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应用酶联免疫反应加速仪检测丙型肝炎核心抗原的临床分析
目的：研究酶联免疫反应加速仪在ELISA法检测丙型肝炎核心抗原中的应用，及丙型肝炎核心抗原检测的临床意义。方法：应用酶联免疫反应加速仪孵育和水浴箱孵育方法同步检测不同浓度丙型肝炎核心抗原标准血清，联合检测858例临床手术前和输血患者丙型肝炎核心抗原和抗-HCV。结果：应用酶联免疫反应加速仪可使试验时间缩短一半，检测结果吸光度值增高，与水浴箱孵育结果比较，各浓度吸光度值有显著性差异P＜0.05。结果灵敏度增高。联合检测丙型肝炎核心抗原和抗-HCV，提高了丙型肝炎病毒感染的阳性率，降低了17.2%的漏检率。结论：酶联免疫反应加速仪可以加快丙型肝炎核心抗原孵育的时间，提高检测的灵敏度，值得临床推广应用。联合检测丙型肝炎核心抗原和抗-HCV 可以减少丙型肝炎病毒感染者的漏检，提高早期诊断阳性率。
关键词： 酶联免疫加速仪 丙型肝炎病毒核心抗原 丙型肝炎抗体 联合检测 -
在安全输血中应用丙型肝炎病毒核心抗原检测技术的初步探索
本研究探讨用丙型肝炎病毒(HCV)核心抗原酶联免疫吸附技术(HCV-cAg ELISA)筛查献血员感染HCV的可行性.对我医院2003年1月-2005年12月间的8 677份献血者血清标本进行抗-HCV初检和复检.将仅初检阳性的15份血清标本和仅复检阳性的14份血清标本,分别再做HCV-cAg ELISA和HCV RT-PCR检测.结果表明:经HCV-cAg ELISA检测,29份仅初检(15份)和仅复检(14份)抗-HCV阳性血清标本中只有5份结果为阳性,阳性率为17.24%.经HCV RT-PCR检测,29份仅初检和仅复检抗-HCV阳性血清标本中同样也只有5份阳性结果,阳性率也为17.24%.结论:HCV-cAgELISA检测技术的敏感性与HCVRT-PCR技术类似,但成本明显降低,有可能作为HCV感染的辅助确证试验,或作为抗-HCV检测技术的更新换代技术用于安全输血中献血者血液的筛查.
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慢性丙型肝炎患者HCV核心抗原和HCV RNA检测的对比研究
目的 评价丙型肝炎病毒核心抗原(hepatitis C virus core antigen,HCV-cAg)及丙型肝炎病毒RNA(hepatitis C virus RNA,HCV RNA)检测在慢性丙型肝炎(chronic hepatitis C,CHC)诊断中的作用.方法 收集2013年6月至2014年5月我院186例丙肝抗体阳性的CHC患者,分别采用酶联免疫吸附试验及荧光定量逆转录聚合酶链反应(fluorescence quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,FQ-RT-PCR)法检测患者HCV-cAg及HCV RNA水平,并对检测结果进行统计学分析.结果 在186例CHC患者中,HCV-cAg阳性检出率为33.87％,HCV RNA阳性检出率为53.23％,二者差异有统计学意义(P＜0.05);以HCV RNA检测为病毒血症金标准,HCV-cAg的灵敏度和特异性分别为60.61％、96.55％,阳性预测值和阴性预测值分别为95.24％、68.29％.随着患者血清HCV RNA水平的降低,HCV-cAg阳性率也呈现下降趋势,且各组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).HCV-cAg阳性组HCV RNA病毒载量及阳性率均高于HCV-cAg阴性组,两组间差异均有统计学意义(P均＜0.01).结论 FQ-RT-PCR技术检测HCV RNA是判断HCV感染可靠的方法,而HCV-cAg诊断病毒复制有一定的局限性,但可作为病毒存在和复制指标的重要补充.
