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MAGE-A9在乳腺癌组织中的表达及临床意义
目的 检测MAGE-A9在乳腺癌中的表达情况,分析其与乳腺癌临床病理特征的关系.方法 在组织芯片上(70例乳腺癌标本及20例癌旁对照标本)进行免疫组化检测,使用Cox回归法及Kaplan-Meier生存分析法进行乳腺癌病人的预后评估.结果 免疫组化结果显示乳腺癌中的MAGE-A9表达明显高于癌旁对照组的表达(P＜0.05).MAGE-A9的表达与乳腺癌病人的肿瘤组织学分级、淋巴结转移、远处转移及TNM分期有重要关联(P均＜0.05).生存分析显示MAGE-A9阳性、TNM分期与乳腺癌病人预后关系密切,MAGE-A9高表达提示病人预后不良.结论 MAGE-A9在乳腺癌组织中异常高表达且MAGE-A9的表达与乳腺癌病人的多项重要临床指标相关.MAGE-A9可作为乳腺癌病人预后的独立危险因素.
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MAGE-A9在肝细胞癌中的表达及其意义
目的 探讨MAGE-A9在人类肝细胞癌中的表达及其与肝细胞癌患者临床病理特征之间的关系.方法 应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、实时荧光定量核酸扩增检测(qPCR)和免疫组织化学方法分析MAGE-A9在肝癌细胞株和组织标本中的表达.使用Kaplan-Meier统计方法和Cox比例风险回归模型来进行生存分析,评估100例肝细胞癌患者的预后.结果 MAGE-A9 mRNA在肝细胞癌中的表达(4.44±0.34)明显高于非肿瘤细胞和组织(1.73±0.18) (P＜ 0.05),MAGE-A9的表达与病理分级(P=0.003)、门静脉侵犯(P=0.001)、远处转移(P=0.022)和TNM分期(P=0.005)有关.Cox回归分析进一步表明,MAGE-A9表达是无病生存期(P=0.006)和总生存期(P=0.022)的独立预后因素.结论 MAGE-A9是与肝细胞癌患者预后相关的有价值的生物标志物,MAGE-A9高表达的肝细胞癌患者预后较差.
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肿瘤抗原基因MAGE-A9的克隆及原核表达
目的 扩增和克隆人黑色素瘤抗原MAGE-A9cDNA,构建原核表达载体,表达并纯化MAGE-A9蛋白.方法 从人肝癌组织提取总RNA,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从中扩增出MAGE-A9 cDNA,插入载体pMD18-T中,测序正确后,构建重组表达载体pBAD/gⅢ-MAGE-A9,转化大肠杆菌TOP10株.以L-Arabinose进行诱导表达,并纯化.结果 获得MAGE-A9cDNA,测序结果与GenBank一致.成功构建表达载体,表达可溶重组蛋白,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析其相对分子质量为35 000.结论 成功地构建了pBAD/gⅢ-MAGE-A9原核表达质粒,获得了MAGE-A9蛋白,为该蛋白应用于肿瘤免疫治疗奠定了基础.
关键词： 黑色素瘤 逆转录-聚合酶链反应 MAGE-A9 基因克隆 基因表达 -
肿瘤抗原基因MAGE-A9的克隆及原核表达
目的 扩增和克隆人黑色素瘤抗原MAGE-A9cDNA,构建原核表达载体,表达并纯化MAGE-A9蛋白.方法 从人肝癌组织提取总RNA,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从中扩增出MAGE-A9 cDNA,插入载体pMD18-T中,测序正确后,构建重组表达载体pBAD/gⅢ-MAGE-A9,转化大肠杆菌TOP10株.以L-Arabinose进行诱导表达,并纯化.结果 获得MAGE-A9cDNA,测序结果与GenBank一致.成功构建表达载体,表达可溶重组蛋白,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析其相对分子质量为35 000.结论 成功地构建了pBAD/gⅢ-MAGE-A9原核表达质粒,获得了MAGE-A9蛋白,为该蛋白应用于肿瘤免疫治疗奠定了基础.
