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天花粉多糖对人外周血单个核细胞的免疫活性作用
目的:建立天花粉多糖促人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)淋巴细胞增殖的方法,了解天花粉多糖对淋巴细胞增殖、活化作用,对T淋巴细胞亚群分群的影响和诱导产生TNF-α,IL-6水平的差异.方法:制备天花粉多糖提纯液.健康人PBMc作为药物筛选的靶细胞;采用MTT法测定不同浓度天花粉多糖(0.5,1.0,5.0,10.0,20.0,50.0 mmol·L~(-1))的促人PBMC淋巴细胞增殖作用;采用流式细胞术和ELISA法分别检测药物作用后人PBMC中T淋巴细胞亚群(CD3+,CD4+,CD8+T细胞)的表达和诱导人PBMC分泌产生TNF-α,IL-α水平.结果:1.0-50.0mmol·L~(-1)天花粉多糖对人PBMc具有明显促增殖作用(P＜0.05);经5.0,10.0 mmol·L~(-1)天花粉多糖刺激后的人PBMC中,CD3+,CD4+,CD8+ T细胞的含量明显高于对照组(P＜0.05),1.0,5.0,10.0 mmol·L~(-1)天花粉多糖刺激人PBMc 8 h后,TNF-α,IL-6水平显著升高(P＜0.05).结论:天花粉多糖对人PBMC有明显促增殖和活化作用,不同程度地上调T淋巴细胞亚群中CD3+,CD4+,CD8+T细胞的含量,并可诱导入PBMC高水平分泌产生TNF-α,IL-6,为阐明天花粉多糖的免疫活性和作用机制奠定基础.
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天花粉多糖的单糖组成和相对分子质量的测定
目的 研究天花粉多糖的单糖组成、相对分子质量(Mr)及其分布.方法 天花粉用超声波振荡提取、乙醇沉淀分离出多糖,并用重结晶、色谱柱纯化后,采用气相色谱-质谱(GC-MS)、高效液相色谱(HPLC)分析天花粉多糖的单糖组成,用凝胶渗透色谱(GPC)分析天花粉多糖的Mr及其分布.结果 天花粉多糖是由鼠李糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成的杂多糖,经色谱柱纯化得到的天花粉多糖与未经纯化的天花粉粗多糖的单糖组成相同,但质量分数有所差别;天花粉多糖的GPC图有两个多糖峰,天花粉粗多糖的两个GPC峰的数均相对分子质量(Mn)分别为1.8×105和1 460,天花粉多糖的两个GPC峰的Mn分别为1.60×105和4 554.结论 两种天花粉多糖的Mr及单糖组成的质量分数有区别.
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HPGPC法测定天花粉免疫活性多糖的相对分子质量
目的：测定天花粉多糖的相对分子量及分子量分布。方法采用高效凝胶渗透色谱法，色谱条件：TSK G4000PWXL凝胶色谱柱（7.8×300mm，5μm）；TSK PWXL凝胶色谱预柱（6.0×40mm）；流动相为0.71％硫酸钠溶液；流速0.5mL· min －1；示差折光检测器。结果天花粉免疫活性多糖的重均分子量在15423～7555之间，分子量分布宽度小于2.0。相对分子量在4.60×103～1.34×105范围内线性关系良好（ R2＝0.9993）。结论该方法简便，重现性和稳定性均较好，可以作为天花粉多糖分子量及其分布测定的有效方法。
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天花粉多糖促人外周血单个核细胞增殖和对人乳腺癌细胞人子宫颈癌细胞的生长抑制作用
目的 研究天花粉多糖促人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)增殖作用和对人乳腺癌细胞(MCF-7细胞)、人子宫颈癌细胞(HeLa细胞)生长抑制作用.方法 分离健康人PBMC,采用MTT法测定不同浓度天花粉多糖(0.5,1.0,2.0,5.0,10.0,20.0 mmol·L-1)作用于人PBMC 72h后,对人PBMC的促增殖作用;不同浓度天花粉多糖对MCF-7细胞和HeLa细胞生长的抑制作用.结果 2.0～20.0 mmol·L-1天花粉多糖具有显著促进人PBMC增殖(P<0.05),且呈一定的浓度依赖关系;5.0,10.0,20.0 mmol·L-1天花粉多糖均能有效抑制MCF-7细胞和HeLa细胞生长(P<0.05).结论 天花粉多糖具有促人PBMC的增殖作用,并可显著抑制肿瘤细胞MCF-7和HeLa细胞的生长.
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天花粉多糖的组成及组分Ⅱ相对分子质量分析
目的:对天花粉多糖的组分及组分Ⅱ相对分子质量进行分析.方法:采用水提醇沉提取天花粉多糖,经纯化后进行气相-质谱联用分析得出多糖的组成.相对分子质量分析则采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC).结果:天花粉多糖组分Ⅰ是含有葡萄糖,未知单糖一和未知单糖二的杂多糖.天花粉多糖组分Ⅱ是含有鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖和未知单糖三的杂多糖.天花粉多糖组分Ⅱ经高效凝胶渗透色谱法得重均相对分子质量(Mw)=42 025;10％大分子部分重均相对分子质量=197 011;10％小分子部分重均相对分子质量=6 676;分布系数(D)=2.56;数均相对分子质量(Mn)=16 427.结论:天花粉多糖组分Ⅰ和天花粉多糖组分Ⅱ的单糖组成不相同,天花粉多糖组分Ⅱ是一个相对分子质量段在42 025左右的大分子.
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天花粉化学成分的药理活性及其提取与检测方法研究进展
目的:为建立天花粉的质量评价标准提供参考.方法:以"天花粉""化学成分""质量评价""天花粉蛋白""天花粉凝集素""天花粉多糖""药理活性""检测方法""Trichosanthis Radix""Chemical component""Quality evaluation""Trichosanthin""Trichosan-thes kirilowii lection""Polysaccharides of trichosanthis radix"等为关键词,组合查询1980年1月-2018年1月在中国知网、万方、维普、ScienceDirect、PubMed、Web of Science等数据库中的相关文献,对天花粉化学成分的药理活性、提取与检测方法进行论述.结果与结论:共检索到相关文献857篇,其中有效文献54篇.天花粉含有蛋白质类、多糖类、皂苷类、黄酮类、氨基酸等多种活性成分,其中研究较多的为天花粉蛋白、天花粉多糖、天花粉凝集素这3种成分的药理活性、提取与检测方法,而皂苷类成分和黄酮类成分研究较少,停留在总皂苷或总黄酮的层面上,缺乏化学结构鉴定及药理活性研究.天花粉蛋白是天花粉的专属性成分,具有抗病毒、抗肿瘤、中期引产等多种药理活性,可作为天花粉质量评价指标性成分.