关键词： 慢性丙型肝炎 丙型肝炎病毒核心抗原 丙型肝炎病毒RNA -
HCV核心基因转染HepG2细胞后基因表达差异筛选
目的 将真核表达载体pcDNA3.1 (-)HCV core 转染到HepG2 细胞,在HepG2 细胞中表达HCV核心蛋白,并筛选其中的差异表达基因.方法 将构建的真核表达载体pCDNA3.1 (-)HCV core 转染HepG2 细胞后进行蛋白免疫印迹检测;将pcDNA3.1 (-)HCV core 和pcDNA3.1 (-)载体分别转染HepG2 细胞后,提取mRNA 并逆转录为cDNA ,运用基因表达谱芯片技术分析差异表达基因.结果 构建的真核表达载体经双酶切鉴定;转染HepG2 细胞后HCV 核心蛋白表达经蛋白免疫印迹证实;经基因表达谱芯片分析发现,其中基因表达水平显著上调和下调的分别是181 个和48 个.结论 筛选HCV 核心基因转染HepG2 细胞后的糖类和脂类物质代谢相关的差异表达基因,从而为丙型肝炎病毒合并糖尿病、脂肪肝等代谢性疾病的分子生物学机制的研究提供了重要依据.
关键词： 丙型肝炎病毒核心抗原 HepG2细胞 基因芯片 差异表达基因 -
维持性血液透析患者HCV检测方法的比较
目的 探讨维持性血液透析(HD)患者丙型肝炎病毒(HCV)的检测方法 .方法 对108例HD患者,采用荧光定量PCR法测定血清HCV RNA,用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清HCV抗体(抗-HCV)和HCV核心抗原(HCV-cAg),并同时检测丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST),计算其变动率. 结果 HD患者荧光定量PCR HCV RNA检出率为33.3%(36/108),抗-HCV阳性率为32.4%(35/108),HCV-cAg阳性率为26.9%(29/108),HCV标志阳性患者中仅4例ALT和AST均升高.在抗-HCV阳性患者中,HCV RNA检出率为82.9%(29/35);在抗-HCV阴性患者中,HCV RNA检出率为9.6%(7/73);在HCV RNA阴性患者中,抗-HCV阳性率为8.3%(6/72),两者符合率为88%[(29+66)/108];在HCV RNA阳性患者中HCV-cAg检出率为80.6%(29/36).结论 ALT不能作为血液透析患者HCV诊断和反映病情的一项敏感指标,荧光定量PCR技术可弥补ELISA检测的不足,在抗-HCV阴性的血液透析患者中检测HCV RNA具有重要意义,对监测无症状的HCV携带者或新发现的感染者,应用ELISA法检测HCV-cAg将是有意义的发展方向.
关键词： 血液透析 荧光定量PCR 丙型肝炎病毒RNA 丙型肝炎病毒核心抗原 -
微粒子化学发光法检测丙型肝炎病毒核心抗原及临床意义
目的 探讨丙型肝炎病毒核心抗原在丙型肝炎诊断中的意义.方法 采用微粒子化学发光免疫分析方法检测血浆276份,样品同时用酶联免疫吸附试验检测抗HCV、用荧光定量PCR技术检测HCV-RNA.结果 187份HCVAb反应性标本中检出HCVAg45份,HCVAg检出率为24.06％；89份HCVAb非反应性样本中HCVAg检出8例,HCVAg检出率为8.99％,两者样本检出率差异有统计学意义(x2=2.01,P＜0.05),HCVAg与HCVAb的检测符合率为45.65％.55份HCVRNA阳性样本中,有HCVAg反应性样本50份；221份HCVRNA阴性样本中,HCVAg非反应性样本218份,两种方法检测结果的符合率为97.10％.两样本检出率差异无统计学意义(x2=0.00,P＞0.05).结论 微粒子化学发光检测HCVAg与荧光定量PCR检测HCV-RNA具有良好的相关性,丙型肝炎核心抗原检测可以作为抗HCV检测的补充.
