胞仪对大鼠肠巨噬细胞凋亡进行检测,利用SPSS 18.0软件进行统计分析.结果 细胞生长状态良好,分布均匀,细胞活力约为80％～85％,CD14免疫荧光鉴定证实为肠巨噬细胞.经药物处理后,TUNEL检测细胞凋亡情况:LPS组(44.33±7.74)％较对照组(19.17±6.01)％明显增多(P=0.000),LPS+ LP17组(28.33±6.53)％的凋亡细胞比LPS组(44.33±7.74)％明显减少(P =0.004),对照组(19.17 ±6.01)与LPS+ LP17组(28.33±6.53)％的凋亡细胞差异无统计学意义(P =0.050).采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况:LPS组(16.47±1.66)％较对照组(7.70±1.52)％明显增多(P=0.000),LPS+LP17组(11.47±3.12)％的凋亡细胞比LPS组(16.47±1.66)％明显减少(P=0.018),对照组(7.70±1.52)％与LPS+ LP17组(11.47±3.12)％的凋亡细胞差异无统计学意义(P =0.061).结论 LP17能抑制肠巨噬细胞TREM-1的表达,减少肠巨噬细胞凋亡.
-
大鼠肠巨噬细胞TNFα表达及复方大承气汤的影响
目的:探讨体外培养的肠巨噬细胞分泌TNFα的规律及地塞米松、TNFα单克隆抗体及复方大承气汤对LPS诱导的肠巨噬细胞TNFα产生的影响.方法:体外分离培养大鼠肠巨噬细胞.设对照组、脂多糖组、地塞米松处理组、TNFα单抗处理组和复方大承气汤处理组.每组分别在3 h,6 h,12 h和24 h取上清液,用放免法检测TNFα浓度.并分别收集肠巨噬细胞,提取RNA,采用RT-PCR法相对定量TNFαmRNA.结果:肠巨噬细胞经脂多糖(LPS)诱导后,各时相TNFα分泌及TNFmRNA表达均明显增加;地塞米松、TNFα单克隆抗体及复方大承气汤处理后,各时相TNFα分泌都较脂多糖(LPS)诱导组显著下降,各处理组TNFα mRNA表达在3h时与脂多糖(LPS)诱导组比较无明显差异,6h、12h、24 h,地塞米松、复方大承气汤处理组显著降低,而TNFα单克隆抗体处理组无明显差异.结论:LPS是肠巨噬细胞分泌TNFα的有效激活剂,地塞米松、复方大承气汤能从蛋白质及核酸水平抑制TNFα的产生,而TNFα单克隆抗体只能从蛋白质水平抑制TNFα的产生.
-
大鼠肠巨噬细胞TREM-Ⅰ表达对其侵袭力和肠上皮细胞增殖的影响
目的:探讨肠巨噬细胞髓系细胞触发受体-l(triggering receptor expressed on myeloid cells-1,TREM-1)的表达对肠巨噬细胞侵袭力和肠上皮细胞增殖的影响,进一步明确肠巨噬细胞在肠屏障功能障碍(intestinal barrier dysfunction,IBD)中可能的作用.方法:体外培养肠巨噬细胞及肠上皮细胞,逆转录-多聚酶链反应(reverse transcriptionpolymerase chain reaction,RT-PCR)检测大鼠肠巨噬细胞的TREM-1和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)基因表达水平,用Tanswell板将二者共培养,MTT法绘制肠上皮细胞生长曲线,Matrigel侵袭实验检测肠巨噬细胞对肠上皮细胞的侵袭力.结果:脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)组TREM-1及TNF-α的基因表达水平高于LPS+LP17组和空白对照(Control)组(均P＜0.05); LPS+LP17组与Control组相比无差异.与Control组相比,两实验组的肠上皮细胞的生长均受到抑制(均P＜0.05); LPS组肠上皮细胞生长的抑制大于LPS+LP17组(P＜0.05).侵袭实验中3组平均穿膜细胞数分别为29.3±2.1、46.0±3.6和34.7±3.1.LPS组与Control组比较差异具有明显统计学意义(P＜0.01),LPS组与LPS+LP17组相比差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:LP17不但能抑制肠巨噬细胞TREM-1的表达及炎症介质的释放,还可以抑制肠巨噬细胞对上皮细胞的侵袭.利用LP17阻断TREM-1信号转导可减轻肠巨噬细胞对肠上皮细胞的损害,有望成为治疗IBD的新靶点.
