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卡泊三醇诱导小鼠特应性皮炎模型的适条件探索
目的探讨卡泊三醇（ MC903）致小鼠特应性皮炎模型的建立方法。方法诱导剂量探索实验：从d0起，于各剂量组BALB／c小鼠右耳分别涂布0.33、1、3 nmol MC903，连续诱导7d。每天观察小鼠耳肿胀程度并测量双耳耳厚，分别于d3、7取材分析。诱导时间探索实验：从 d 0起，于BALB／c小鼠右耳涂布2 nmol· ear－1 MC903，连续诱导至d 14。每天观察小鼠耳肿胀程度并测量双耳厚，分别于d 3、7、11、15获取小鼠右耳组织进行病理组织学检查。制备小鼠右耳耳组织匀浆，检测匀浆中胸腺基质淋巴细胞生成素（ TSLP）、IL-33、IL-4、IFN-γ表达水平以及外淋巴结中DC细胞表面标记分子CD40＋、CD86＋和ILC2细胞百分含量的变化。结果①每耳1、3 nmol MC903诱导的小鼠耳肿胀度从d 3开始显著增加， TSLP、IL-4水平明显增加，每耳3 nmol MC903剂量组IL-33水平于d 7明显增加。②每耳2 nmol MC903诱导的特应性皮炎小鼠从d 3起，小鼠右耳耳肿胀明显，耳厚逐渐增加，并于d 14达到峰值；小鼠耳组织病理组织学检查显示，从d7起，小鼠右耳耳组织红肿，毛细血管扩张，炎性细胞浸润明显，耳部炎性症状维持并逐渐加重至d 15；与正常小鼠相比， MC903使右耳组织匀浆中TSLP水平于d 3明显升高，随后逐渐下降，IL-4、IL-33水平于d 7明显升高，随后逐渐降低。外淋巴结中 DC 的表面标记分子CD40＋、CD86＋和ILC2的含量在d 7和d 15均有上升。结论每耳2 nmol MC903诱导小鼠7 d可成功建立小鼠特应性皮炎模型，TSLP较适检测点为d 3，IL-4、IL-33较适检测点为d7。
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哮喘患者穴位贴敷后不同程度急性接触性皮炎临床特点及胸腺基质淋巴细胞生成素表达差异性研究
目的 采用穴位贴敷治疗哮喘患者,观察其诱发的不同程度急性接触性皮炎临床特点及胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)表达的差异性.方法 收集110例哮喘缓解期患者,按贴敷后皮肤反应程度分为轻度组及中重度组,比较两组患者治疗前后喘息、哮鸣音、发作次数及临床疗效,观察两组肉眼下皮损表现、皮损病理学以及TSLP的表达.结果 中重度组患者贴敷后喘息、哮鸣音、发作次数及临床疗效均优于轻度组(P<0.05).轻度组患者只有少数感到贴敷处痛痒、红斑、小丘疹或簇状小水疱,中重度组贴敷处痛痒难忍、红斑、水疱程度重于前者.病理学示轻度组表现为血管周围少量单核细胞、淋巴细胞及嗜酸性粒细胞浸润,中重度组表现为真皮血管扩张、充血明显,其周围大量单核细胞、淋巴细胞浸润.光镜下TSLP在轻度组主要分布于表皮全层,中重度组大量分布于真皮层血管周围.TSLP表达量与穴位贴敷后急性接触性皮炎炎性程度呈正相关(r=0.908,P<0.05).结论 穴位贴敷诱发的急性接触性皮炎炎症程度与临床表现及TSLP表达呈正相关,可能与真皮血管关系密切.
