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黄连提取物对ApoE基因敲除小鼠主动脉易损斑块Perilipin和PPAR-γ基因表达的影响
目的 观察黄连提取物对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化(AS)易损宽块内周脂素(pefilipin)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)基因表达的影响,探讨黄连提取物稳定As斑块的作用及可能机制.方法 33只6-8周龄ApoE基因敲除小鼠予高脂饮食喂养13周,待其形成成熟的AS斑块后,随机分为3组:模型组、黄连提取物组、辛伐他汀组(阳性对照组),每组11只.继续高脂喂养,并按体重比折算给予小鼠临床推荐剂量的相应药物治疗13周,处死动物,每只小鼠分别取主动脉根部的4个切面,分别行HE染色和Movat染色,观察并计算各组小鼠主AS斑块内埋藏纤维帽的平均数目,实时荧光定量PCR法检测主动脉内perilipin和PPAR-γmRNA的表达.结果 给药13周后,黄连提取物组斑块内埋藏纤维帽的数目与模型组比较明显减少(P＜0.05),并且斑块内perilipin mRNA的表达与模型组比较显著降低(P＜0.05),而PPAR-γmRNA的表达较模型组显著增加(P＜0.01).结论 在临床推荐剂量上,黄连提取物可显著减少ApoE基因敲除小鼠主动脉粥样斑块破裂次数,有助于稳定易损斑块,其机制可能与促进小鼠AS斑块内PPAR-γmRNA表达,抑制perilipin mRNA表达有关.
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C57BL/6J小鼠脂肪组织总RNA提取及周脂素基因的克隆
目的 用改进后的方法提取高质量的RNA,以此为模板,应用T-A克隆法克隆C57BL/6J小鼠周脂素基因编码区,对其进行测序验证,并与GenBank比对.方法 在试剂说明书基础上,改进提取脂肪组织RNA的方法,从C57BL/6J附睾脂肪组织提取高质量的总RNA,用RT-PCR扩增出周脂素编码区基因,并将目的基因编码区克隆入pMD18-T载体中,转化E-coli JM109后,筛选阳性克隆,通过限制性内切酶酶切鉴定后,对其进行测序验证,并与GenBank比对.结果 用改进后的方法成功提取出了高质量的总RNA,并且成功提取构建的重组载体中含有周脂素基因的全长序列,与GenBank公布的序列一致.结论 改进的后的脂肪组织RNA提取方法是可行的,并获得周脂素基因的cDNA.为进一步研究其生物学功能奠定了基础.
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脂滴相关蛋白周脂素的研究进展
周脂素(Perilipin)是包被于脂滴表面的一种磷蛋白,特异表达于脂肪细胞和类固醇生成细胞中,对脂肪分解具有双重调节作用,可以调控脂解率以及脂肪组织中甘油三酯的输出.基础状态下,周脂素作为脂肪酶的屏障抑制脂解.在能量需求增加的情况下,脂解调节激素儿茶酚胺通过cAMP依赖性蛋白激酶A,使周脂素中丝氨酸磷酸化,促进激素敏感性脂肪酶转位至脂滴表面而促进脂解.周脂素基因受过氧化物酶体增殖物激活受体的调控,可能与肥胖的发生、体脂分布异常和胰岛素抵抗有关.
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周脂素与代谢综合征及临床联系
近来的研究表明,周脂素(perilipin)与胰岛素抵抗、肥胖、脂代谢紊乱以及动脉粥样斑块的形成有一定的内在联系,这为防治MS提供了新的思路.
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周脂素基因表达调控及运动对其的影响
肥胖、血脂代谢紊乱、胰岛素抵抗（ IR）均可能与脂肪分解失调有关。近年来关于脂肪分解的研究逐渐集中于包被于脂肪细胞中性脂滴表面的蛋白上。脂滴外周包被的单层磷脂分子层表面嵌着多种膜蛋白，包括周脂素或脂滴包被蛋白（ Perili-pin）、脂肪细胞分化相关蛋白（ ADRP）、47 kD的尾连蛋白（ TIP-47）、S3-12和P200，窖蛋白（ caveolins）、波形蛋白（ vimentin）以及氧化型PAT蛋白（OXPAT）或脂滴蛋白（LSDP）5或心肌脂滴蛋白（ MLDP）〔1～3〕。其中，Perilipin、ADRP和TIP-47这3种蛋白的氨基端高度保守，大约有100个氨基酸的区域具有很高的同源性，所以取Perilipin、ADRP和TIP47的第一个字母来命名，称为“PAT”家族。目前研究认为Perilipin在调控脂肪储存、分解反应及相关病理过程中发挥重要作用，可能与2型糖尿病、肥胖和动脉粥样硬化等多种代谢性疾病或心脑血管疾病有
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周脂素及运动对其影响研究进展
周脂素(Perilipin)是包被于脂滴表面的一种磷蛋白,特异表达于脂肪细胞和类甾醇生成细胞中.周脂素对脂肪分解具有双重调控作用,可能与肥胖、胰岛素抵抗和动脉粥样硬化等的发生有关.本研究对周脂素的研究进展进行综述,并提出一些假设,以期为周脂素的深入研究提供参考.
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周脂素和 ADRP在糖代谢异常大鼠肝脏组织中的表达
目的：探讨脂滴相关蛋白周脂素（perilipin）和脂肪分化相关蛋白（ADRP）在糖尿病发生发展过程中的变化情况以及在糖代谢异常合并非酒精性脂肪肝中的作用。方法：分别用高脂饲料喂养和高脂饲料喂养加小剂量链脲佐菌素建立糖耐量受损（IGT）和2型糖尿病大鼠模型（T2DM），采用光镜观察各组大鼠肝组织的形态学改变；用ELISA法测定血清周脂素perilipin和ADRP含量；real-time PCR技术检测肝脏组织中perilipin和ADRP mRNA的表达；用Western blotting法检测肝脏组织中ADRP蛋白的表达。结果：HE结果显示， IGT组和 T2DM组大鼠均有肝细胞脂肪变性，IGT组变性更严重；各模型组的生化指标与临床相关疾病的表现一致；血清perilipin水平各组之间无差异，但IGT组和T2DM组肝组织perilipin mRNA表达明显升高（P＜0.01）；与IGT组相比，T2DM组perilipin mRNA表达显著增加（P＜0.05）。 T2DM组血清ADRP含量较其对照组明显降低（P＜0.01）；模型组肝组织ADRP mRNA表达明显降低（ P＜0.01）；ADRP蛋白表达较其对照组也明显降低（ P＜0.01）；与IGT组相比， T2DM组ADRP mRNA表达明显降低（ P＜0.01）。结论：血清ADRP含量在T2DM的形成中起一定的作用，与胰岛素抵抗指数呈明显负相关；高脂喂养后能导致大鼠糖代谢异常，并伴有非酒精性脂肪肝的发生；糖代谢异常合并非酒精性脂肪肝的发生可能与肝组织perilipin表达升高和ADRP表达降低有关。