关键词： 丙型肝炎 丙型肝炎病毒 丙型肝炎病毒核心抗原 化学发光 -
丙肝病毒核心抗原荧光定量型生物条形码检测体系的建立与评价
目的 建立丙肝病毒核心抗原(HCVcAg)的荧光定量型生物条形码检测体系,并对检测体系进行方法学评价.方法 制备标记有HCVcAg多抗及特异DNA链的金纳米颗粒探针(NP探针)和标记有HCVcAg单抗的磁性微球探针(MMP探针),形成MMP探针-HCVcAg-NP探针复合物,再利用去杂交将NP探针上标记的DNA链释放出来,通过荧光定量PCR方法鉴定这些释放的DNA链可确定丙肝病毒的存在.结果 建立了HCVcAg的荧光定量型生物条形码检测体系,检测灵敏度可达100fg/ml,是相应的HCVcAg ELISA检测方法的104倍.结论 本研究为发展高灵敏度丙肝病毒的荧光定量型生物条形码检测试剂盒奠定了基础.
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丙型肝炎病毒核心抗原检测的临床应用价值
目的 探讨丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法的临床应用价值.方法 对20例HCV抗体(HCV-Ab)阳性标本和200例HCV-Ab阴性标本进行HCV-cAg测定,同时采用核酸扩增进行HCV -RNA对照测定.结果 20例HCV-Ab检测阳性的标本中HCV-cAg阳性8例, 200例HCV-Ab检测阴性的标本中HCV-cAg阳性3例;以HCV-RNA聚合酶链反应(PCR)检测为对照, HCV-cAg检测试剂盒的敏感性为88.3%,特异性为99.5%.结论 HCV-cAg ELISA检测方法敏感性和特异性较好, HCV-Ab和HCV-cAg联合检测可起到互补作用,提高阳性检出率,有利于早期诊断.
关键词： 丙型肝炎病毒核心抗原 丙型肝炎病毒抗体 临床应用 -
丙型肝炎病毒核心抗原荧光定量型生物条形码检测在安全输血中的应用
目的 探讨丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)荧光定量型生物条形码检测(FQ-BCA)筛查献血员感染HCV的可行性.方法 将92份抗-HCV阳性、3 210份抗-HCV阴性献血员血清进行HCV RT-PCR和HCV-cAg FQ-BCA检测.结果 抗-HCV阳性和抗-HCV阴性血清HCV RNA和HCV-cAg检测结果符合率分别为95.65％和99.94％,3 210份抗-HCV阴性血清HCV-cAg阳性2份,1份HCV RNA阳性,且HCV RNA拷贝数的上升与HCV-cAgFQ-BCA阳性检出率上升呈正相关.结论 HCV-cAg FQ-BCA检测敏感性与HCV RT-PCR类似,具有简便、快速、可靠等优点,较适用于安全输血中献血者的血液筛检.
关键词： 丙型肝炎病毒核心抗原 荧光定量型生物条形码检测 安全输血 -
不同小鼠IgG对丙型肝炎病毒核心抗原酶联免疫法检测的影响
目的 获得适合产品配制的小鼠-IgG.方法采用不同厂家的小鼠-IgG分别配制成不同的抗HCV-cAg酶结合物溶液,用酶联免疫法测定OD值.结果 不同厂家的小鼠-IgG配制成的抗HCV-cAg酶结合物溶液,其检测结果有区别.结论 配制抗HCV-cAg酶结合物溶液前应检测小鼠-IgG与产品的适配性.