关键词： 急性接触性皮炎 穴位贴敷 哮喘 胸腺基质淋巴细胞生成素 -
TNF-α和TSLP在干眼症患者中的表达水平及临床意义
目的:探究肿瘤坏死因子-α和胸腺基质淋巴细胞生成素在于眼症患者中的表达水平及临床意义.方法:选取我院收治的70例干眼症患者为观察组,同期55例健康正常人为对照组.比较两组结膜上皮细胞和泪液中TNF-α、TSLP基线值差异,并检测两组FL、BUT及SIT情况,分析其与TNF-α、TSLP表达水平的相关性.结果:观察组泪液、结膜上皮细胞中TNF-α、TSLP均显著高于对照组(P＜0.05);泪液、结膜上皮细胞中TNF-α、TSLP表达与BUT、SIT均呈负相关(P＜0.05),与FL呈正相关(P＜0.05).结论:泪液、结膜上皮细胞中TNF-α与TSLP表达与干眼症的病情进展密切相关,可作为干眼症的临床诊断或预后判断的生化指标.
关键词： 干眼症 肿瘤坏死因子-α 胸腺基质淋巴细胞生成素 -
TSLP 与调节性 T 淋巴细胞在慢性鼻窦炎中的表达
目的：观察胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）及 C D4＋C D25＋Foxp3＋调节性 T 细胞（Tregs）在单纯慢性鼻窦炎中的表达，探讨二者在慢性鼻窦炎发生发展过程中可能的作用机制。方法收集25例慢性鼻窦炎患者的鼻窦黏膜为实验组，28例鼻中隔偏曲患者的下鼻甲黏膜为对照组，采用 Q-RT-PCR 和免疫组化技术检测各组鼻腔黏膜中调节性 T 细胞、Foxp3 mRNA 和 TSLP mRNA 的表达，并分析 TSLP 与调节性 T 细胞、Foxp3 mRNA 的相关关系。结果①TSLP mRNA、Foxp3 mRNA、调节性 T 细胞在慢性鼻窦炎中的表达明显高于对照组（P ＜0．05），TSLP 与Foxp3 mRNA 的表达在慢性鼻窦炎中呈正相关（r ＝0．9773，P ＜0．0001）；②根据免疫组化结果计数 Tregs 数量， TSLP 与调节性 T 细胞在慢性鼻窦炎中的表达也呈正相关关系（r ＝0．8646，P ＜0．0001）。结论TSLP 可通过诱导调节性 T 细胞的发育和增殖，维持免疫自稳，参与慢性鼻窦炎的发生发展过程，其具体的机制有待进一步研究。
关键词： 慢性鼻窦炎 胸腺基质淋巴细胞生成素 调节性 T 细胞 FOXP3 -
橙皮苷对大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用及其机制
目的 探讨胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)在溃疡性结肠炎(UC)大鼠血清中的水平及橙皮苷的干预作用.方法 应用三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇灌肠制备大鼠溃疡性结肠炎模型.将大鼠模型随机分为模型组、模型+橙皮苷组,模型+柳氮磺胺嘧啶组,另设正常对照组,共4组.观察大鼠一般状况及粪便性状;采用ELISA法检测溃疡性结肠炎大鼠血清中TSLP水平;放射免疫分析法测定肠黏膜中TNF-α的水平.结果 模型组大鼠血浆中TSLP、肠黏膜TNF-α的表达及DAI评分明显高于正常对照组和模型+橙皮苷组;模型+橙皮苷组与对照组比较,差异无显著性.结论 橙皮苷对溃疡性结肠炎具有治疗作用,其机制可能是通过降低TSLP的表达、抑制炎症型Th2类细胞的产生而发挥其干预作用.
关键词： 橙皮苷 胸腺基质淋巴细胞生成素 溃疡性结肠炎 Th1/Th2 -
哮喘患者诱导痰中TSLP、IL-25水平测定及意义
目的 探讨胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)、IL-25在支气管哮喘(下称哮喘)发病中的作用. 方法选择急性发作期及慢性期哮喘患者各15例(哮喘组)及健康查体者15例(对照组),采用超声雾化吸入4%高渗盐水法采集诱导痰标本,以ELISA法测定诱导痰中TSLP、IL-25水平,分析两者相关性. 结果哮喘组诱导痰中TSLP及IL-25水平均显著高于对照组,且急性发作期显著高于慢性期(P均＜0.05). 结论 TSLP、IL-25可能在哮喘发生、发展中具有重要作用,有望作为哮喘治疗的潜在靶点.
