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同型半胱氨酸对小鼠卵母细胞成熟过程中组蛋白表观遗传修饰的影响
目的 探讨卵母细胞发育过程中同型半胱氨酸(HCY)对组蛋白表观遗传修饰的影响.方法 首先使用10只2周ICR雌性小鼠建立完整卵泡的体外培养体系,在卵母细胞发育早期,利用免疫组织化学方法,观察HCY对甲基化组蛋白H3K4、H3K9以及乙酰化组蛋白H3K9分布的影响;其次使用10只4周ICR雌性小鼠,利用卵母细胞的体外成熟培养体系,观察HCY对卵母细胞成熟过程的影响,同时利用实时定量PCR方法,观察在此成熟过程中HCY对卵母细胞内组蛋白乙酰化水平的调控酶GCN5和HDAC表达的影响.结果 HCY明显抑制卵母细胞的体外成熟,在HCY作用下,甲基化组蛋白H3K4、H3K9以及乙酰化组蛋白H3K9的分布没有变化,但是表达强度降低,核呈现去浓缩的趋势.成熟过程中HCY并不改变基因GCN5的表达水平,却明显抑制卵母细胞内HDAC基因的表达.结论 卵母细胞发育过程中高水平的同型半胱氨酸影响组蛋白的表观遗传修饰,HCY对卵母细胞核内组蛋白甲基化和乙酰化修饰的影响有可能是造成核染色体稳定性下降的重要原因.
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未成熟卵母细胞体外成熟技术及其在多囊卵巢综合征患者中的应用
卵母细胞(oocyte)体外成熟(in vitro maturation,IVM)是一项新的辅助生殖技术,具有能减少常规促排卵药物引起的不良反应、减少卵巢过度刺激综合征(ovarian hyperstimulation syndrome,OHSS)、降低治疗费用等优点,较传统的体外受精(IVF)技术容易被患者接受.早在1935年,人们就观察到兔未成熟卵母细胞在普通培养基中培养可自动成熟.由此提出卵母细胞可自发性核成熟这一观点.在小鼠、绵羊、猪、恒河猴和人的卵泡培养中,进一步证实了这一概念.1991年,Chian等才开始真正意义的IVM的临床应用研究.1994年,Trounson等证实了多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者的未成熟卵母细胞具有体外成熟及受精发育的能力.同年,卵母细胞IVM后行卵母细胞浆内单精子注射(ICSI)也获得成功.PCOS是引起不孕的常见原因,据统计在育龄妇女中的发病率为5%~10%.在PCOS患者的超排卵过程中,经常出现一种情况是对促排卵药物不敏感,如对低剂量促性腺激素长时间不反应,对氯米芬抵抗而导致卵泡得不到发育或生长时间过长与内膜不同步,不能妊娠;另一情况是在一定促性腺激素作用的情况下产生过激反应诱发OHSS,以致威胁患者的生命[1].卵母细胞IVM为人们解决这些问题提供了一条可供选择的途径,且研究证明,PCOS患者比正常卵巢者获得更多的未成熟卵.因此认为,卵母细胞IVM对PCOS患者治疗尤其适用.现就卵母细胞IVM及其在PCOS患者的应用现状做一综述.
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卵母细胞体外培养系统的研究进展
近几年人类未成熟卵母细胞体外成熟(IVM)成为辅助生殖技术(ART)的研究热点,但迄今各种培养系统的成熟率、受精率和妊娠率仍较低,IVM技术仍处于实验阶段,尚不能常规应用于临床。如何获得一个稳定的具有较高成功率的培养系统成为需要迫切解决的问题。现就IVM培养系统和有关影响因素的研究进展作一综述。
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卵母细胞的体外成熟
卵母细胞的体外成熟(in vitro maturation, IVM)是指将GV期或GV前期的卵母细胞在体外培养,达到次级卵母细胞(MII),能够正常受精、发育和着床,包括完整的卵泡培养[1]和单纯的卵丘复合体培养.目前应用于辅助生殖技术的主要限于后者.
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卵母细胞体外培养成熟技术在人类生殖中的应用
辅助生殖技术中未成熟卵母细胞体外成熟培养(IVM)研究已有二十余年,从GV期卵母细胞到窦前卵泡的体外培养已获得一定成功,目前IVM应用范围已从纯粹的基础研究扩展到治疗PCOS、供卵、生殖保险等领域.IVM仍处于实验阶段,其完全应用于临床仍有一些问题有待解决.
关键词: 未成熟卵母细胞体外成熟 卵泡培养 辅助生殖技术