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尿感方治疗尿路感染的主要药效学研究
目的:探讨尿感方治疗尿路感染的药效.方法:将小鼠随机分为空白对照组、阳性药对照组、模型组、尿感方高、低剂量组( 54.29,27.15 g·kg-1).各组连续ig给药7d,空白对照组及模型组予同容积蒸馏水,第7天测定其体内抗菌、抗炎作用.将大鼠随机分为空白对照组、阳性药对照组、模型组、尿感方高、低剂量组(38.01,19.01 g·kg-1).给药方法小鼠,第7天观察其对尿路感染模型大鼠的影响、对大鼠5h尿量的影响、对大鼠尿分泌型免疫球蛋白a(SIgA)水平的影响.结果:尿感方给药剂量为38.01 g·kg-1时尿感模型大鼠尿菌落计数、肾脏病理等级明显小于模型组(P＜0.05)；剂量为54.29 g·kg-1时感染小鼠存活率明显高于模型组(P＜0.05)；剂量分别为54.29,27.15 g·kg-1时致炎小鼠耳肿胀程度明显小于对照组(P ＜0.01,P＜0.05)；剂量为38.01 g·kg-1时大鼠5h尿量及尿SIgA含量明显多于正常组(P＜0.01).结论:尿感方可从抗菌、抗炎、利尿、增强局部免疫等多方面起效,具有治疗尿路感染的作用.
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尿感方对尿道致病性大肠杆菌感染膀胱上皮细胞感染早期分泌IL-6、IL-8的影响
目的:观察尿感方对尿道致病性大肠杆菌(UPEC)感染人膀胱上皮细胞(BECs)感染早期分泌白介素(IL)-6、IL-8的影响.方法:通过UPEC感染HTB-9细胞模型,采用酶联免疫吸附法,观察尿感方(原药、大鼠含药尿液、健康人含药尿液)对感染早期膀胱上皮细胞分泌IL-6、IL-8的影响.结果:UPEC感染BECs 1h后,与模型组比较,尿感方原药组受感染BECs分泌的IL-6、IL-8均显著增多(P＜0.01,P＜0.05);与模型组和大鼠空白尿液组比较,尿感方大鼠含药尿液组受感染BECs分泌的IL-6、IL-8均显著增多(P＜0.01);与模型组和健康人空白尿液组比较,尿感方健康人含药尿液组受感染BECs分泌的IL-6、IL-8均显著增多(P＜0.01).结论:尿感方能促进UPEC感染早期的BECs分泌IL-6和IL-8.
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尿感方抗尿道致病性大肠杆菌侵袭膀胱上皮细胞的作用研究
目的 观察尿感方抗尿道致病性大肠杆菌(uropathogenic Escheriehia coli,UPEC)侵袭膀胱上皮细胞的作用,并探讨其作用机制.方法 通过UPEC感染人膀胱癌细胞5637(human bladder cancer cell 5637,HTB-9)侵袭模型,观察尿感方含药尿液保护膀胱上皮细胞抗UPEC侵袭的作用;同时采用分子生物学技术,观察其对Toll样受体4(TLR4)/环磷酸腺苷(cAMP)信号传导通路的主要环节:TLR4、腺苷酸环化酶3(AC3)、环磷酸腺苷(cAMP)、蛋白激酶A(PKA)和Rac-1的影响.结果 与大鼠空白尿液高剂量组(体积分数10％空白尿液)比较,尿感方大鼠含药尿液高剂量组(体积分数10％含药尿液)的细菌入侵率降低;与模型组比较,大鼠空白尿液组的细菌入侵率无显著性差异.与大鼠空白尿液高剂量组比较,尿感方大鼠含药尿液高剂量组增加了TLR4、AC3蛋白的表达及胞内cAMP的水平,促进了PKA活化,抑制了Rac-1的活性.结论 尿感方具有一定的抗UPEC侵袭膀胱上皮细胞的作用,其作用机制与影响TLR4/cAMP信号传导通路的环节有关.