关键词： 胸腺基质淋巴细胞生成素 白细胞介素-25 哮喘 气道炎症 -
呼吸道合胞病毒感染幼龄大鼠肺组织胸腺基质淋巴细胞生成素及其下游因子的动态分析
目的 研究呼吸道合胞病毒(RSV)感染幼龄大鼠后不同时间点肺组织胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)、GATA3转录因子及血清中白细胞介素(IL)-4、IL-13的变化,动态分析TSLP及其下游相关因子的表达水平.方法 将60只健康Wistar大鼠采用随机数字表法分为正常组及模型组,每组30只.在乙醚麻醉下,模型组大鼠经鼻腔接种RSV Long株病毒液,每日1次,连续3d,建立病毒感染模型.分别于模型建立后第3、5、7天,观察并记录2组大鼠的一般状态,采用实时荧光定量聚合酶链式反应和酶联免疫吸附试验动态分析RSV mRNA、TSLP及其下游因子的表达水平.结果 1.与正常组大鼠相比,模型组一般状态较差且进行性加重.2.RSV感染后,模型组大鼠病毒载量于实验第5天达高峰,即4.58 ±0.21.3.模型组大鼠TSLP在各个时间点的表达水平分别为0.94±0.26、1.27 ±0.10、1.27±0.01,与正常组相比均处于较高水平,并且第5、7天比较差异有统计学意义(t=-11.409、-57.482,均P＜0.05).4.模型组大鼠GATA3的表达在各个时间点的表达水平分别为1.16±0.07、2.61 ±0.41、0.64±0.06,与正常组相比均处于较高水平,且差异有统计学意义(t=-26.899、-10.637、-15.187,均P＜0.05).5.与正常组相比,模型组大鼠IL-4、IL-13表达均处于较高水平,且随实验进行其表达水平均呈现上升趋势.结论 RSV感染大鼠可通过上调TSLP、GATA3转录因子和IL-4、IL-13的表达,引起Th2细胞优势免疫应答的持续动态变化.
关键词： 胸腺基质淋巴细胞生成素 呼吸道合胞病毒 大鼠 -
胸腺基质淋巴细胞生成素和白细胞介素-4在变应性结膜炎鼠模型中的促炎作用
背景 研究表明胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)为类白细胞介素(IL)-17的炎性细胞因子,在多种变应性疾病的发生和发展中发挥关键作用,但是尚未见到关于TSLP是否参与中国常见变应原诱导的变应性结膜炎的报道. 目的 研究TSLP和IL-4在由中国常见的黄花蒿诱导的变应性结膜炎小鼠模型眼表组织和颈部淋巴结中的表达变化,探讨TSLP和IL-4在变应性结膜炎发病中的作用. 方法 采用随机数字表法将6～8周龄雌性BALB/c小鼠20只随机分为正常对照组和模型组.将400μl黄花蒿花粉提取液溶解于400μl变应原(抗原)溶媒中制备成抗原溶液,将50μl抗原溶液注射于模型组小鼠足底皮垫下初次致敏,于注射后第10 ～12天用黄花蒿花粉提取液局部点右眼再次致敏,每日点眼1次;正常对照组小鼠未做任何处理.于造模后第13天采用颈椎脱臼法处死小鼠并摘取眼球,在眼科显微镜下各组分别取16只小鼠32只眼角膜上皮、结膜和颈部淋巴结组织,采用实时定量PCR法检测各种靶组织中TSLP mRNA及IL-4 mRNA的相对表达量,另每组各取4只小鼠8只眼眼睑及眼球制备石蜡切片,采用免疫组织化学法检测角膜、结膜及结膜下组织中TSLP和IL-4蛋白的表达. 结果 模型组小鼠第2次致敏后0.5h可见小鼠眼睑水肿、结膜充血水肿、溢泪、搔抓眼睑等症状,症状持续6 ～24 h,造模成功率为80％.实时定量PCR结果显示,模型组与正常对照组小鼠角膜上皮均未发现IL-4表达.模型组小鼠角膜上皮、结膜组织和颈部淋巴结组织中TSLP mRNA表达量分别是正常对照组的(1.63±0.20)、(2.71±0.48)和(1.48±0.05)倍,差异均有统计学意义(=4.44、14.16、5.01,均P＜0.05);模型组小鼠结膜和颈部淋巴结中IL-4 mRNA表达量分别是正常对照组的(2.94±0.39)倍和(1.74±0.09)倍,差异均有统计学意义(t=9.92、14.54,均P＜0.05).免疫组织化学法检测显示,正常对照组小鼠角膜上皮和结膜上皮细胞中TSLP蛋白表达强度微弱,模型组小鼠TSLP蛋白表达增强.模型组小鼠结膜下组织中可见IL-4呈强阳性表达,正常对照组小鼠结膜下组织中未发现IL-4表达.结论 TSLP主要表达于变应性结膜炎小鼠的角膜、结膜和颈部淋巴结组织,提示其参与变应性结膜炎角膜和结膜的炎症反应;IL-4主要表达于变应性结膜炎小鼠结膜下组织中,提示其主要参与结膜的炎症反应,TSLP和IL-4共同参与变应性结膜炎的发生和发展过程,这2种炎症因子为变应性结膜炎的临床治疗提供了新的靶点.
