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TIM-4基因多态性与湖北汉族变应性哮喘的相关性
T细胞免疫球蛋白结构域黏蛋白结构域蛋白(Tcell immunoglobulin domain and mucin domain protein,TIM)基因家族是2001年发现的新基因家族.
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原核表达的重组人B7.2 IgV区分子在体外实验中具有刺激活性
目的研究人B7.2分子中IgV和IgC 结构域何者含有与受体结合的位点;对由原核系统表达的B7.2蛋白体外共刺激活性作出评价。 方法 用PCR方法扩增人B7.2分子胞外区的三个片段,即IgV、IgC和包括IgV和IgC在内的Ig(V+C)区段,将三片段克隆入pGEM-Teasy。继而将三片段克隆入原核表达载体pGEX-4T-3,得到pGEX-4T-3-hB7.2 IgV、pGEX-4T-3-hB7.2 IgC和pGEX-4T-3-hB7.2 Ig(V+C)三个重组体,将三重组体转化宿主菌DH5α。经SDS-PAGE和Western blot证实与GST融合存在的相应靶蛋白的表达。用抗CD3单抗模拟T细胞活化的第一信号,用[3H]-TdR掺入法观察加入目的蛋白作为第二信号可否对T细胞活化起协同效应。结果 工程菌可表达出人B7.2分子的三种融合蛋白:GST-hB7.2 IgV、GST-hB7.2 IgC和GST-hB7.2 Ig(V+C), 且以包涵体形式存在。在第一信号存在条件下,GST-hB7.2 Ig(V+C)和GST-hB7.2 IgV均能协同第一信号活化T淋巴细胞,但GST-hB7.2 IgC无此功能。 结论 细菌可表达出具有功能活性的人B7.2融合蛋白,单一的人B7.2 IgV结构域足以与受体结合,共刺激T细胞活化。
关键词: 人B7.2/CD86 免疫球蛋白结构域 共刺激 T淋巴细胞活化 融合蛋白 -
髓样细胞触发受体样转录因子-1的研究进展
髓样细胞触发受体( triggering receptors expressed on mye-loid cells,TREMs)是免疫球蛋白超家族中的一个受体家族,人类TREMs基因簇定位于6号染色体的p21.1[1]。 TREMs家族中的成员都含有特征性的单一V形细胞外免疫球蛋白结构域,一个短胞质尾区和一个含有赖氨酸残基的跨膜结构域,从而可以与酪氨酸激酶结合蛋白12( DNAX-activation protein of 12 kDa,DAP12)信号通路相连接[2]。不同于其他的TREMs家族成员,在髓样细胞触发受体样转录因子-1(TREMs like transcript-1,TLT-1)的胞浆结构域还包含一个免疫受体酪氨酸抑制基序( ITIM),可以招募酪氨酸蛋白磷酸酯酶[3],因此认为TLT-1是TREMs受体家族中的抑制性成员。已有研究表明, TLT-1可以调节血小板的活化和炎症反应[4]。缺乏TLT-1的小鼠表现为血小板的聚集能力明显受损,容易出现内毒素血症引起的败血症性休克[5]。目前, TLT-1的接头异构体与短胞浆结构域已经被报道[6],这表明不同的TLT-1衍生物可能具有不同的细胞生物学功能。