关键词： 小鼠IgG 丙型肝炎病毒核心抗原 酶联免疫法 -
慢性丙型肝炎患者血清HCV-Cag检测及其临床意义
探讨丙型肝炎病毒核心抗原（HCV-Cag）检测在慢性丙型肝炎（CHC）诊疗中的临床应用价值。方法采用ELISA法检测血清HCV-Cag；采用FQ-PCR法检测HCV RNA。结果在262例慢性丙型肝炎患者血清中，检出HCV-Cag阳性116例（44.3%），HCV RNA阳性112例（42.7%，P>0.05）；两者均为阳性血清105例，均为阴性139例；不同HCV RNA载量血清HCV-Cag滴度差异有统计学意义，高病毒载量血清HCV-Cag滴度明显高于低水平血清者（P<0.01）。结论 HCV-Cag与HCV RNA同时阳性或同时阴性的情况比较一致，在慢性丙型肝炎诊疗中，HCV-Cag检测可以作为病毒复制的指标。
关键词： 慢性丙型肝炎 丙型肝炎病毒核心抗原 丙型肝炎病毒RNA -
加样反应温育条件对ELISA法检测丙肝抗原的影响
目的：探讨丙肝抗原检测（ELISA法）加样后改变反应温度及时间对检测结果的影响。方法：对234例样本分别在37℃温育90min及在43℃温育45min的条件下检测丙型肝炎病毒核心抗原（HCV-cAg）的S/CO值。结果：两种温育条件对于样本阳性检出率、吸光度值、S/CO值没有显著影响。结论：适当地提高温育温度及缩短温育对HCV-cAg的检测结果影响不明显。这有助于缩短临床检验工作者的工作时间，尽快报告结果，提高工作效率。
关键词： 丙型肝炎病毒核心抗原 酶联免疫吸附试验 温育 -
HCV-cAg、HCV-RNA及HCV-Ab联合检测降低丙型肝炎的误诊率
目的:探讨丙型肝炎病毒总核心抗原、丙型肝炎RNA及抗丙型肝炎病毒抗体联合检测在丙型肝炎诊断中的应用价值.方法:对62例丙型肝炎患者阳性和64例HCV-RNA阴性的健康对照组血液标本同时采用RT-PCR定量检测HCV-RNA,时间分辨免疫荧光分析法检测HCV-Ab,和ELISA法检测HCV-cAg.结果:HCV-cAg检测方法敏感性为32.25％,特异性为100％,HCV-Ab检测方法的敏感性是92.0％,特异性是68.8％,联合检测的敏感性是96.8％,特异性是68.8％.结论:联合运用HCV-Ab和HCV-cAg或HCV-Ab和HCV-RNA,能有效降低单独使用HCV-Ab检测的误诊率.
关键词： 丙型肝炎病毒核心抗原 丙型肝炎RNA 抗丙型肝炎病毒抗体 -
丙型肝炎病毒抗体与丙型肝炎病毒核心抗原联检对血液安全筛查结果分析
丙型肝炎病毒(hepatitis Cvirus,HCV)感染,可以通过患者的血液和体液等途径进行传播,2010年《中华人民共和国侵权责任法》施行,患者对医院就医有了更高的要求,为了更好地服务于患者,对患者负责,减少纠纷发生.本院对各种传染性疾病进行必要的排查,以防止医源性感染,包括HCV的检测.丙型肝炎对人类健康的危害不亚于乙型肝炎,据统计全球已有1.7亿人受感染[1],大多数HCV患者早期都无临床症状,发病隐蔽,易呈慢性化,其中有相当比例患者会发展成肝炎、肝硬化甚至肝癌,严重危害人民群众健康,目前治疗以干扰素和抗病毒药物为主.因此在预防和检测手段上,尽早检出并尽可能地有效阻断HCV的传播就显得尤为重要.为此,本研究对在本院进行血液安全检查的53 680例患者进行了回顾性研究,评价丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)与丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)联检对血液安全检测筛查在临床上的价值.
