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梁金菇多糖诱导K562细胞凋亡的研究
目的:探讨梁金菇多糖对K562细胞凋亡的影响及其机制.方法:应用集落形成实验观察梁金菇多糖对K562细胞增殖的影响,细胞形态学、DNA凝胶电泳等检测细胞凋亡,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测凋亡相关基因Fas mRNA的表达.结果;梁金菇多糖能明显抑制K562细胞的增殖,促进细胞凋亡,细胞凋亡率的增加呈剂量依赖性.Fas基因的表达与K562细胞凋亡呈正相关.结论:梁金菇多糖具有抑制K562细胞增殖、诱导其凋亡的作用,Fas基因表达的上调可能是梁金菇多糖诱导细胞凋亡的机制之一.
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梁金菇多糖对脐血单个核细胞增殖活化的研究
姬松茸 Agaricus blazei系菌类植物的地上菌丝体,属于担子菌纲,原产于巴西,又名梁金菇.日本的姬松茸多糖具有抗肿瘤、抗突变、促进免疫、促进造血,保护肝脏[1]等功能.为了进一步探讨移植国内后的梁金菇多糖对造血功能的影响,本实验采用从脐带采集的脐血,其中含有丰富的干细胞和祖细胞,研究了梁金菇多糖对脐血单个核细胞的增殖活化作用.
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梁金菇多糖对辐射损伤小鼠造血功能的影响
目的研究梁金菇多糖(LJPS)对造血功能辐射损伤的治疗作用及机理.方法用造血祖细胞克隆法,内源性脾结节形成法,骨髓有核细胞计数及脾脏指数等方法观察了LJPS对60Co γ射线照射5.5 Gy小鼠造血功能的影响.并用免疫组化法检测辐射骨髓及脾脏细胞的bcl-2蛋白的表达.结果 LJPS辐射后第7天骨髓CFU-GM、CFU-E、CFU-F数量增加,辐射第14天的骨髓有核细胞数、脾脏指数、CFU-S明显增多,辐射第3、7、14天骨髓、脾脏bcl-2蛋白表达上升.结论 LJPS对小鼠造血功能辐射损伤具有治疗作用,其机理与调节骨髓、脾脏bcl-2蛋白表达有关.
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梁金菇多糖对人脐血单个核细胞生成白介素-2的影响
[目的]研究梁金菇多糖(LJPS)对脐血单个核细胞(CBMC)分泌白细胞介素-2(IL-2)和IL-2 mRNA表达的影响,探讨梁金菇多糖的增强免疫和抗肿瘤活性,为中国栽培的梁金菇药用价值的开发提供实验依据.[方法]采用放射性免疫法检测LJPS对CBMC分泌IL-2的影响,并应用RT-PCR法检测LJPS对CBMC IL-2 mRNA表达的影响.[结果]LJPS单独或与植物血凝素(PHA)联合应用均能够促进CBMC分泌内源性IL-2(P＜0.05和P＜0.01),分泌高峰为48 h左右,并且两者均能促进CBMC IL-2 mRNA的表达,表达高峰为24h左右.[结论]梁金菇多糖能够促进CBMC内源性IL-2的分泌及IL-2mRNA的表达.
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梁金菇多糖对人脐血单个核细胞增殖活性的增强效应及作用机制的实验研究
[目的]研究梁金菇多糖(LJPS)对人脐血单个核细胞(CBMC)增殖活性和白介素-2受体(IL-2R)生成的影响,为栽培的梁金菇药用价值的开发提供实验依据.[方法]采用四甲基氮唑盐(MTT)比色法检测LJPS体外对CBMC增殖活性的影响,采用碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(APAAP)桥联酶标法检测LJPS对CBMC表面IL-2R生成的影响.[结果]1)LJPS能够在体外单独或与人重组白介素-2(rIL-2)协同刺激CBMC的增殖(分别为P＜0.05和P＜0.005),LJPS的佳浓度为1 mg/L.并且LJPS在rIL-2诱导的脐血-淋巴因子激活的杀伤细胞(CB-LAK)早期加入始能明显增强CB-LAK细胞的增殖活性(P＜0.01).2)LJPS单独或与rIL-2协同均能促进CBMC细胞表面IL-2R的表达(分别为P＜0.002,P＜0.001).[结论]LJPS对静止的CBMC有活化效应,而且能使rIL-2诱导的CB-LAK有更强的增殖活性,其作用机制与LJPS能够促进CBMC表达IL-2R有关.
