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芪蛎消瘿汤对NOD.H-2h4小鼠甲状腺CD4+T细胞亚群影响的实验研究
目的:从CD4+T细胞亚群角度,探讨芪蛎消瘿汤治疗自身免疫甲状腺炎(AIT)的作用机制.方法:60只SPF级NOD.H-2h4小鼠,随机分成以下4组:正常(NC)组、模型(MC)组、常规剂量芪蛎消瘿汤组(ZY1,20.8 g·kg-1)、和3倍剂量芪蛎消瘿汤组(ZY3,62.4 g·kg-1),正常组饲以双蒸水,其余各组自由饮用含0.05％碘化钠水8周,8周后自发形成AIT动物模型,再给处理因素8周后处死小鼠,留取各组NOD.H-2h4小鼠血清、甲状腺.放免法(RIA法)测小鼠血清总三碘甲状腺原氨酸(TT3)、总甲状腺素(TT4),固相化学发光酶免疫法(IRMA法)测定小鼠血清促甲状腺激素(TSH);光镜下观察甲状腺细胞形态;免疫组化法测定小鼠甲状腺γ-干扰素(INF-γ)、白细胞介素4(IL-4)蛋白表达;RT-PCR法检测小鼠甲状腺INF-γ,IL-4mRNA表达;Western blot法测定小鼠甲状腺组织叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)蛋白表达.结果:各组间血清TT3,TT4及TSH值比较无明显差异.HE染色显示MC组甲状腺组织淋巴细胞浸润,MC组AIT的发生率明显高于NC组(P＜0.01).MC组INF-γ,IL-4 mRNA及蛋白表达较NC组显著下降(P＜0.01);与MC组比较,ZY1,ZY3组INF-γ,IL-4的蛋白表达升高(分别P ＜0.01,P＜0.05);且ZY1组,ZY3组INF-γ,IL-4mRNA表达显著升高(P＜0.01).MC组甲状腺组织Foxp3的蛋白表达量较NC组明显下降(P＜0.01);ZY1,ZY3组Foxp3表达较MC组明显升高(P＜0.01).结论:芪蛎消瘿汤治疗AIT的机制可能与上调INF-γ,IL-4,Foxp3的表达,影响NOD.H-2h4小鼠Th1,Th2,Treg细胞亚群水平相关.
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芪蛎消瘿汤对NOD.H-2h4小鼠甲状腺IL-23/IL-17轴的调控影响
目的:从辅助性T细胞17(Th17)细胞分化的调控角度,探讨芪蛎消瘿汤治疗自身免疫甲状腺炎(AIT)的作用机制.方法:雌性8周龄NOD.H-2h4小鼠,随机分成4组.正常组(NC)饲以双蒸水,模型组(MC)、常规剂量中药组(ZY1)和3倍剂量中药组(ZY3)自由饮用含0.05％碘化钠水8周成模后,再灌胃给药8周.RIA法测血清TT3、TT4,IRMA法测血清TSH;光镜下观察甲状腺细胞形态;免疫组化法及RT-PCR法分别检测甲状腺IL-6、TGF-β表达;Western Blot法检测甲状腺RORγt、RORα、STAT3蛋白表达.结果:各组间血清TT3、TT4及TSH值比较无统计学差异;与NC组比较,MC组AIT的发生率,IL-6、TGF-β mRNA及蛋白表达,RORγt、RORα、STAT3表达显著升高(P＜0.01);与MC组比较,ZY1组IL-6、TGF-β、RORα、STAT3、RORγt表达均明显下降(P＜0.01),ZY3组IL-6、TGF-p的整合光密度值及RORα、STAT3表达明显下降(P＜0.01),ZY3组RORγt表达下降(P＜0.05).结论:芪蛎消瘿汤可能通过下调IL-6、TGF-β、RORγt、ROR α、STAT3的表达而调控IL-23/IL-17炎症轴起到治疗AIT的作用.
