首页 > 文献资料
-
基质细胞衍生因子受体在造血干/祖细胞宫内移植中的作用
目的 探讨基质细胞衍生因子受体(CXCR4)在造血干/祖细胞(HSC)宫内移植归巢中的作用.方法 分离人脐血CD34~+细胞,用流式细胞仪榆测SCF、IL-6处理前后细胞表面CXCR4(CD184)的表达及在Transwell板中的迁移率.在BALB/c胎鼠孕13～14 d期间,经胎鼠腹腔注射经不同处理的CD34~+细胞,胎鼠出生1个月后取骨髓,用流式细胞仪检测人CD45细胞.结果 预处理后表达CD184的CD34~+细胞的百分数由原来的9.58%4±1.56%上升为19.32%4±3.64%.CD34~+/CXCR4~(high)细胞迁移率显著增高,但迁移作用可以被antiCXCR4mAb和PTX明显抑制.SCF和IL-6预处理组胎鼠人CD45细胞阳性率显著高于其他组.抗CXCR4抗体或PTX预处理组人CD45细胞检出率显著降低.结论 增加CD34~+细胞CXCR4的表达有助于宫内移植HSC的归巢,HSC宫内移植归巢过程依赖CXCR4受体,SDF-1/CXCR4调节信号通过Gi蛋白进行跨膜传导.
关键词： 造血干细胞 基质细胞衍生因子 基质细胞衍生因子受体 归巢 宫内移植 -
基质细胞衍生因子及其受体对造血作用的研究进展
骨髓基质细胞衍生因子(Stromal cell-derived factor-1, SDF-1)是趋化因子CXC家族中的一个成员,又称前B细胞刺激因子(Pre-B-cell growth-stimulating factor,PBSF ),初是从小鼠骨髓细胞中提取,继而从小鼠基质细胞的上清中纯化获得.SDF-1与其受体CXCR4协同,参与介导炎性反应,对胚胎存活、心脏等器官的发生、B淋巴细胞的生成、骨髓造血、骨髓纤维化等均起重要作用.此外,SDF-1能介导淋巴细胞及单核细胞的迁移,通过淋巴细胞内肌动蛋白(actin)的聚合促使细胞移行.
关键词： 基质细胞衍生因子 基质细胞衍生因子受体 造血作用 归巢 -
SDF-1/CXCR 4在槲皮素抗ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化形成过程中的作用
目的:探讨槲皮素对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化形成及基质细胞衍生因子-1(stromal derived factor-1,SDF-1)及其特异性受体CXCR 4表达的影响,为槲皮素抗动脉粥样硬化提供实验依据.方法:40只6周龄的ApoE-/-小鼠随机分为:正常对照组、模型对照组和实验组(槲皮素低、中、高剂量组),于给药后第10、20周取材,HE染色观察动脉粥样硬化病变情况;ELISA法、免疫组织化学技术及real-time PCR检测SDF-1和CXCR 4的蛋白和基因表达情况.结果:(1)HE染色发现正常对照组无粥样斑块形成;实验组与模型对照组相比动脉粥样斑块病变明显减轻.(2)免疫组化结果显示相同时间点比较,正常对照组:SDF-1主要表达于内皮细胞和平滑肌细胞,CXCR4主要表达于内皮细胞,但细胞着色浅,表达量少;模型对照组:平滑肌细胞以及泡沫细胞呈深棕黄色,显示SDF-1和CXCR 4有大量表达;槲皮素组:高中低剂量的3个实验组与模型对照组比较,细胞着色较浅,表达量均有减少(P=0.010);与正常对照组比较,低剂量组、中剂量组有统计学差异(P=0.000).不同时间点比较,SDF-1在模型对照组的表达量随时间延长而增加(P=0.000).(3)ELISA检测血清中SDF-1和CXCR 4水平,real-time PCR检测SDF-1和CXCR4的mRNA基因表达结果:在相同时间点比较,SDF-1及CXCR4在模型对照组中表达高(与其余各组比较P=0.000),正常对照组表达低,槲皮素组介于两者之间,且随着药物剂量的增加SDF-1和CXCR 4表达量进行性下降,尤其是CXCR 4在高剂量组与正常对照组比较无统计学差异(P＞0.05);不同时间点相同组比较,模型对照组的SDF-1和CXCR 4均随时间延长而增加(P=0.00),槲皮素组和正常对照组无明显的时间依赖性.结论:(1)SDF-1/CXCR 4可能促进血管平滑肌细胞增殖以及迁移至内膜,从而使内膜增厚和泡沫细胞形成,导致粥样斑块形成.(2)槲皮素可能通过抑制SDF-1与CXCR 4的表达从而抑制ApoE-/-小、鼠动脉粥样硬化形成.
关键词： 槲皮素 动脉粥样硬化 基质细胞衍生因子-1 基质细胞衍生因子受体 -
CXCR4基因修饰骨髓间充质干细胞体外迁移实验
构建一种高表达基质细胞衍生因子受体(CXCR4)的大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),考察CXCR4对细胞定向迁移能力的影响.实验构建了pMSCV-CXCR4-IRES-GFP基因质粒,并通过逆转录病毒将其转入预先培养的MSCs中.分别采用流式细胞分析仪、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫荧光染色法检测CXCR4在MSCs中的表达,并利用Transwell方法检测基质细胞衍生因子(SDF-1)对MSCs体外定向迁移的影响.流式细胞仪分析显示,转基因MSCs表面CXCR4的阳性率为46%,绿色荧光蛋白(GFP)阳性率为57%.RT-PCR进一步证实了CXCR4的表达.细胞迁移实验结果表明, CXCR4基因修饰促进了MSCs向SDF-1的定向迁移,当SDF-1浓度为50 ng/ml时,这种定向迁移能力较之对照组提高了近5倍.通过以上结果可以初步证实,MSCs表面CXCR4表达量在SDF-1/CXCR4介导的细胞迁移通路中发挥着重要作用,这为进一步研究MSCs的体内迁移和归巢提供了依据.
关键词： 间充质干细胞 基质细胞衍生因子受体 基质细胞衍生因子-1 迁移