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醒鼻凝胶剂对变应性鼻炎豚鼠胸腺基质淋巴细胞生成素表达的影响
目的：观察醒鼻凝胶剂对变应性鼻炎（ allergic rhinitis，AR）豚鼠鼻黏膜胸腺基质淋巴细胞生成素（ thymic stromal lympho-poietin，TSLP）及Th2型细胞因子白介素-6（interleukin-6，IL-6）、肿瘤坏死因子-α（tumour necrosis factor，TNF-α）表达的影响，探讨其治疗AR的可能机制。方法：健康豚鼠60只随机分为正常对照组，模型对照组，布地奈德组，醒鼻凝胶剂高剂量组、中剂量组、低剂量组，每组10只。卵清蛋白加氢氧化铝腹腔注射制备AR豚鼠模型，醒鼻凝胶剂组给予不同剂量醒鼻凝胶剂治疗，连续11 d。ELISA法检测鼻腔灌洗液IL-6、TNF-α的表达，RT-PCR、免疫组织化学检测鼻黏膜TSLP mRNA和TSLP蛋白的表达。结果：模型组IL-6、TNF-α含量和TSLP mRNA、TSLP蛋白的表达量明显高于对照组（ P﹤0.01）；醒鼻凝胶剂组和布地奈德组IL-6、TSLP mRNA和TSLP蛋白的表达量明显低于模型组（P﹤0.01）；醒鼻凝胶剂组和布地奈德组TNF-α明显低于模型组（P﹤0.05）。结论：醒鼻凝胶剂可抑制AR豚鼠的炎症反应，其机制可能通过抑制TSLP的表达，减少TSLP诱导的Th2型细胞因子IL-6和TNF-α的产生而实现。
关键词： 醒鼻凝胶剂 变应性鼻炎 豚鼠 胸腺基质淋巴细胞生成素 -
重症肌无力患者手术切除胸腺疗效相关机制探讨
目的:探讨重症肌无力(MG)患者手术切除胸腺的疗效及其相关机制.方法:MG患者120例,均行手术切除胸腺治疗,对胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)的表达与外周血中调节性T细胞的变化进行检测.结果:120例患者术后第7天总有效率为91.7％,术后第7天患者的外周血CD4+ CD25+ Foxp3 +/CD4+值明显高于术前(P＜0.05).胸腺组织HE染色可见的髓质部淋巴细胞增生与部分Hassall小体;免疫组化染色可见中髓质部Hassall小体数量明显减少,染色稍浅.相关性分析显示TSLP阳性表达的Hassall小体计数与CD4+CD25+ Foxp3+ Treg细胞表达水平之间呈线性相关(P＜0.05).Logistic回归模型分析表明CD4+ CD25+Foxp3 +/CD4+值和TSLP阳性表达是影响疗效的独立危险因素(P＜0.05).结论:切除胸腺对治疗MG疗效好,与有效调节T细胞与胸腺基质淋巴细胞生成素的表达有关.
