首页 > 文献资料
-
c-MPL在急性髓系白血病患者白血病干细胞中的表达
本研究通过检测c-MPL在急性髓系白血病(AML)患者骨髓细胞中的表达,探讨c-MPL表达与CD34、CD38的相关性,以确定c-MPL在白血病干细胞的表达.通过流式细胞术检测29例初诊AML患者的c-MPL和CD34、CD38阳性细胞比例；比较患者c-MPL表达水平与正常对照的差别及与临床指标的关系；分析患者的c-MPL表达水平与CD34、CD38各部分细胞分群的关系及它们之间的相关性.结果表明:AML患者骨髓细胞中c-MPL表达水平显著高于正常对照组(P＜ 0.05)；c-MPL的表达与患者的年龄、性别、白细胞计数、AML1 -ETO融合基因、化疗后缓解情况无关；c-MPL在M2和M5分型中的表达显著高于正常对照组(P＜0.05).CD34阳性AML患者组的c-MPL表达水平显著高于CD34阴性AML患者组(P＜0.01).AML患者c-MPL在CD34+细胞中的表达显著高于CD34 -细胞(P ＜0.001)；AML患者中c-MPL在CD34+ CD38+和CD34+ CD38 -两群细胞中的表达无显著性差异(P＞0.05)；c-MPL和CD34的表达呈正相关(r=0.380,P=0.042).结论:c-MPL在AML患者中高表达,且与CD34的表达水平具有一定的正相关性,c-MPL表达于白血病干细胞.
-
中枢神经系统表达TPO受体的初步研究
为了研究中枢神经系统是否表达促血小板生成素(TPO)的受体c-mpl和TPO对神经细胞生长和保护作用,用免疫组织化学和RT-PCR方法分析c-mpl表达,用MTT,annexinV方法和流式细胞术检测、观察TPO对神经细胞生长和抗凋亡作用.结果表明,人中枢神经系统和小鼠神经细胞均表达TPO受体c-mpl,人大脑半球和小脑及小鼠神经干细胞株C17.2在mRNA水平表达c-mpl,进一步在蛋白水平证实TPO受体c-mpl在人大脑半球神经细胞表达,TPO对C17.2细胞有生长促进作用和抗凋亡作用.结论:本研究首次证实中枢神经系统表达TPO受体c-mpl和TPO有促进体外神经细胞生长和抗凋亡的作用.
-
cmpl在真性红细胞增多症患者骨髓CD34阳性细胞及血小板上的表达
本研究了解真性红细胞增多症(PV)患者血小板膜及骨髓CD34阳性细胞表面TPO受体(c-mpl)蛋白及骨髓造血细胞c-mpl mRNA表达情况.应用双色流式细胞术检测13例PV患者及15名正常对照者骨髓CD34阳性细胞表面c-mpl蛋白表达;应用单色流式细胞术检测15例PV患者及15名正常对照者血小板表面c-mpl蛋白表达;应用RT-PCR方法检查PV患者及正常对照者骨髓造血细胞c-mpl mRNA的表达情况.结果表明:CD34阳性细胞c-mpl蛋白表达在PV患者为0.99%±0.14%,与正常对照(0.92%±0.12%)相比无差别(p＞0.05);血小板c-mpl蛋白表达在PV患者为20.33%±4.84%,与正常对照(23.50%±3.64%)相比无差别(p＞0.05);骨髓造血细胞c.mpl mRNA与正常组相比也无明显差别(p＞0.05.)结论:PV患者骨髓CD34阳性细胞、血小板膜c-mpl蛋白及骨髓造血细胞c-mpl的mRNA表达无明显异常.
-
血小板生成素受体信号转导通路研究进展
血小板生成素(TPO)是一种重要的细胞因子,不仅在巨核细胞增殖、成熟和血小板产生中发挥主要的调控作用,而且参与造血干细胞自我更新和分化的调节.TPO与其受体c-Mpl结合后,c-Mpl形成同源二聚体,激活JAK/STAT、Shc/Ras/MAPK、PI3K/Akt等信号通路,引发一系列生理效应.本文主要对TPO、TPO受体蛋白的结构及其介导的信号转导通路等方面的研究进展作一综述.