关键词： 黑色素瘤 逆转录-聚合酶链反应 MAGE-A9 基因克隆 基因表达 -
MAGE-A9和MAGE-A11基因在乳腺癌组织中的表达及其临床意义
目的:探讨黑素瘤抗原MAGE-A9和MAGE-A11在乳腺正常组织、乳腺良性病变、乳腺癌组织中的表达以及甲基化酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-CdR)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)对MAGE-A9和MAGE-A11基因表达的影响.方法:应用RT-PCR和免疫组化方法检测60例乳腺正常组织、60例乳腺良性病变及60例乳腺癌组织(标本均取自河北医科大学第四医院乳腺中心2007年11月至2008年5月乳腺手术治疗患者)中MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA及其蛋白的表达,分析其与乳腺癌患者临床病理学特征的关系.RT-PCR检测乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231经5-Aza-CdR和TSA单独或联合作用后MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA表达量的变化.结果:乳腺癌组织中MAGE-A9mRNA和蛋白阳性表达率分别为45％(27/60)和43.3％(26/60),MAGE-A11 mRNA和蛋白阳性表达率分别为66.7％ (40/60)和63.3％ (38/60),而乳腺正常组织及良性病变组织中均未发现MAGE-A9、MAGE-A11 mRNA及其蛋白的表达.MAGE-A9、MAGE-A11 mRNA和蛋白的表达与乳腺癌患者的年龄、病理类型、临床分期、肿瘤大小、淋巴转移、瘤栓及孕激素受体的表达均无明显关系(P＞0.05),但与人表皮生长因子受体2(HER-2)和雌激素受体(ER)的表达有关(P＜0.05).未经药物处理的MCF-7、MDA-MB-231细胞未见MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA表达;单用5-Aza-CdR处理后可见MAGE-A9和MA GE-A11基因重新表达,联合应用5-Aza-CdR和TSA处理可使MAGE-A9、MA GE-A 11基因的表达量进一步增加(P＜0.05);而TSA单独处理对基因表达没有影响(P＞0.05).结论:乳腺癌组织中MA GE-A9和MA GE-A11的表达与ER和HER-2的表达有关,5-Aza-CdR单用或联合应用TSA可诱导和增强MAGE-A9和MAGE-A1 mRNA的重新表达,说明DNA的去甲基化和组蛋白乙酰化可能是调控人类肿瘤细胞MAGE表达的重要机制.
关键词： 乳腺癌 MAGE-A9 MAGE-A11 5-氮杂-2'-脱氧胞苷 曲古抑菌素A -
肝细胞癌MAGE-A9基因的克隆、表达及特性鉴定
目的:扩增和克隆人黑色素瘤抗原MAGE-A9(melanoma antigen A9)cDNA,构建原核表达载体,制备抗MAGE-A9单抗,观察其在肝细胞癌中的表达.方法:从人肝癌组织提取总RNA,用RT-PCR从中扩增出MAGE-A9 cDNA,插入载体pMD18-T中,测序正确后,构建重组表达载体pBAD/gⅢ-MAGE-A9,转化大肠杆菌TOP10株进行表达.重组蛋白经L-Arabinose诱导表达纯化后,制备抗MAGE-A9单抗,免疫组化检测MAGE-A9在肝细胞癌中的表达和定位.结果:获得MAGE-A9cDNA,测序结果与GenBank一致.成功构建表达载体,表达可溶重组蛋白,SDS-PAGE分析其相对分子质量为35kD.获得抗MAGE-A9单抗,MAGE-A9在肝细胞癌中的阳性表达率为21%(8/39),主要表达于胞浆,未见肿瘤异质性,统计学分析MAGE-A9的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小和分化程度没有相关性.结论:有相当部分肝癌患者的肿瘤表达MAGE-A9抗原,且其表达与患者年龄、性别、肿瘤大小和分化程度没有相关性,MAGE-A9可能成为肝癌特异性免疫治疗的靶点.