关键词： 重症肌无力 胸腺基质淋巴细胞生成素 调节性T细胞 -
胸腺基质淋巴细胞生成素诱导重症肌无力患者胸腺 CD4+CD25－T 细胞向 CD4+CD25+Foxp3+调节性T 细胞分化
目的：探索胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）对重症肌无力（MG）合并胸腺异常患者胸腺 CD4+CD25－T细胞诱导生成 CD4+CD25+Foxp3+调节性 T （Treg）细胞的研究。方法：以磁珠分选的方法得到胸腺CD4+CD25－T 细胞及树突状细胞（DC）细胞，通过不同浓度（0.1、1、10、20 ng/mL）的 TSLP 活化 DC 后诱导CD4+CD25－T 细胞向 CD4+CD25+Foxp3+Treg 细胞分化，以流式细胞术检测 CD4+CD25+Foxp3+Treg 细胞/CD4+T 细胞比率；RT-PCR 检测 Foxp3 mRNA 表达；Western blot 法检测上调的 CD4+CD25+Foxp3+Treg 细胞的Foxp3蛋白表达；ELSIA 法检测培养上清 IL-10的含量。结果：10 ng/mL TSLP 组、20 ng/mL TSLP 组经诱导后CD4+CD25+Foxp3+Treg 细胞/CD4+T 细胞比例均明显升高，Foxp3的表达水平也相应增加，IL-10水平升高，与PBS 对照组相比差异有统计学意义（P<0.05）。结论：TSLP 可以诱导 MG 合并胸腺异常患者胸腺 CD4+CD25－T 细胞向 CD4+CD25+Foxp3+Treg 细胞分化，并促进 Foxp3的表达。
关键词： 重症肌无力 胸腺基质淋巴细胞生成素 调节性 T 细胞 -
鼻息肉组织中TSLP的表达及与Th2炎症反应的关系
目的:探讨鼻息肉组织中TSLP的表达及与Th2炎症反应的关系.方法:收集60例确诊为鼻息肉的患者,采用免疫组织化学SP染色法检测其鼻息肉组织中TSLP的表达,ELISA法检测组织中IL-4、IL-5、IFN-γ及IL-13的表达,并分析其与TSLP表达的相关性.结果:TSLP在鼻息肉组织中较正常下鼻甲黏膜表达高,而IL-4、IL-5、IFN-γ和IL-13在鼻息肉组织表达显著增高(P＜0.05).TSLP与IL-4、IL-5、IL-13呈显著正相关(r分别为0.475、0.594和0.582,P＜0.01),TSLP与IFN-γ呈显著负相关(r=-0.614,P＜0.01).结论:TSLP高表达可能会促进T细胞向Th2方向分化,参与鼻息肉的发生、发展,并加重鼻部Th2炎症反应.
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胸腺基质淋巴细胞生成素在变应性鼻炎模型小鼠鼻黏膜中的表达
目的:探讨胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)在变应性鼻炎模型小鼠鼻黏膜中的表达.方法:将20只6～8周BALB/c小鼠随机分为变应性鼻炎组和自然对照组,每组10只.以鸡卵清蛋白致敏建立变应性鼻炎模型.组织标本石蜡包埋,采用免疫组织化学方法和荧光PCR方法检测TSLP在小鼠鼻黏膜中的表达.结果:自然对照组鼻黏膜未见明显TSLP表达,变应性鼻炎组鼻黏膜可见明显TSLP表达.结论:TSLP在变应性鼻炎的鼻黏膜中表达.
关键词： 鼻炎 变应性 胸腺基质淋巴细胞生成素 鼻黏膜 -
胸腺基质淋巴细胞生成素表达与外周血调节性T细胞的相关性
目的:探讨人胸腺组织胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)表达水平与外周血CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞的相关性.方法:取23例先天性心脏病患者,分离外周血单个核细胞后表面染色及破膜胞内染色后,流式细胞仪检测CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg,同时取对应患者切除的胸腺组织,免疫组织化学法检测其TSLP的表达水平,统计分析其差异性,Logistic回归分析二者相关性.结果:23例先心病患者CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg/CD4+T细胞比率为(5.73±0.56)％,胸腺Hassall小体TSLP表达水平为(18.87±3.06)个,Logistic回归分析表明二者呈正线性相关性.结论:人外周血CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞的水平与胸腺组织TSLP的表达密切相关,外周血Treg细胞数量的增加可能依赖于更高水平TSLP的表达.
