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HPLC测定刺壳花椒中木兰花碱含量的研究
芸香科花椒属刺壳花椒Zanthoxylum echinocarpum Hemsl是我国南方地区民间常用药,主要产于西南及湖南、湖北、广东、广西等地,其药用部位有根、根皮、茎和叶,有行气止痛的功效.刺壳花椒中已知的化学成分有木兰花碱、α-别隐品碱、11-甲氧基白屈菜红碱、白藓碱、γ-花椒碱、茵芋碱等.本实验选用有抗炎作用的木兰花碱为指标,建立了高效液相色谱法测定刺壳花椒中木兰花碱含量的方法,并对10批刺壳花椒药材中木兰花碱的含量进行了测定,为刺壳花椒药材的质量控制提供实验依据.
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别隐品碱抗心律失常作用及其单相动作电位的作用
目的观察别隐品碱(ALL)的抗动物心律失常作用.方法以氯仿诱发小鼠室颤、以CaCl2-ACh混合液诱发小鼠心房纤颤、肾上腺素致豚鼠心律失常,以乌头碱诱发的豚鼠左室乳头肌收缩节律改变,选择大鼠结扎冠状动脉前降支,观察ALL抗心律失常的效应.记录豚鼠和大鼠心脏的动作电位和单相动作电位.结果ALL能明显降低氯仿诱发小鼠室颤率,应用30,100 mg/kg的ALL后,Cal2-ACh混合液诱发小鼠心房纤颤或扑动的发生率从100%降低到53.3%和33.3%.ALL使肾上腺素致豚鼠心律失常的持续时间降低,并对乌头碱诱发的大鼠心室乳头肌收缩节律失常有明显拮抗效应.ALL可明显延长其心脏的动作电位时程和不应期,这可能是其抗心律失常效应的电生理基础.结论ALL呈现出多种抗实验性心律失常的作用.
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别隐品碱抗心律失常效应及其对动作电位的影响
目的研究别隐品碱(ALL)抗心律失常效应及其对心室肌动作电位的影响.方法选择大鼠和豚鼠以静脉给乌头碱、哇巴因和氯化钡造动物心律失常的模型,观察ALL对心律失常的效应,分离豚鼠乳头状肌观察ALL对动作电位的影响.结果ALL(30和100mg/kg)对乌头碱、哇巴因和氯化钡致动物实验性心律失常有良好的对抗作用,使各种试剂诱发的室早、室速、室颤及停搏的剂量增加.ALL可降低动作电位上升幅度(APA)和0相大上升速率(Vmax).3.0～100.0 μmol/L的ALL以浓度依赖性方式使离体乳头状肌动作单位时程(APD)延长,其中30.0μmol/L的ALL使APD90延长67.5%.结论ALL具有抗实验性心律失常的效应,此效应可能与其影响心肌组织的电生理密切相关.
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原托品类生物碱离子对化合物结构探讨
目的 将原托品类生物碱(原阿片碱和别隐品碱)分别与盐酸、有机酸(苯甲酸、水杨酸等)制成盐,对获得的盐进行波谱分析.方法 通过酸碱反应制备生物碱盐,获得的结晶进行1H-NMR、13C-NMR、1H-1H COSY、HSQC、HMBC测定.结果 所获得5个化合物的波谱特征不是简单的酸碱两部分的叠加.结论 波谱数据说明原托品类生物碱有机酸盐与原托品类生物碱无机酸盐相比产生了变化.
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别隐品碱抗肝纤维化作用
目的 探讨别隐品碱(allocryptopine)对实验性肝纤维化的防治作用.方法 采用CCl4复合因素诱导大鼠肝纤维化与血吸虫致小鼠肝纤维化模型,观察刖隐品碱在造模同时(预防给药)和造模后(治疗给药)给药对脏器指数、肝功能、纤维化血清指标、脂质过氧化指标、肝组织胶原(CoI、CoⅢ)及羟脯氨酸(Hyp)表达的影响,并进行肝脏病理学检查.结果 对CCl4所致肝纤维化大鼠模型,各剂量别隐品碱预防给药均能不同程度地降低肝指数及CoⅠ表达(P＜0.05、0.01),其中高剂量明显降低CoⅢ表达(P＜0.01),中剂量明显降低脾指数、内氨睃氨基转移酶(AST)的量(P＜0.05);刖隐品碱治疗组大鼠的肝指数、天冬氨酸氨基转移酶(ALT)的量、CoⅢ表达明显降低(P＜0.05、0.01);预防给药与造模后给药均不同程度地减轻模型大鼠肝纤维化程度.对血吸虫致肝纤维化小鼠模型,别隐品碱预防给药显著降低小鼠ALT的量与Hyp水平(P＜0.05),高剂量别隐品碱治疗给药能明显降低肝指数,降低血清PCIII、碘透明质酸(HA)、ALT的量(P＜0.05、0.01),中剂量组肝指数、PCIII、HA的量明显降低(P＜0.05)治疗给药组大鼠肝脏病变明显减轻.结论 别隐品碱对实验性肝纤维化大鼠有较好的保护肝细胞、改善肝功能、抗肝纤维化作用.