关键词： 尿感方 尿道致病性大肠杆菌 侵袭 人膀胱上皮细胞 TLR4/cAMP信号传导通路 -
尿感方对大肠杆菌生物膜形成及与毒力基因fim、usp、hlyA表达的影响
目的:研黏究尿感方对大肠杆菌细菌生物膜的形成与黏附作用的影响,以及对大肠杆菌毒力基因fim、usp、hlyA表达的影响.方法:通过酶标法、电镜法观察尿感方原液,尿感方含药血清、含药尿液对大肠杆菌细菌生物膜黏附的影响；通过real-time PCR法观察尿感方原液、尿感方含药血清、含药尿液对大肠杆菌毒力基因fim、usp、hlyA基因表达的影响.结果:与空白对照组相比较,尿感方原药与尿感方含药尿液能抑制大肠杆菌细菌生物膜的形成与黏附作用(P＜0.05)；与空白组对照组相比,尿感方原药能抑制大肠杆菌毒力基因fim、usp的表达(P＜0.05)；与空白尿液组相比尿感方含药尿液能抑制大肠杆菌毒力基因fim、usp、hlyA表达(P＜0.05).结论:尿感方原药与含药尿液能抑制大肠杆菌黏附,且能抑制大肠杆菌致病毒力基因的表达,从而降低大肠杆菌的致病力.
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尿感方对膀胱上皮细胞天然免疫应答受体TLR4的影响
目的:观察尿感方对膀胱上皮细胞天然免疫应答受体TLR4的影响.方法:予尿感方原药、尿感方大鼠含药尿液、尿感方健康人含药尿液干预HTB-9细胞,采用Western Blot法观察尿感方对未经LPS激活状态下膀胱上皮细胞TLR4蛋白表达的影响.结果:经预处理HTB-9细胞12 h后,与未干预组和空白大鼠尿液组比较,尿感方组TLR4的蛋白表达显著增加(P＜0.01);经预处理HTB-9细胞24 h后,与未干预组和空白健康人尿液组比较,尿感方健康人含药尿液组TLR4的蛋白表达显著增加(P＜0.01);经预处理HTB-9细胞24 h后,与未干预组比较,尿感方原药组TLR4的蛋白表达增加(P＜0.05).结论:尿感方能够提高膀胱上皮细胞天然免疫应答受体TLR4的蛋白表达.
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尿感方对小鼠抗炎与免疫调节作用及对大鼠黏膜免疫的影响
目的 研究尿感方对小鼠的抗炎与免疫调节作用以及对大鼠的黏膜免疫作用.方法 酶标法测定尿感方对二甲苯致炎小鼠血清前列腺素E2(PGE2)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MAD)、一氧化氮(NO)含量的影响；观察尿感方各剂量组对免疫低下小鼠免疫脏器指数的影响；酶标法测尿感方对大鼠尿液分泌型免疫球蛋白(sIgA)含量的影响；Real-time PCR法测定尿感方对大鼠膀胱组织分泌片段(SC)基因表达的影响.结果 与空白模型组比较,尿感方能增加致炎小鼠血清SOD含量,降低血清MAD含量(P＜0.05),并能增加大鼠尿液中sIgA含量(P＜0.05),增加大鼠膀胱组织中SC基因的表达(P＜0.05)；与空白模型组比较,尿感方能增加免疫低下小鼠的脾脏指数与胸腺指数(P＜0.05).结论 尿感方能调节模型小鼠血清中炎症因子水平并发挥抗炎作用,且有一定的免疫调节作用；能增加大鼠尿液中sIgA含量,以及膀胱组织中SC基因的表达,增强尿道防御外来致病菌侵袭的能力.