关键词： 丙型肝炎 丙型肝炎病毒抗体 丙型肝炎病毒核心抗原 丙型肝炎病毒RNA -
HCV核心抗原荧光定量型生物条形码检测在筛查献血员HCV感染中的应用价值
目的 探讨HCV核心抗原(HCV-cAg)荧光定量型生物条形码检测(FQ-BCA)在筛查献血员丙肝病毒(HCV)感染中的应用价值.方法 收集3302份献血者的血标本,采用实时-PCR(RT-PCR)及FQ-BCA分别检测血标本的HCV-RNA及HCV-cAg.以RT-PCR检测结果作为金标准,评价FQ-BCA诊断HCV阳性的效能.分析HCV-RNA拷贝数与HCV-cAg阳性检出率的相关性.结果 3302份血标本中,HCV-RNA阳性共33份,HCV-cAg阳性共32份.FQ-BCA检测的灵敏度为96.97%(32/33),特异度为100.00%(3269/3269),符合率为99.97%(3301/3302).HCV-RNA拷贝数与HCV-cAg阳性检出率呈正相关(P<0.05).结论 HCV-cAg FQ-BCA诊断HCV感染具有极高的检测灵敏度及特异度,适用于献血者的血液筛检.
关键词： 丙型肝炎病毒 丙型肝炎病毒核心抗原 荧光定量型生物条形码检测 筛检 献血员 -
丙型肝炎病毒核心抗原检测在丙型肝炎筛检中的应用
目的 探讨丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)对丙型肝炎(简称丙肝)筛查的意义.方法 收集2014年10月至2015年10月8000例门诊及住院患者,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HCV-cAg、丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab),并对HCV-cAg或HCV-Ab阳性标本采用聚合酶链反应(PCR)法检测HCV-RNA进行确诊.结果 以HCV-cAg或HCV-Ab阳性为标准,从8000例血清样本中初步筛查出阳性样本82例,经HCV-RNA确证,其中HCV-RNA阳性73例,阴性9例,HCV-cAg的灵敏度及特异度分别为45.83%和99.98%,HCV-Ab的灵敏度及特异度分别为94.44%和99.90%,联合检测HCV-cAg与HCV-Ab的灵敏度及特异度分别为100.00%和99.86%.结论 在丙肝筛检工作中,HCV-cAg与HCV-Ab二者有互补性,联合检测HCV-cAg与HCV-Ab有助于提高HCV筛查率.
关键词： 丙型病毒性肝炎 丙型肝炎病毒核心抗原 筛查 -
HCV-IgG、HCV-cAg与HCV-RNA对丙型肝炎诊断的评价
目的 评价丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)、丙型肝炎病毒抗体(HCV-IgG)及丙型肝炎病毒RNA(HCV-RNA)3种检测方法在丙型肝炎实验室诊断中的意义.方法 收集84例丙型肝炎疑似患者和87例健康对照者血清,采用ELISA法检测HCV-cAg和HCV-IgG,实时荧光定量聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测HCV-RNA.结果 84例丙型肝炎疑似患者中HCV-IgG阳性率为84.5%,HCV-cAg阳性率为13.1%,HCV-RNA阳性率为52.4%;71例HCV-IgG阳性患者中HCV-RNA阴性35例,假阳性率为49.3%,11例HCV-cAg阳性患者中HCV-RNA阴性5例,假阳性率为45.5%;44例HCV-RNA阳性的丙型肝炎确诊患者中HCV-IgG假阴性率为18.2%,HCV-cAg假阴性率为86.4%;HCV-cAg和HCV-IgG联合检测的假阴性率为13.6%,真阳性率为100.0%.结论 HCV-cAg和HCV-IgG在丙型肝炎的实验室诊断中均存在一定的假阴性和假阳性,将二者联合检测或在必要时与HCV-RNA三者联合检测可降低漏诊率.