关键词： 胸腺组织 胸腺基质淋巴细胞生成素 调节性T细胞 免疫耐受 -
色胺酮抑制胸腺基质淋巴细胞生成素促肥大细胞增殖的药理机制*
目的：探讨色胺酮抑制由胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）促肥大细胞增殖的药理机制，为色胺酮治疗肥大细胞相关过敏性皮炎提供理论依据。方法在TSLP刺激人源肥大细胞系-1（HMC-1）细胞增殖的前提下，同步采用色胺酮处理增殖的细胞，观察对细胞增殖的影响和相关蛋白水平变化。噻唑蓝（MTT）比色法检测不同浓度色胺酮处理对细胞活力的影响；溴脱氧尿苷渗入试验和Ki67 mRNA水平检测不同处理组细胞增殖情况；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测鼠双微体基因2（2）、P53、Caspase-3、多聚ADP-核糖聚合酶（PARP）剪切蛋白水平变化；实时荧光定量聚合酶链反应检测白细胞介素7受体α（IL-7Ra）和TSLPR mRNA的含量。结果 MTT比色法结果表明，色胺酮无细胞毒性；溴脱氧尿苷渗入试验和Ki67 mRNA水平的检测均显示色胺酮抑制TSLP刺激的肥大细胞增殖；色胺酮抑制TSLP刺激的HMC-1中MDM2蛋白表达水平，蛋白灰度分析比较差异有统计学意义；色胺酮处理后，HMC-1细胞中，P53蛋白和凋亡标志蛋白Cas-pase-3、PARP剪切蛋白水平升高，且蛋白灰度分析比较差异有统计学意义；TSLP上游调控蛋白IL-7Ra和TSLPR mRNA水平在色胺酮的作用下受到抑制。结论色胺酮可抑制TSLP促肥大细胞增殖，对治疗肥大细胞相关过敏性皮炎有一定的潜力。
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Ag85 B 调节小鼠髓样树突状细胞的成熟和TSLP 介导下 TSLPR 和 OX40 L 的表达
目的：研究抗原85B（ Ag85B）体外诱导小鼠未成熟的髓样树突状细胞（ mDCs）的成熟以及对胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）介导下mDCs表达TSLP受体（TSLPR）和OX40L的影响，探究Ag85B抑制哮喘气道炎症的可能机制。方法：应用重组小鼠GM－CSF和IL－4体外诱生C57BL／6小鼠未成熟的mDCs，并运用免疫磁珠分离的方法纯化，采用光镜和扫描电镜、流式细胞术进行形态学观察和细胞表型鉴定；分别用0、50、100、200μg／L不同浓度的Ag85B或TSLP作用于纯化并鉴定后的mDCs，培养24 h，流式细胞术检测细胞表面分子CD80、CD86、TSL－PR和OX40L的表达，选取佳的Ag85B或TSLP处理浓度。随后将 mDCs随机分为空白对照组、Ag85B处理组、TSLP处理组和Ag85B＋TSLP处理组，培养24 h后检测mDCs的促炎表面分子TSLPR和OX40L的表达。结果：体外诱导培养7 d，倒置相差显微镜下可见细胞表面呈现不规则树突样突起，扫描电镜下见细胞类圆形，表面有少量皱褶和较少分叉的树突状突起，符合未成熟mDCs的形态学特点；纯化后的mDCs表达表面分子CD11c的细胞较表达共刺激分子CD80和CD86的细胞多，符合未成熟mDCs 的表型特征。与空白对照组比较，50～200μg／L的Ag85B处理组mDCs表达CD80和CD86的细胞比率显著增高（P＜0．05），表达TSLPR和OX40L的细胞比率无显著差异。与空白对照组相比较，50、100和200μg／L浓度的TSLP处理组的mDCs表达CD80和CD86的细胞比率均显著增加（ P＜0．