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薏苡仁醇溶蛋白水解工艺优化及其ACE抑制活性的研究
目的：对薏苡仁中含量丰富的醇溶蛋白水解条件进行优化，并对其水解产物进行血管紧张素转化酶（ACE）体外活性评价。方法：利用胃蛋白酶水解薏苡仁醇溶蛋白，邻苯二甲醛法测定水解度，通过正交实验优化醇溶蛋白酶解条件。酶解液超滤（截留分子量3 kD）冻干得到小分子量多肽，采用高效液相色谱法对其ACE抑制活性进行测定。结果：薏苡仁醇溶蛋白酶解的佳条件为：底物浓度1%，酶与底物浓度比1：5，水解时间48 h；酶解物在0.1 mg·mL-1浓度下体外ACE抑制率为83.40%依0.93%。结论：醇溶蛋白水解产物表现出较强的体外ACE抑制作用，为薏苡仁降压作用的进一步研究及功能食品的开发提供了理论支持。
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小麦依赖-运动诱发的严重过敏反应:15例病例分析
目的 对小麦依赖-运动诱发的严重过敏反应(wheat-dependant exercise-induced anaphylaxis,WDEIA)的临床特点进行分析和总结.方法 对2004年3月至2007年12月在北京协和医院诊断为WDEIA 15例患者的临床表现和发病特点进行总结,检测小麦、面筋、玉米、燕麦、大麦、荞麦、鸡蛋、牛奶等食物的特异性IgE水平,在部分病例进行小麦水溶蛋白、醇溶蛋白皮肤点刺试验;同时进行常见吸入变应原皮内试验和血清特异性IgE检查.结果 运动后发生严重过敏反应患者15例,所有患者发病前0.5～6 h均进食小麦类食物,确诊前平均发生低血压休克3.2次.15例患者中13例(86.7%)血清小麦IgE(f4)阳性,15例(100%)面筋IgE(f79)阳性.对其中5例患者进行小麦皮肤点刺试验,结果均为阳性.确诊前患者对WDEIA认知度较低,确诊后所有患者遵医嘱严格避免运动前进食小麦类食物,均未再发生严莺过敏反应.结论 WDEIA是一种诊断困难,在临床上被低估的严重过敏性疾病,但结合病史特点、血清IgE检测和皮肤点刺试验,仍町以被临床医生所认识.
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薏苡仁醇溶蛋白源小分子肽生物学活性研究
目的:探究体外酶解条件下,薏苡仁醇溶蛋白源小分子肽(Coixprolamin peptide,CPP)在降压及免疫方面的生物活性.方法:模拟胃肠环境水解薏苡仁醇溶蛋白,超滤法获得小分子肽,测定其体内外降压作用;MTT法评价其对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响.结果:终浓度0.1 mg/mL时,醇溶蛋白胃蛋白酶4h水解物对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制率显著高于其他混合酶水解产物,延长水解时间至48 h,产物ACE抑制率及蛋白水解度均显著提高.单次灌胃(125～500 mg/kg) CPP,可显著降低SHR血压. 5～160 μg/mLCPP可显著促进正常小鼠脾淋巴细胞体外增殖.结论:薏苡仁醇溶蛋白经模拟胃肠环境水解后可产生具有显著体内外降压作用的CPP,且CPP可促进小鼠脾脏淋巴细胞增殖,影响机体免疫功能.
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麦芽蛋白质组成分析及其酶解物ACE抑制活性
目的 分析麦芽蛋白质组成,并研究其清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白及谷蛋白4类组分酶解产物的血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性.方法 采用顺序抽提法依次提取清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白及谷蛋白4类组分,并采用凯氏定氮法及SDS-PAGE电泳进行定量和定性分析;各蛋白组分用胃蛋白酶水解,经超滤(截留分子量3 kD)后收集滤液,获得小分子肽组分,RP-HPLC法进行ACE抑制活性评价.结果 麦芽总蛋白含有量为10.27％,其中清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白及谷蛋白分别占总蛋白含有量的24.70％、9.25％、20.09％和33.30％.清蛋白酶解产物(小于等于3 kD)对ACE具有高的抑制活性,在质量浓度0.01 mg/mL下的抑制率为33.28％.相反,谷蛋白酶解产物(小于等于3 kD)对ACE具有一定的促进活性,同一质量浓度下的抑制率为-10.50％.结论 麦芽清蛋白含有量较为丰富,其多肽组分具有明确的体外ACE抑制活性,可进一步开发降压活性成分.
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醇溶蛋白在人工胃肠液中降解性及其对苦参碱释药行为的影响
目的 对醇溶蛋白在人工胃肠液中的降解性,以及其作为缓控释材料对苦参碱的缓释行为进行研究.方法 以醇溶蛋白空白片在胃肠液中的质量减少率、降解率考察其在人工胃肠液中的降解性.用紫外分光光度法测定苦参碱缓释片在人工肠液中体外释放度.结果 醇溶蛋白在人工胃肠液中随着时间的延长质量减少率和降解率也随之增大,且质量减少率滞后于降解率.苦参碱缓释片在人工肠液体外24 h累计释放度为93.15%,体外释药模型拟合符合Higuchi方程.结论 醇溶蛋白在人工胃肠液具有降解性,醇溶蛋白对苦参碱有很好的缓释效果.
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玉米蛋白粉中醇溶蛋白超声萃取工艺改进
目的:探讨用超声波技术从玉米蛋白粉中提取高纯度、高收率的醇溶蛋白的工艺路线.方法:采用正交试验的方法进行优选,用凯氏定氮法测定醇溶蛋白的含量.结果与结论:佳工艺条件为提取温度为60℃,超声时间为1 h,乙醇体积分数为70%,pH值为9.本工艺路线制备醇溶蛋白的收率可达27.94%,纯度达94.68%,是一条经济可行的工艺路线.