关键词： 丙型肝炎病毒核心抗原 丙型肝炎病毒抗体 丙型肝炎病毒RNA 丙型肝炎 -
HCV-Ab、HCV-cAg和HCV-RNA联合检测的临床价值
目的：评价丙型肝炎病毒抗体（HCV-Ab）、丙型肝炎病毒核心抗原（HCV-cAg）以及HCV-RNA联合检测在HCV诊断中的应用价值。方法采用ELISA法对2023例输血和手术前住院患者的血液标本进行 HCV-Ab和 HCV-cAg的测定，并对阳性标本采用RT-PCR法进行HCV-RNA的测定。结果2023例筛查标本中 HCV-Ab（＋）55例，其中 HCV-cAg （＋）30例， HCV-RNA（＋）40例；1968例HCV-Ab（-）的样本中检出 HCV-cAg（＋）9例，其中 HCV-RNA （＋）7例，HCV-cAg 与 HCV-RNA 符合率为83．0％（39/47）。结论 HCV-Ab检测结合HCV-cAg或者 HCV-RNA检测可以有效缩短 HCV的窗口期，降低漏检率。对于条件受限的基层医院 HCV-cAg 可以作为HCV-Ab常规检测的补充指标，提高检出率。
关键词： 丙型肝炎病毒抗体 丙型肝炎病毒核心抗原 丙型肝炎RNA -
ELISA法检测HCVcAg、抗-HCV及RT-PCR法检测HCV-RNA的价值
目的 分析探讨采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测丙型肝炎病毒核心抗原(HCVcAg)、HCV病毒抗体(抗-HCV)及反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测丙型肝炎病毒RNA(HCV-RNA)用于丙型肝炎诊断的价值.方法 随机选择2014年8月至2015年10月进行HCVcAg、抗-HCV及HCV-RNA检测的疑似丙型肝炎病毒感染患者180例为研究对象,纳入同期体检人员200例为健康对照.对比观察3种检测方法的检测结果.结果 180例受检人员经HCV-RNA定量检测,阳性检出率为61.11%(110/180),抗-HCV阳性检出率为52.22%(94/180),HCVcA阳性检出率42.22%(76/180).200例健康对照人员HCV-RNA阳性检出率为0.50%(1/200),HCVcAg阳性检出率为7.00%(14/200),抗-HCV阳性检出率为9.00%(18/200).结论 RT-PCR检测HCV-RNA是丙型肝炎感染为准确的方法,HCVcAg、抗-HCV联用或者抗-HCV、RNA(HCV-RNA)联用,可提高检测的准确率.
关键词： 丙型肝炎 丙型肝炎病毒核心抗原 HCV病毒抗体 丙型肝炎病毒RNA -
3种方法检测丙型肝炎患者的早期诊断价值
目的：探讨采用丙型肝炎病毒抗体（HCV‐Ab）、丙型肝炎病毒核心抗原（HCV‐cAg）、HCV‐RNA 3种方法联合检测丙型肝炎患者的早期诊断价值。方法收集该院西宁地区203例 HCV‐Ab 阳性患者及5例 HCV‐Ab 阴性 HCV‐cAg 阳性的患者，使用荧光定量 PCR 法进行 HCV‐RNA 检测，化学发光法检测 HCV‐Ab ，ELISA 法检测 HCV‐cAg 。结果203例 HCV‐Ab 阳性患者中 HCV‐cAg 阳性例数为67例、HCV‐RNA ＞1×103 U ／L 143例；72例 HCV‐Ag 阳性患者中 HCV‐RNA 阳性例数69例，符合率达95．83％，其中5例 HCV‐Ab 阴性 HCV‐cAg 阳性患者中，HCV‐RNA 阳性3例，符合率达60．00％。结论 HCV‐cAg 、HCV‐Ab 和 HCV‐RNA 3种方法联合检测可用于丙型肝炎患者的早期诊断，同时可有效缩短 HCV 窗口期，降低 HCV 感染的漏检率。
关键词： 丙型肝炎病毒抗体 丙型肝炎病毒核心抗原 HCV-RNA