05）；与空白对照组和50μg／L TSLP处理组相比较，100μg／L和200μg／L TSLP处理组的mDCs表达TSLPR和OX40L的细胞比率均显著升高（ P＜0．05）。选取200μg／L作为Ag85B和TSLP的优化作用浓度，结果发现Ag85B处理组和Ag85B＋TSLP处理组的mDCs表达TSLPR和OX40L的细胞比率较TSLP处理组均显著降低（ P＜0．05），与空白对照组比较差异不显著。结论：Ag85B可通过上调mDCs 表达共刺激分子CD80和CD86促进其成熟，同时下调TSLP介导的mDCs表达促炎表面分子TSLPR和OX40L，推测Ag85B可能通过TSLP介导的mDCs途径抑制气道炎症。
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溃疡性结肠炎患者结肠黏膜中胸腺基质淋巴细胞生成素的表达水平
目的 研究溃疡性结肠炎(UC)患者结肠黏膜中胸腺基质淋巴细胞生成素的表达水平及其与病变范围、病变程度间的关系,初步探讨UC的发病机制.方法 34例UC住院患者作为研究组,29例结肠息肉患者作为对照组,采用实时定量PCR法测定两组结肠黏膜组织中TSLP mRNA表达水平,比较血清CRP及血沉的变化.结果 研究组与对照组结肠黏膜TSLPmRNA表达水平及CRP、血沉存在显著差异(P＜ 0.01);UC患者中结肠黏膜TSLPmRNA表达水平、CRP以及血沉在不同病变程度及不同病变部位间存在显著性差异(P＜ 0.01);UC患者TSLPmRNA表达水平与CRP、血沉之间存在显著正相关(P＜o.o1),TSLPmRNA表达水平与病变程度间存在显著正相关(P＜0.01).结论 与正常人比较,UC患者结肠黏膜中TSLP表达水平明显升高,结肠黏膜TSLP表达水平与UC病变程度和范围存在显著相关性.
关键词： 溃疡性结肠炎 结肠黏膜 胸腺基质淋巴细胞生成素 病变程度 -
胸腺基质淋巴细胞生成素增强正常人支气管上皮细胞屏障功能
目的：探讨胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）对正常人支气管上皮细胞（16HBE）通透性的影响。方法体外培养16HBE，待细胞状态稳定后，用四唑盐（MTT）比色法检测TSLP（0.1、1、10、100 ng/ml）对16HBE细胞活力的影响。使用无血清1640培养基同步化12 h后，分别加入TSLP刺激液0.1 ng/ml和1ng/ml，分别刺激0、0.5、6、12、24 h，使用跨细胞电阻(TER)及异硫氰酸萤光素-右旋糖酐（FITC-DX）透过率检测不同时间及浓度下的TSLP刺激对16HBE单层细胞通透性的影响。Western blotting法检测TSLP对16HBE粘附连接蛋白E钙粘蛋白（E-cadherin）表达的影响。结果<1 ng/ml TSLP刺激对16HBE细胞活力无影响，10 ng/ml TSLP可显著促进细胞增殖（P<0.05）；浓度为0.1 ng/ml及1 ng/ml的两个TSLP处理组与对照组相比，TER值均显著升高（P<0.001），FITC-DX透过率均明显下降（P<0.05），本效应无明显浓度依赖；E-cadherin表达在0.1 ng/mlTSLP处理组较其余两组明显升高；TSLP处理不同时间后，处理24 h组的TER值及E-cadherin表达量较其余组显著升高（P<0.05），FITC-DX透过率在处理12 h组及24 h组均明显下降（P<0.05），其处理12 h组效果更明显。结论 TSLP可明显改善正常支气管上皮屏障功能。
关键词： 哮喘 胸腺基质淋巴细胞生成素 支气管上皮 屏障功能 -
聚肌胞对RSV感染哮喘加重小鼠气道分泌TSLP和炎症的影响