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人类黑色素瘤相关抗原A9在早期宫颈癌中的表达研究
目的 检测人类黑色素瘤相关抗原A9(MAGE-A9)在正常宫颈和早期宫颈癌组织中的表达,探讨其在早期宫颈癌中的致病机制及临床病理特征之间的关系.方法 收集宫颈癌组织69例、宫颈上皮内瘤变(CIN)组织30例和正常宫颈组织标本20例,应用免疫组织化学SP法检测MAGE-A9的表达,应用统计学方法分析其与年龄、FIGO分期、组织病理学分级及淋巴结转移等因素间的关系.另取20例宫颈癌、15例C1N、15例正常的新鲜组织,应用实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)法检测不同宫颈组织中MAGE-A9基因及其蛋白的表达水平.结果 MAGE-A9在正常宫颈组织不表达,CIN及宫颈癌组织中均有表达,阳性表达率分别为 5.00％、13. 33％、47. 83％,组间差异有统计学意义(P＜0.05).其在早期宫颈癌的表达与FIGO期、组织病理学分级、淋巴结转移有关,与年龄、组织类型无关.RT-qPCR结果提示,宫颈癌组织中的MAGE-A9表达量明显高于CIN及正常组织,宫颈癌组与正常组及CIN组间差异有统计学意义(P＜0. 05),而CIN与正常组织之间差异无统计学意义.结论 MAGE-A9在正常宫颈、CIN及宫颈癌组织中均有表达,阳性表达率随着疾病的进展而增高,提示在宫颈癌的发生发展中MAGE-A9具有重要作用.
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肿瘤抗原 MAGE-A9和 MAGE-A11在乳腺癌中的表达及意义
目的：：分析人黑色素瘤相关抗原MAGE-A9和MAGE-A11在乳腺正常组织、乳腺良性瘤及乳腺癌组织中的表达趋势,为乳腺癌临床诊断和生物治疗探寻新靶点。方法：选取本院接受并行手术治疗的乳腺良性肿瘤和乳腺癌患者各33例,分别取病灶组织和病灶周边正常组织制备石蜡病理切片,以免疫组织化学实验检测MAGE-A9和MAGE-A11的表达水平,并分析其与乳腺癌病理特征的相关性。结果： MAGE-A9在正常组织中无表达,在乳腺良性瘤和乳腺癌的阳性表达率分别为15.2%和54.5%,差异有统计学意义(P<0.05)；MAGE-A11在正常组织及良性瘤中均无表达,仅在乳腺癌中表达,阳性表达率达78.8%。 MAGE-A9表达受组织学分级、ER、HER-2的影响,组织学Ⅲ级患者明显高于Ⅰ、Ⅱ级,ER、HER-2阳性高于阴性；MAGE-A11表达仅受到ER、HER-2的影响,ER、HER-2阳性高于阴性,差异有统计学意义(P<0.05)。线性回归分析结果显示MAGE-A9和MAGE-A11表达水平呈直线正相关性(y=0.7981x +1.278；R2=0.6948)。结论： MAGE-A9和MAGE-A11可能与乳腺癌的发生发展有密切关系。
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MAGE-A9在非小细胞肺癌中的表达及临床意义
目的 探讨MAGE-A9在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况,分析MAGE-A9表达与NSCLC患者临床病理特征的关系.方法 应用免疫组织化学的方法检测MAGE-A9蛋白在110例NSCLC组织及癌旁组织中的表达,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)在mRNA水平对免疫组化结果进行定量验证;对比MAGE-A9表达与NSCLC患者临床病理特征的关系,并分析MAGE-A9表达与NSCLC患者预后的关系.结果 MAGE-A9蛋白主要定位于细胞的核内,其在NSCLC组织中的高表达率明显大于癌旁组织,NSCLC组织中的MAGE-A9 mRNA水平明显高于癌旁组织,二者差异具有统计学意义(P＜0.05);MAGE-A9的异常表达与患者的淋巴结状态和TNM分期有关(P＜0.05);MAGE-A9低表达组患者的生存时间明显优于MAGE-A9高表达组患者(p＜0.05).结论 MAGE-A9高表达是NSCLC患者不良预后的独立危险因素,亦是NSCLC治疗的潜在靶点,值得进一步研究.
