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木香、黄精提取液在小鼠体内抑制R质粒接合传递的实验研究
目的 观察中药木香、黄精提取液在小鼠体内抑制S.flexneri D15 R-plasmid Cm.和E coli 1485 Rif~R之间R质粒的接合传递作用.方法 木香、黄精提取液分别与S.flexneri D15 R-plasmid Cm~R和E.coli 1485 Rif~R混合后注入昆明小鼠腹腔;取作用24和48 h的腹腔液接种含氯霉素和不含氯霉素麦康凯琼脂平板,37℃培养.实验设溴化乙锭组和末加药对照组.根据培养24 h后的菌落数计算各组的R质粒转移率及R质粒转移抑制率.结果 木香组、黄精组及未加药对照组24 h R质粒转移率分别为(4.17±0.59)%、(11.83±2.37)%和(58.67±5.80)%,差异有统计学意义(P<0.01);48 h R质粒转移率分别为(1.94±0.62)%、(15.61±0.12)%和(57.61±3.32)%,差异有统计学意义(P<0.01).木香组和黄精组24 h的R质粒转移抑制率分别为(92.9±7.81)%和(79.82±6.94)%;48 h的R质粒转移抑制率分别为(96.63±8.52)%和(72.91±7.42)%.结论 木香、黄精提取液在体内能有效抑制S.flexneri D15 R-plas-mid Cm~R和E.coli 1485 Rif~R之间R质粒的接合传递.
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木香、黄精提取液抑制R质粒接合传递的体外实验研究
目的 体外观察中药木香、黄精提取液抑制痢疾杆菌氯霉素耐药株(S.flexneRi D15 R-plasmid Cm~R)和大肠埃希菌氯霉素敏感株(E.coli 1485 Rif~R)间的R质粒接合传递作用.方法 木香、黄精提取液分别与S.flexneRi D15 R-plasmid Cm~R和E.coli1485 Rif~R共同培养24 h和48 h后接种于麦康凯琼脂平板,37℃培养24 h,计算木香、黄精及不加药对照组的R质粒转移率和R质粒转移抑制率.结果 24 h R质粒转移率木香组为(4.60±0.14)%,黄精组为(4.15±0.78)%,未加药对照组为(47.3±0.53)%,差异有统计学意义(P<0.01);48 h R质粒转移率木香组为(3.65±0.07)%,黄精组为(2.8±0.71)%,未加药对照组为(68.90±1.01)%,差异有统计学意义(P<0.01).24 h的R质粒转移抑制率木香组为(90.30±8.33)%,黄精组为(91.22±7.76)%;48 h的R质粒转移抑制率木香组为(94.70±9.68)%,黄精组为(95.90±10.23)%.结论 木香、黄精均具有体外抑制S.flexneRi D15 R-plasmid Cm~R和E.coli 1485 Rif~R间R质粒接合传递的作用.
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小儿腹泻鼠伤寒沙门菌R质粒的携带率及耐药性分析
目的了解西安地区致小儿腹泻鼠伤寒沙门菌R质粒的携带率及对多种抗生素的耐药性;为临床用药、流行病学监控提供依据.方法质粒的检测采用Kako-Liu快速法和改进的Meyer法进行.结果西安地区致小儿腹泻鼠伤寒沙门菌R质粒的携带率为60.9%;并有48%的耐药性质粒可发生转化;鼠伤寒沙门菌对头孢他啶的耐药率低为4.88%,其次头孢曲松为9.76%,对头孢哌酮的耐药率为14.64%,对红霉素的耐药率高为90.24%,其次氨苄西林为8535%,对其他多种抗生素也有不同的耐药.结论西安地区致小儿腹泻鼠伤寒沙门菌R质粒的携带率高于国内其他地区,对多种抗生素的耐药性较高应引起重视.
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双黄连、清开灵对耐药大肠埃希菌R质粒及β-内酰胺酶的影响
目的 探讨清热解毒中药双黄连、清开灵对产超广谱β-内酰胺酶(ESβLs)大肠埃希菌R质粒的消除作用及对β-内酰胺酶活性的影响.方法 取分离于临床的ESBLs阳性大肠埃希菌,用质粒提取试剂盒提取质粒,应用琼脂糖凝胶电泳、紫外凝胶成像仪分析中药作用前后质粒消除情况；以超声破碎法获取β-内酰胺酶提取液,用Bradford法进行蛋白定量,以头孢硝噻吩(Nitrocefin)为底物测定β-内酰胺酶活性.结果 对双黄连、清开灵作用前后质粒图谱比较发现经中药处理后均丢失了一条质粒带；肉汤菌、经舒巴坦、双黄连以及清开灵作用后细菌β-内酰胺酶活性分别为(13.43 ±0.40)、(3.49 ±0.12)、(3.54±0.27)、(3.35±0.12) U/mg,与肉汤菌相比,经双黄连、清开灵作用后酶活性降低,差异具有统计学意义(P＜0.01)；其作用与舒巴坦相当.结论 双黄连及清开灵具有一定消除耐药大肠埃希菌质粒的作用,并且可抑制其β-内酰胺酶活性.