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别隐品碱对小鼠心室肌细胞L-型钙电流的影响
目的 观察别隐品碱(All)对小鼠心室肌细胞L-型钙电流(ICa-L)的影响.方法 利用双酶法消化得到单个心室肌细胞,全细胞膜片钳记录ICa-L.记录台式液中细胞电流作为自身对照,细胞池中灌流含All的细胞外液,药物终浓度经预实验选取30.0 μmol/L,待药物浓度在细胞池稳定后记录电流的改变,观察ICa-L对All的浓度依赖性,记录电流和动力学参数改变.结果 ①当刺激电位为0 mV时,30.0 μmol/L All可使ICa-L峰值密度由-6.3±0.6pA/pF增加至10.5±0.3 pA/pF(n=10,P＜0.01),All增大的效应随浓度增高而加强；②Ica-L半失活电压V1/2右移,从对照的-23.5±2.6 mV移至-14.8±3.4 mV(n=10,P＜0.05)；③通道恢复时间常数(τ)从对照时的214.1±7.8ms缩短至174.0±9.5 ms(n =9,P＜0.01).结论 All增加心室肌细胞ICa-L,增大窗电流.
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大孔树脂分离纯化小果博落回果实中普托品类总生物碱的研究
目的 研究不同型号大孔吸附树脂纯化小果博落回果实中的普托品类总生物碱(以原阿片碱和别隐品碱计)的工艺条件及参数.方法 以静态饱和吸附量、静态洗脱率为考察指标,比较了5种大孔树脂,并对AB-8树脂的吸附量、吸附率、洗脱率进行了考察,以普托品类总生物碱转移率和纯度为指标对树脂吸附工艺条件进行了筛选.结果 所比较的5种树脂中,AB-8型树脂具有佳吸附及洗脱参数,其佳工艺；上柱液浓度为0.258 mg·mL-1,上柱液pH=8,上柱流速为1mL· min-1,90％乙醇洗脱,洗脱剂用量为3BV,对小果博落回普托品生物碱的动态吸附率和洗脱率均＞90％,洗脱物中普托品类总生物碱含量＞90％.结论 AB-8树脂适合于小果博落回果实中普托品类生物碱的分离与纯化.
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博落回叶与小果博落回叶中4种生物碱的含量比较
目的 比较博落回叶与小果博落回叶中4种生物碱含量的差异.方法 采用反相高效液相色谱法对博落回叶与小果博落回叶中4种生物碱——原阿片碱、别隐品碱、血根碱、白屈菜红碱的含量进行比较研究.结果 在博落回叶中原阿片碱、别隐品碱、血根碱、白屈菜红碱的含量分别为0.48％～2.00％、0.36％～1.72％、0.18％～0.81％、0.07％～0.33％,小果博落回叶中分别为0.01％～0.13％、0.07％～0.48％、0.24％～0.75％、0.35％～1.24％.结论 博落回叶中原阿片碱与别隐品碱含量较高；小果博落回叶中血根碱与白屈菜红碱含量较高.
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HPLC法同时测定博落回不同部位原阿片碱、别隐品碱的含量
目的 采用HPLC法同时检测博落回不同部位原阿片碱、别隐品碱含量.方法 采用Luna-C18色谱柱(150mm×4.6 mm,5μm),以0.1%磷酸加三乙胺缓冲溶液(pH 3.5)-乙腈(78:22)为流动相,流速为0.8 mL/min,柱温25℃.检测波长284 nm.结果 原阿片碱、别隐品碱含量测定方法的线性关系良好,线性范围和相关系数分别为4.2-52 μg/mL(r=0.999 4),6.9～86 μg/mL(r=0.999 9);平均回收率分别为99.2%、99-4%;RSD分别为0.9%、1.8%(n=6).结论 该方法操作简便、准确、灵敏度高,适合于博落回中原阿片碱、别隐品碱含量的同时测定,不同部位两种生物碱均存在一定的差异.
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双波长HPLC法同时测定两面针药材中5种成分的含量
目的:建立同时测定两面针药材中5种成分含量的方法.方法:采用高效液相色谱法.色谱柱为LunaC18,流动相为乙腈-水(含0.2％磷酸、0.25％三乙胺)(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为273、284 nm,柱温为30 ℃,进样量为20此.结果:别隐品碱、盐酸血根碱、氯化两面针碱、白屈菜红碱、芝麻素检测质量浓度线性范围分别为0.8～200、0.2～50、0.44～110、0.208～52、0.944～236 μg/mL(r均为0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD＜2.0％;加样回收率分别为101.47％～103.92％(RSD=0.92％,n=9)、102.52％～104.68％ (RSD=0.63％,n=9)、97.55％～101.22％ (RSD=1.09％,n=9)、103.35％～104.93％(RSD=0.71％,n=9)、99.31％～103.86％ (RSD=1.34％,n=9).结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性好,可用于两面针药材中5种成分含量的同时测定.