-
温肾清卫颗粒调控ITP患者TPO、PAIgG及c-MPL mRNA的临床研究
目的 探讨温肾清卫颗粒对特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者血小板生成素(thrombopoietin,TPO)、血小板相关抗体IgG(platelet-associated immunoglobulin G,PAIgG)及TPO受体c-MPL mRNA水平的影响.方法 将60例患者随机分为治疗组(温肾清卫颗粒)、对照组(强的松)各30例,同时以20例健康志愿者为正常组.两治疗组经治1个月、3个月、6个月后,分别采用ELISA法检测血清TPO、PAIgG水平,采用半定量RT-PCR法检测外周血血小板c-MPL mRNA的相对量.结果 治疗1个月时,治疗组血小板计数低于对照组(P<0.05);治疗3个月及6个月时,治疗组血小板计数高于对照组(P<0.05).治疗1个月时,治疗组血清TPO、PAIgG水平高于对照组(P<0.05,P<0.01),两组血小板c-MPL mRNA水平比较无明显差异(P>0.05);治疗3个月、6个月时,治疗组血清TPO、PAIgG水平均低于对照组(P<0.05,P<0.01),血小板c-MPL mRNA均高于对照组(P<0.05,P<0.01).结论 温.肾清卫颗粒可能通过抑制ITP患者PAIgG表达以及调控c-MPL mRNA基因转录,促进血小板生成增加.
关键词： 特发性血小板减少性紫癜 中医药疗法 温肾清卫颗粒 血小板生成素 c-MPL -
血小板生成素促进HEL细胞增殖及其c-Mpl的表达
目的研究血小板生成素(thrombopoietin,TPO)对巨核细胞系-HEL细胞的增殖及其c-Mpl受体表达的影响.方法①细胞集落计数法研究TPO对HEL细胞增殖的影响;②间接免疫荧光方法及流式细胞术检测TPO刺激后,HEL细胞TPO受体c-Mpl的表达.结果①TPO可促进HEL细胞集落的形成;②TPO上调HEL细胞c-Mpl膜蛋白的表达.结论 TPO促进HEL细胞的增殖,其部分机制可能是通过上调TPO受体c-Mpl的表达来实现.
-
重组人白细胞介素-13对巨核细胞系-Dami细胞原癌基因c-mpl表达的影响
目的:研究重组人白细胞介素-13(rhIL-13)对巨核细胞系-Dami细胞原癌基因c-mpl表达的影响.方法:实验组细胞培养系统中分别加入25 ng/ml,50 ng/ml,100ng/ml rhIL-13,对照组不加任何细胞因子.用RT-PCR法检测c-mpl mRNA的表达.结果:经25 ng/ml、50 ng/ml、100ng/ml rhIL-13处理过的实验组Dami细胞较之对照组其c-mpl mRNA的表达分别提高24.8%、27.9%和31.5%.结论:rhIL-13增强了Dami细胞原癌基因c-mpl表达;rhIL-13促进Dami细胞增殖的部分机制可能是通过上调c-mpl的表达来实现的.
关键词： 重组人白细胞介素-13 Dami细胞 c-MPL -
模拟微重力对巨核细胞增殖和分化的影响
目的：探讨模拟微重力对巨核细胞增殖和分化的影响及机制。方法：利用RCCS-4模拟微重力，采用台盼蓝染色判断细胞活力，细胞计数及 CCK8法评估细胞增殖情况，采用流式细胞术检测 CD41＋/CD61＋细胞比例和细胞周期。 RT-PCR 法检测血小板生成素受体（c-mpl）和相关转录因子mRNA 表达水平。结果：培养24、48、72 h 后，SMG组细胞计数、CCK8法细胞增殖活性、G2/M期细胞比例、c-mpl mRNA 表达水平均显著低于 NG 组（P ＜0．05）；培养48、72 h 后 SMG 组 CD41＋/CD61＋细胞比例、Rant 相关转录因子1（RUNX-1） mRNA表达水平显著低于NG组（P＜0．05）。结论：模拟微重力抑制体外培养巨核细胞增殖和分化，转录受抑导致c-mpl 表达下调进而c-mpl介导的下游通路受抑可能是相关机制。
-
C-Mpl基因对骨骼代谢的影响及其机制