关键词： 清开灵 双黄连 产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌 R质粒 β-内酰胺酶 -
五倍子提取液对铜绿假单胞菌R质粒体外消除作用的实验研究
铜绿假单胞菌是院内感染的主要致病菌,带有耐药质粒的铜绿假单胞菌的大量存在,是造成这种情况的主要原因.用人工方法使R质粒从宿主菌中消除,使其恢复对抗生素的敏感性,是临床治疗多重耐药菌感染的新思路.本文用五倍子提取液做消除剂对铜绿假单胞菌R质粒进行体外消除试验,结果如下.
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马齿苋、金银花提取液对绿脓杆菌PA11株R质粒体内消除作用的比较
制备肠道去污染小鼠动物模型,经口感染绿脓杆菌 PA11,同时口饲马齿苋提取液或金银花提取液 2mg/只,24h、48h 后给予同样药物计量.分离单个菌落,影印培养,计数消除子.结果显示:两种药作用24h均未获得消除子,作用 48h和72h R 质粒平均消除率马齿苋为2.15%、金银花为12.25%.消除子均表现为多重耐药性丢失.
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中药单方或复方对大肠埃希菌R质粒消除作用的研究
目的 系统评价中药单方或复方对大肠埃希菌R质粒的消除作用.方法 检索万方数据库、中国期刊全文数据库.纳入中药单方或复方对大肠埃希菌R质粒消除作用的实验研究.结果 共纳入4个研究,中药消质剂包括:克痢痧、三黄片、止痢灵、盐酸小檗碱、千里光、黄芩等.Meta分析结果表明,中药消质剂消质效果优于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);相对危险度(95%可信区间)为20.91(15.06,29.02).但总体上中药消质剂消质作用低于化学消质剂-十二烷基硫酸钠;复方中药消质剂消质效果优于非复方中药消质剂,差异有统计学意义(P<0.05).结论 中药消质剂是消除大肠埃希菌R质粒影响的一个方向,采用复方是提高效果的有效方法.
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克痢痧对致病性大肠埃希菌R质粒消除的作用
人们试图寻找有效的消除剂,把耐药质粒(R质粒)从宿主菌株中消除掉,使其重新恢复对抗生素的敏感性[1～3],复方中成药克痢痧用于治疗腹泻与细菌性痢疾,本实验以克痢痧作为R质粒消除剂,研究其对致病性大肠埃希菌R质粒的消除作用,并与传统R质粒消除剂十二烷基硫酸钠(SDS)和盐酸小檗碱作对比研究.
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苍术提取液对铜绿假单胞菌R质粒体内体外消除作用的实验研究
目的探讨中药苍术提取液对铜绿假单胞菌R质粒的消除作用.方法对老年呼吸系统感染患者痰中分离的铜绿假单胞菌耐药R质粒进行了检测,并选用中药苍术提取液对该质粒进行了体外、体内消除试验.结果体外药物作用24 h、48 h、72 h R质粒消除率分别为0.2%、1.8%、0.6%,SDS对照组分别为0、0.8%、1.2%,体内药物作用24 h、48 h、72 h R质粒消除率分别为0、2.8%、4.1%,对照组均为0.结论中药苍术提取液对铜绿假单胞菌R质粒于体内、体外均具有消除作用,体内消除作用强于体外.
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金银花水煎剂对绿脓杆菌P29株R质粒体内体外消除作用的实验研究
目的:探讨金银花对绿脓杆菌R质粒消除作用.方法:体外试验金银花水煎剂亚抑菌浓度作用绿脓杆菌P29 48 h后,影印培养,计数消除子;体内试验建立肠道去污染小鼠动物模型后,经口感染绿脓杆菌,同时给金银花水煎剂,灌胃给药,2 mg/只,24 h后再次给药,剂量同上,48 h后处死小鼠,分离培养细菌,计数消除子数.消除子经质粒抽提琼脂糖凝胶电泳鉴定.结果:金银花水煎剂对绿脓杆菌P29株R质粒体外消除率为0,体内消除率为8%.结论:金银花水煎剂对去污染小鼠感染绿脓杆菌P29株R质粒具有消除作用,消除子主要表现对单一抗生素恢复敏感性;体外没有消除R质粒作用.