目的 探讨聚肌胞(poly I∶C)对呼吸道合胞病毒(RSV)感染哮喘加重小鼠气道分泌胸腺幕质淋巴细胞生成素(TSLP)和气道炎症的影响.方法 雌性BALB/c小鼠32只,随机分成4组:分别为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、鸡卵白蛋白(OVA)组、OVA/RSV组、OVA/RSV/polyI∶C组;应用OVA腹腔注射致敏、OVA气道雾化结合RSV滴鼻激发哮喘,聚肌胞1mg/kg肌肉注射;无创肺功能检测各组小鼠气道反应性;ELISA法检测小鼠血清IL-4、IL-5、IL-13、IFN-γ水平;ELISA法检测气管灌洗液(BALF)中TSLP含量;BALF行细胞分类计数;病理观察小鼠肺组织炎症反应,免疫组化观察小鼠气道上皮细胞TSLP表达水平.结果 无创肺功能检测显示聚肌胞抑制RSV感染哮喘加重小鼠气道反应性的增高,OVA/RSV/polyI∶C组小鼠Perth值明显低于OVA/RSV组(P<0.01);OVA/RSV/polyI∶C组小鼠血清IL-4、IL-5、IL-13和BALF中TSLP浓度均明显低于OVA/RSV组(P<0.05);OVA/RSV/poly I∶C组小鼠BALF细胞总数、嗜酸性粒细胞数及淋巴细胞数明显少于OVA/RSV组(P<0.05);病理观察显示聚肌胞减轻RSV感染哮喘小鼠气道炎症细胞浸润;免疫组化染色证实聚肌胞抑制RSV感染哮喘小鼠气道上皮细胞TSLP表达.结论 聚肌胞前期注射减少RSV感染哮喘加重小鼠气道上皮细胞表达TSLP,抑制哮喘小鼠气道炎症反应.
关键词： 聚肌胞 胸腺基质淋巴细胞生成素 呼吸道合胞病毒 哮喘 -
不同因素对RSV感染人支气管上皮细胞表达胸腺基质淋巴细胞生成素的影响
目的 探讨不同处理因素对呼吸道合胞病毒(RSV)感染人支气管上皮细胞16HBE表达胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)的影响.方法 用Hep-2细胞扩增病毒,并进行病毒毒力鉴定;试验分6组:对照组、RSV组、RSV/anti-TLR3组、RSV/IFN-γ组、RSV/IL-4组、RSV/地塞米松组,感染复数(MOI)为2的RSV病毒液吸附感染1h,不同处理因素分别加入培养基共培养:培养6h后用实时荧光定量RT-PCR检测各组细胞TSLP mRNA表达水平变化,培养24 h后应用Western blotting检测各组细胞TSLP蛋白表达水平变化.结果 经Hep-2细胞培养扩增获得足量RSV病毒;RSV感染16HBE细胞6h,可使细胞TSLP mRNA表达水平增高(是对照组的1.63±0.08倍)(P<0.001);加入anti-TLR3阻断TLR3受体,细胞TSLP mRNA表达量下降(P＝0.034);加入重组人IFN-γ,细胞TSLP mRNA表达水平下降(P<0.001);加入重组人IL-4,TSLP mRNA表达水平升高(P=0.025);加入地塞米松,细胞TSLP mRNA表达明显下降(P<0.001).RSV感染后细胞TSLP蛋白表达量升高,约为对照组的1.9倍(P<0.001),TLR3抗体阻断TLR3受体可使TSLP表达降 低,但与RSV感染组比较无统计学意义(P=0.114),IFN-γ降低TSLP表达升高(P=0.020),IL-4协同RSV感染引起的TSLP表达升高(P=0.014),地塞米松显著抑制RSV感染细胞TSLP表达(P<0.001).结论 RSV感染引起人支气管上皮细胞16HBE合成TSIP增加;IFN-γ、antl-TLR3和地塞米松能抑制RSV感染引起的16HBE细胞TSLP合成,而IL-4能协同RSV感染促进TSLP合成.