目的 观察C-Mpl对骨骼代谢平衡的影响,并对其机制进行初步研究.方法 以6月龄野生型(WT)小鼠和C-Mpl敲除小鼠(C-Mpl-/-)作为研究对象.采用Micro-CT扫描,进行股骨远端骨小梁参数分析,包括骨密度(BMD)、骨体积与组织体积比(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数目(Tb.N)、骨小梁分离度(Tb.Sp)和结构模型指数(SMI).通过三点弯曲试验记录股骨生物力学强度,Von Kossa及茜素红矿化染色观察骨矿化水平,微板法检测血清钙、磷水平变化.TRAP染色观察破骨细胞数量,体外流式细胞仪检测破骨细胞凋亡.流式细胞仪检测破骨细胞的ROS含量,qPCR和Western blot分析p38、p-p38、FoxO1和Nrf2表达变化.结果 Micro-CT扫描结果提示,与WT小鼠比较,C-Mpl-/-小鼠股骨干骺端松质骨明显增多,BMD、BV/TV、Tb.N显著升高,而Tb.Sp和SMI明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);Tb.Th两组差异无统计学意义.生物力学分析结果显示,C-Mpl-/-小鼠断裂负荷和刚度明显低于WT小鼠(P＜0.05).C-Mpl-/-小鼠股骨Von Kossa染色和成骨细胞茜素红染色均弱于WT小鼠,且血清中钙、磷含量亦明显低于WT小鼠(P＜0.05).TRAP染色结果显示,与WT小鼠相比较,C-Mpl-/-小鼠破骨细胞数量显著减少(8.667±1.202 vs 18.000±1.732,P ＜0.05).流式细胞仪检测发现,C-Mpl-/-小鼠破骨细胞凋亡率较WT小鼠明显增加[(14.54±1.17)％ vs (5.38 ±0.56)％,P＜0.05],且C-Mpl-/-小鼠破骨细胞的ROS水平明显低于WT小鼠破骨细胞(6 833.0±176.4 vs 12 933.0±202.8,P＜0.05).qPCR结果显示C-Mpl-/-小鼠破骨细胞中FoxO1和Nrf2表达水平较WT小鼠破骨细胞明显降低(P＜0.05),Westem blot结果也证实C-Mpl-/-小鼠破骨细胞中p-p38、FoxO1和Nrf2表达均显著下降(P＜0.05).结论 C-Mpl基因对骨骼代谢存在一定影响,C-Mpl敲除显著加速小鼠体内破骨细胞的凋亡,抑制破骨细胞生成,终可能导致C-Mpl-/-小鼠的骨骼衰老速度和骨质疏松程度均明显减慢.
-
白血病成骨细胞屏蔽共培养AML细胞化疗杀伤作用的研究
目的 探讨白血病成骨细胞对急性髓性白血病(AML)细胞屏蔽化疗杀伤的作用,及其与促血小板生成素/血小板生成素受体(TPO/c-MPL)信号通路的关系.方法 分离培养白血病骨髓间充质干细胞并行成骨诱导,ELISA法检测成骨细胞分泌血小板生成素(TPO)水平,流式细胞仪检测人红白血病细胞株(HEL) c-MPL表达.成骨细胞与HEL细胞共培养,观察在化疗药物柔红霉素干预下HEL细胞存活率.结果 白血病骨髓成骨细胞培养d7、d14 TPO表达分别为(176.84±15.32) ng/mL和(198.24±13.49) ng/mL,明显高于正常对照的TPO水平,分别为d7 (140.13±20.12)和d14(157.66±18.82) ng/mL.应用柔红霉素干预后,AML成骨细胞与HEL细胞共培养组半抑制浓度(IC50)为(3.320±0.218) μg/mL,高于HEL+正常来源成骨细胞组(2.236±0.167) μg/mL和HEL+ hFOBl.19组(2.254±0.111) μg/mL.生长曲线研究发现,在不同浓度DNR干预下,AML成骨细胞与HEL细胞共培养组中HEL细胞的细胞存活率大,均高于其他HEL共培养组.结论 白血病成骨细胞能有效屏蔽化疗药物对白血病细胞的杀伤作用,这种作用可能与白血病骨髓微环境内TPO/c-MPL信号通路相关.
-
C-MPL及其配体血小板生成素(TPO)与骨髓早期多系造血
C-MPL及其配体TPO的作用初被认为局限于巨核细胞系,主要调节巨核细胞和血小板生成.