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伤寒沙门菌耐药质粒体内接合转移的研究
目的 研究伤寒沙门菌耐药质粒pRST98在小鼠体内向大肠埃希菌的接合转移,比较质粒在体内、外接合转移的异同.方法 由于伤寒沙门菌是一种只对人类致病的病原菌,因此将伤寒沙门菌的耐药质粒pRST98导入遗传背景明确的鼠伤寒沙门菌低毒株RIA中,用接合子pRST98/RIA口饲BALB/c小鼠进行体内接合转移.结果 在体外伤寒沙门菌很容易将pRST98转移给大肠埃希菌E.coli K12W1485(F-)Rif-Lac+,该接合子又可将pRST98转移给鼠伤寒沙门菌RIA,但在不同宿主菌中耐药标志的表达有差异.未经人工感染小鼠肠道分离的大肠埃希菌耐药情况严重,口饲pRST98/RIA后出现了部分耐药标志与pRST98耐药谱相同的大肠埃希菌,但有些抗生素的耐药标记未能表达.质粒检测显示体内形成的接合子均含耐药质粒pRST98.结论 伤寒沙门菌耐药质粒pRST98在动物体内、外均可转移给大肠埃希菌,但同一质粒在体内、外大肠埃希菌株中耐药标志表达有差异,即使在同一小鼠体内分离的不同接合子,pRST98/E.coli菌株耐药性亦有不同,显示耐药质粒表达的多样性和复杂性.
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志贺氏Ⅰ型痢疾杆菌耐药谱及R质粒携带率的研究
本文使用链霉素、四环素、磺胺嘧啶、氯霉素、氨苄青霉素、甲氧苄胺嘧啶、庆大霉素、卡那霉素等8种抗生素检测志贺氏I型痢疾杆菌(志贺I型菌)32株及福氏菌57株的耐药谱,并以大肠杆菌K-12c600F-Rifr为受菌,对志贺I型菌及福氏菌进行可传递性耐药性质粒(R质粒)携带率的检测.结果发现志贺I型菌的耐药谱以氯霉素、四环素型为主,福氏菌以链霉素、氯霉素、四环素、磺胺嘧啶型为主.志贺I型菌R质粒携带率为65.2%,高于福氏菌R质粒携带率(42.1%),低于国外志贺I型菌R质粒的携带率.
关键词： 耐药 志贺氏I型痢疾杆菌福氏痢疾杆菌 R质粒 -
淋病奈瑟菌流行菌株耐药性及R质粒的研究
目的了解淋病奈瑟菌流行株对抗生素的耐药性及R质粒的携带情况.方法对广东省湛江地区1998～1999年分离鉴定出的98株淋病奈瑟菌流行株,应用纸片扩散法测定细菌对10种抗生素的敏感性,并采用碱裂解法进行质粒抽提,分析R质粒的分布情况.结果淋病奈瑟菌对环丙沙星、四环素、氯霉素、青霉素高度耐药,耐药率分别为82.65%、69.39%、50%、32.65%;质粒提取后,检出42.5 kb、39.5 kb、7.4 kb、4.2 kb四种质粒,其中7.4 kb R质粒达到59.16%.结论湛江地区淋病奈瑟菌对多种抗生素均耐药,耐药谱型达42种,R质粒为7.4 kb"亚洲型质粒”,R质粒与耐药性的关系有一定的特点.
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痢疾杆菌及其L型R质粒的研究
痢疾杆菌的耐药性多由质粒控制,痢疾杆菌在体内外某些因素作用下可失去细胞壁成为L型,细菌变为L型后其R质粒能否丢失尚未见报道.本文将带有R质粒的痢疾杆菌D15人工诱导为L型,观察其R质粒丢失情况,并对临床分离菌株的R质粒进行了研究,结果如下.
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大蒜芦荟液消除R质粒的实验研究
目的:探讨大蒜芦荟混合液对大肠杆菌耐氯霉素(CM)R质粒和痢疾杆菌耐氯霉素(CM)R质粒消除作用.方法:将大蒜芦荟混合液作为R质粒消除剂,消除痢疾杆菌耐CM质粒和大肠杆菌耐CM质粒.结果:经大蒜芦荟液作用的大肠杆菌和痢疾杆菌在含CM中国蓝培养基和含CMSS培养基均不生长,但在不含CM中国蓝培养基和不含CMSS培养基都能生长.结论:大蒜芦荟混合液对大肠杆菌和痢疾杆菌的R质粒在体外均具有消除作用,说明大蒜芦荟液有预防肠道菌耐药性作用.