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端粒酶反义脱氧核苷酸与多糖对HL-60细胞的影响
目的研究人类端粒酶反义脱氧核苷酸及其与梁金菇多糖协同作用对HL-60细胞凋亡及端粒酶活性的影响.方法端粒酶反义脱氧核苷酸单独或与梁金菇多糖协同处理HL-60细胞后,分别用涂片法、流式细胞仪法和电镜检测两种药物处理后对细胞凋亡的影响,以TRAP-Elisa法检测对端粒酶活性的影响.结果端粒酶反义核酸单独或与梁金菇多糖协同处理HL-60均可提高细胞的凋亡率并抑制端粒酶活性,两者协同处理效果更显著.结论端粒酶反义核酸可降低细胞的端粒酶活性并诱导细胞调亡,梁金菇多糖则可加强这种作用.
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梁金菇多糖促人急性早幼粒细胞白血病细胞系(HL-60)细胞凋亡研究
目的:观察梁金菇多糖对人类早幼粒细胞白血病细胞系(HL-60)是否具有凋亡诱导作用,并进一步研究半胱天冬酶-3(Caspase-3)基因在此过程中的作用.方法:四氮唑蓝比色法(MTT法)观察梁金菇多糖对HL-60细胞的抑制率,应用形态学、流式细胞术、DNA凝胶电泳等方法检测细胞凋亡的发生.应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测凋亡相关基因Caspase-3mRNA表达的变化.结果:梁金菇多糖对HL-60细胞的生长有明显的抑制作用,并诱导肿瘤细胞发生凋亡;在HL-60细胞凋亡过程中,凋亡相关基因Caspase-3转录水平比用药前增强. 结论:梁金菇多糖促HL-60细胞凋亡,且与Caspase-3基因表达有关.
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梁金菇多糖对K562细胞凋亡及相关分子表达的影响
目的研究梁金菇多糖(ABPS)对人白血病细胞K562凋亡的影响及其机制.方法应用荧光显微镜观察凋亡细胞形态;应用流式细胞仪检测ABPS对K562细胞周期的改变及凋亡的影响;应用Western blot检测bcl-6及增殖细胞核抗原(PC-NA)的表达情况.结果荧光显微镜下观察到K562细胞核碎裂、核溶解和凋亡小体形成等典型的凋亡形态学变化.DNA凝胶电泳观察到"阶梯状"条带.用药5天后,G1期细胞数明显增多,占54.5%,42.0%的细胞发生凋亡.bcl-6表达水平升高,PCNA表达水平下降.结论ABPS能诱导K562细胞发生凋亡,其机制可能与PCNA表达水平下降、bcl-6表达水平升高有关.
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梁金菇多糖诱导白血病细胞株HL-60凋亡的研究
目的:观察梁金菇多糖对白血病细胞株HL-60凋亡的影响.方法:HL-60细胞与不同浓度的梁金菇多糖共同孵育5 d后,采用荧光显微镜与透射电镜观察细胞形态及结构、DNA凝胶电泳观察"阶梯状”条带、流式细胞仪测定凋亡率.结果:细胞出现核碎裂、核溶解,凋亡小体形成等典型的凋亡形态学变化.结论:梁金菇多糖能诱导HL-60细胞发生典型凋亡.
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梁金菇多糖对荷瘤鼠的抗肿瘤作用和免疫功能影响
目的:研究梁金菇多糖的抗肿瘤效果及其对荷瘤小鼠免疫功能的调节作用.方法:建立荷瘤小鼠模型,观察梁金菇多糖体内的抑瘤作用,采用MTT法检测小鼠的脾淋巴细胞转化、NK杀伤活性及LAK杀伤活性的影响.结果:梁金菇多糖能够明显抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长,能够促进正常和荷瘤小鼠的脾淋巴细胞的转化,提高刺激指数,提高NK杀伤活性及LAK杀伤活性.结论:梁金菇多糖提高荷瘤小鼠的免疫功能是其掏肿瘤效应的机制之一.
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梁金菇多糖诱导红白血病细胞株K562凋亡和分化的初步研究
目的研究梁金菇多糖(LJPS)的抗肿瘤作用及机制.方法采用四氮唑蓝比色法(MTT法)观察LJPS对K562细胞的增殖抑制,应用NBT试验和普通光镜观察细胞分化,流式细胞术(FCM)和DNA凝胶电泳技术检测细胞凋亡.结果 LJPS对K562细胞有明显抑制增殖并诱导细胞凋亡、分化的作用,DNA凝胶电泳出现片断化的梯形带,FCM检测示细胞阻滞在G1期,出现凋亡峰.结论 LJPS对K562细胞具有抑制增殖、诱导凋亡和分化的作用.