关键词： 肠巨噬细胞 髓系细胞触发受体-1 肠上皮细胞 -
髓系细胞触发受体-1对大鼠肠巨噬细胞氧化应激的影响
目的：探讨髓系细胞触发受体（triggering receptor expressed on myeloid cells，TREM）-1的表达对大鼠肠巨噬细胞氧化应激的影响。方法：体外培养肠巨噬细胞，随机分3组，对照组常规培养，脂多糖组和脂多糖＋LP17组分别于培养基中加入脂多糖（1 mg／L），脂多糖（1 mg／L）＋LP17（0．1 mg／L），培养6 h，反转录聚合酶链反应（reverse tran-scription-PCR，RT-PCR）和蛋白质印迹法检测各组细胞 TREM-1及 TNF-α的表达，活性氧荧光探针（DHE）检测细胞活性氧含量的变化。结果：与对照组比较，脂多糖组和脂多糖＋LP17组肠巨噬细胞 TREM-1及 TNF-α的基因及蛋白表达明显增加（P 均＜0．05），且脂多糖＋LP17组明显低于脂多糖组（P ＜0．05）。与对照组比较，脂多糖组和脂多糖＋LP17组活性氧含量明显增加，且脂多糖组高于脂多糖＋LP17组。结论：抑制肠巨噬细胞 TREM-1的表达可减轻氧化应激对肠黏膜屏障的损伤。
关键词： 肠巨噬细胞 髓系细胞触发受体-1 氧化应激 -
LP17对大鼠肠巨噬细胞超微结构的影响
目的：：通过观察LP17对体外培养的大鼠肠巨噬细胞超微结构的影响,探讨LP17对激活的肠巨噬细胞的作用机制,寻找对肠黏膜屏障功能障碍的可能治疗方法。方法：体外分离、培养大鼠肠巨噬细胞分为对照组[未加脂多糖( LPS)和LP17处理],及实验组[包括LPS组(用LPS处理)和LPS+LP17组(用LPS及LP17处理)]。给药浓度为LPS 1 mg/L,LP170.1 mg/L,培养6 h后用0.25%胰酶消化收集细胞。 Tecnai 12透射电镜观察实验组及对照组大鼠肠巨噬细胞的超微结构变化。结果：经药物处理后,电镜下观察,对照组为正常巨噬细胞,实验组中LPS组巨噬细胞内出现大量溶酶体,LPS+LP17组巨噬细胞出现凋亡小体。结论：LP17能促使被激活的巨噬细胞凋亡。
关键词： 肠巨噬细胞 髓系细胞触发受体-1 LP17 肠黏膜屏障功能障碍 -
大鼠肠巨噬细胞肿瘤坏死因子蛋白质和基因表达规律及不同药物影响的研究
我们通过体外分离和培养大鼠肠巨噬细胞,研究肠巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子(TNF)-α的规律,特别是在脂多糖(LPS)刺激下TNF-αmRNA表达及地塞米松(DEX)、TNF-α单克隆抗体对LPS诱导的肠巨噬细胞TNF-α分泌及TNF-αmRNA表达产生的影响,以进一步明确肠道巨噬细胞在肠道屏障功能中的地位以及在机体全身和肠道局部炎症反应中的作用.
-
髓系触发受体-1的拮抗剂对大鼠肠巨噬细胞超微结构的影响
目的:探讨髓系触发受体-1(TREM-1)的拮抗剂对大鼠肠巨噬细胞超微结构的影响.方法:选择健康雄性SD大鼠分离肠巨噬细胞,鉴定完毕后分为3组,对照组未加LPS和LP17;LPS组的LPS给药浓度为1 mg/L,治疗组LPS给药浓度为1 mg/L,LP17给药浓度为0.1 mg/L.MTT法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测细胞TREM-1和TNF-α蛋白表达,电镜观察细胞超微结构.结果:大鼠肠巨噬细胞生长状态良好,免疫荧光显示为绿色荧光,CD14表达阳性,细胞分布较均匀.治疗组与对照组的细胞活力指数显著高于LPS组(P<0.05),细胞凋亡指数显著低于LPS组(P<0.05),TREM-1、TNF-α相对表达量显著低于LPS组(P<0.05),治疗组与对照组对比差异无统计学意义(P>0.05).电镜下观察对照组肠微绒毛整齐排列,巨噬细胞形态规则;LPS组发现肠巨噬细胞内出现大量凋亡小体,巨噬细胞体积增大;治疗组发现肠巨噬细胞内出现邵爱玲凋亡小体,巨噬细胞表面伪足少.结论:TREM-1特异性拮抗剂LP17能有效抑制巨噬细胞TREM-1与TNF-α的表达,减少巨噬细胞凋亡,提高细胞活力.