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福建省鼠伤寒沙门菌病原学特征研究
[目的] 了解福建省鼠伤寒沙门菌(鼠伤寒菌)的病原学特征及其流行病学意义. [方法] 采用噬菌体分型、质粒谱分析、耐药性测定、R质粒检测与消除和致病因子检测等方法,对福建省1980-1995年间不同地区与来源(人、动物、食品、外环境等)的鼠伤寒菌进行研究分析. [结果] 鼠伤寒菌可分为20个噬菌体型,其中7774与3774等7个型是优势型(89.6%);并检出10种质粒,可分成13个质粒谱型,60 Md质粒是流行性质粒,质粒谱Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅳ型和Ⅵ型为优势质粒谱型(85.7%).不同年段与不同来源菌株的噬菌体流行型别组成互不相同,从而构成各自特有的流行型别.鼠伤寒菌耐药率逐年大幅度上升,耐药谱及多耐菌株亦逐年剧增.氟喹诺酮、头孢菌素和丁胺卡那霉素是治疗严重耐药菌的敏感药物;尤其是氟哌酸,既可治疗严重耐药菌感染,又可一定程度消除耐药性质粒.鼠伤寒菌的多重耐药性主要由R质粒介导;致病因子有内毒素、外毒素和侵袭性;生化及抗原变种株也可引起食物中毒、医院感染及感染性腹泻的流行. [结论] 噬菌体分型、质粒谱分析、耐药性测定、R质粒、致病因子和生物变种检测等是监测鼠伤寒菌病原学特征的有效方法.
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克痢痧对志贺菌耐药性质粒消除作用的实验研究
目的:探讨复方中成药克痢痧对志贺菌R质粒的消除作用,使其重新恢复对抗生素的敏感性.方法:对临床分离的福氏志贺菌耐药性R质粒进行检测,并选用复方中成药克痢痧对该质粒进行体外消除实验,与传统消质粒剂SDS、盐酸小檗碱进行比较.结果:经实验前后R质粒指纹图谱分析,原菌株染色体及7条质粒带清晰可见,经克痢痧作用后的消除子都缺失了相应的质粒带;体外实验克痢痧对志贺菌耐庆大霉素R质粒消除率为4.88%,SDS、盐酸小檗碱和空白对照组R质粒消除率分别为6.79%,3.71%和0.25%;对耐氨苄青霉素R质粒消除率为13.22%,SDS、盐酸小檗碱和空白对照组R质粒消除率分别为9.25%,8.96% 和0.06%.结论:复方中成药克痢痧对志贺菌R质粒具有较好的消除作用.
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千里光消除大肠埃希菌R质粒的实验研究
目的:评价千里光消除大肠埃希菌R质粒的效果.方法:对从本院尿路感染患者尿液中分离出的大肠埃希菌R质粒进行检测,随机选取60只小鼠,采用随机数字表法分为2组,对照组采取空白对照,小鼠经口感染大肠埃希菌,实验组小鼠经口感染大肠埃希菌后口服千里光浓缩液,观察并比较从2组小鼠大肠分离出的大肠埃希菌对抗生素的耐药性情况,与大肠埃希菌R质粒消除率.结果:实验组在含有四环素、氨苄青霉素、链霉素的药物平板上的消除大肠埃希菌R质粒菌落数均多于对照组(P＜0.05).实验组大肠埃希菌R质粒消除率高于对照组(P＜ 0.01).结论:中药千里光在消除大肠埃希菌R质粒方面具有良好的效果,在含有四环素、链霉素、氨苄青霉素的抗生素药物平板上仍可有效清除大肠埃希菌R质粒,安全、有效.
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白头翁提取液对铜绿假单胞菌R质粒的消除作用
目的探讨中药白头翁提取液对铜绿假单胞菌R质粒的消除作用.方法对老年呼吸系统感染患者痰中分离的铜绿假单胞菌R质粒进行了检测,并选用中药白头翁提取液对该质粒进行了体外、体内消除试验.结果中药白头翁提取液体外作用24,48,72 h后,R质粒消除率分别为0,1.8%,3.4%,十二烷基磺酸钠(SDS)对照组分别为0,0.8%,1.6%.中药白头翁提取液体内作用24,48,72 h后,R质粒消除率分别为0,2%,12.8%,对照组均为0.结论中药白头翁提取液对铜绿假单胞菌R质粒在体外、体内均具有消除作用,体内消除作用强于体外.
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淋球菌耐药性及R质粒的研究进展
淋球菌引起的淋病是我国目前流行的性传播疾病中发病率高的病种[1].随着传统的抗生素如青霉素、四环素对淋球菌耐药的增强,探索更有效的抗生素以指导临床治疗十分重要.近几年来,氟喹诺酮和广谱头孢菌素是治疗淋病有效的抗生素,但目前已出现了针对这些抗生素的耐药菌株,且随着抗生素的广泛应用有日渐增加的趋势[2].淋球菌的耐药性中很大一部分与R质粒的关系比较密切,为此,本文就淋球菌耐药现状、R质粒及耐药机制的研究进展综述如下.