关键词： 尿感方 抗炎 免疫调节作用 尿液分泌型免疫球蛋白A 分泌片段 -
尿感方清除受感染膀胱上皮细胞胞内尿道致病性大肠杆菌的作用
目的 观察尿感方(马齿苋、蒲公英)清除受感染膀胱上皮细胞胞内尿道致病性大肠杆菌(uropathogenic Escheriehia coli,UPEC)的作用,并探讨其作用机制.方法 通过UPEC感染人膀胱癌细胞5637(human bladder cancer cell 5637,HTB-9)细胞模型,观察尿感方含药尿液清除受感染膀胱上皮细胞胞内UPEC的作用;同时采用分子生物学技术,观察其对TLR4/cAMP信号传导通路的主要环节Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、腺苷酸环化酶3(adenylate cyclase 3,AC3)、环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)、蛋白激酶A(protien kinase A,PKA)、肌球蛋白Ⅶa和Rab蛋白相互作用蛋白(MyosinⅦA and Rab interacting protein,MyRIP)、Rab27b和小窝蛋白1 (Caveolin-1)的影响.结果 与大鼠空白尿液高剂量组比较,尿感方大鼠含药尿液高剂量组的细菌胞吐率增加.与大鼠空白尿液高剂量组比较,尿感方大鼠含药尿液高剂量组增加TLR4、AC3蛋白的表达及胞内cAMP的水平,促进PKA活化,增加TLR4、AC3、MyRIP、Rab27b和Caveolin-1蛋白的表达.结论 尿感方具有一定的清除受感染膀胱上皮细胞胞内UPEC的作用,其作用机制与TLR4/cAMP信号传导通路的环节有关.
关键词： 尿感方 尿道致病性大肠杆菌 胞吐 人膀胱上皮细胞 TLR4/cAMP信号传导通路 -
尿感方抗尿道致病性大肠杆菌的实验研究
目的:观察尿感方对尿道致病性大肠杆菌(UEC)在人尿道上皮细胞黏附效应的影响.方法:体外实验以营养肉汤组作空白对照,观察经三金片、蔓越莓、不同浓度的尿感方等药物处理后人尿道上皮细胞上UEC黏附数量的变化.体内实验比较经正常尿液及口服尿感方后4h尿液、次日晨尿处理后的人尿道上皮细胞上UEC黏附数量的变化.结果:①体外实验:经不同药物处理后的各用药组其UEC黏附于尿道上皮细胞上的细菌数较未经药物处理的营养肉汤组明显减少(P＜0 01)；三金片、蔓越莓组与同等浓度的尿感方组比较,其黏附在尿道上皮细胞上的UEC细菌数无明显差异(P＞0.05)；三种不同浓度的尿感方组比较,尿感方浓度越高,抗黏附效果越好.②体内实验:经口服尿感方后4h尿及次日晨尿处理过的UEC黏附于尿道上皮细胞上的数目较经服药前的正常尿液处理的UEC黏附数目明显减少(P＜0.05,P＜0.01).结论:尿感方具有良好的体外、体内抗UEC黏附的作用,且药物浓度越高,抗黏附效果越好.尿感方阻止UEC在人尿道上皮细胞的黏附可能是其治疗尿路感染的作用机制之一.
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尿感方体外抗菌活性的初步研究
目的 初步探讨尿感方的体外抗菌活性,为该药的临床运用提供理论依据.方法 ①运用二倍稀释法测定尿感方对12菌株的低杀菌浓度(MBC)及杀菌曲线.②尿感方作用大肠杆菌标准菌株(ATCC25922)4,24h后,通过计数黏附在T24细胞上的细菌个数来检测其对细菌黏附力的影响.实验结果采用SPSS17.0统计软件包进行处理.结果 ①尿感方具有一定的体外抗菌效果,对部分临床菌株杀菌速度快于维沙欣.②与模型组比较,尿感方高剂量组可显著降低细菌的黏附能力(P＜0.01).结论 尿感方具有体外抗菌、降低细菌黏附力作用.
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尿感方治疗慢性尿路感染(下焦湿热证)的临床疗效观察
目的 观察尿感方治疗慢性尿路感染(下焦湿热证)的临床疗效.方法 将83例患者随机分为尿感方治疗组、三金片对照组和维沙欣对照组;治疗组采用尿感方治疗,对照组分别采用三金片和维沙欣治疗,疗程均为10天.结果 尿感方治疗组在尿频尿急、尿色黄赤方面疗效优于对照组.综合疗效上尿感方治疗组优于三金片对照组,而与维沙欣对照组无统计学差异.结论 尿感方治疗慢性尿路感染(下焦湿热证)具有较好的疗效.
