海兔真菌菌株中裂-大环球内酯E绝对构型的测定

利用稻瘟霉分生孢子筛选海兔抗有丝分裂活性组分

目的:利用稻瘟霉生物活性成分跟踪筛选模型,筛选海兔中抗有丝分裂活性成分.方法:通过观察样本引起稻瘟霉的分生:孢子或菌丝形态生长异常或生长抑制的情况,跟踪筛选活性组分,并与体外肿瘤细胞毒试验对照.结果:从海兔乙醇粗提物中筛选得到2个具有细胞毒活性的组分,其体外对P388和HL-60的IC50分别为23.4,18.6,19.4,12.5μg.mL-1.结论:本模型首次用于海洋天然活性化合物的追踪分离,方便、快捷、成本低,显示了广阔的应用前景.

中药海粉基原动物的抗肿瘤活性成分研究进展

对中药海粉的基原动物(海兔科动物)的抗肿瘤活性成分的结构和活性进行了系统的归纳.结果表明,分布于中国海区的海兔科6属23种动物中,已有11种有关于化学成分的报道,从其中7种动物中已发现85个以上的抗肿瘤活性成分.

去除感觉神经元胞体促进离体培养的海兔感觉神经突触形成

目的 研究去除离体培养的海兔感觉神经元(SN)与运动神经元(MN,L7)互相接触形成的突触终末数量的变化.方法 体外培养无脊椎海生动物海兔(Aplysia)sN和MN,L7,两者互相接触形成突触联系(sN/L7),培养到第4d时,将部分感觉神经细胞的体部去除(SN/L7,-CB),其中一部分应用5-HT处理,另一部分应用5-HT+茴香霉素(Anisomysin)处理,将仍保留细胞体部(SN/L7,+CB)的离体培养突触作为对照组,24h后,利用免疫组织化学方法观察突触终末数目的变化.结果 与对照组相比,应用5-HT后24h,5-HT处理组突触终末的数目显著增加(P＜0.01);而5-HT+茴香霉素组的突触终末数目却没有明显改变.结论 在长时程易化条件下,去除感觉神经细胞体可能使突触终末的数量增加,而这种感觉神经突触可塑性的变化可以被蛋白质合成抑制剂茴香霉素所抵消.

去除感觉神经细胞体对突触长时程易化效应的影响

目的去除感觉神经细胞的体部,研究离体培养突触长时程易化效应的变化.方法体外培养多组由无脊椎海生动物海兔(Aplysia)的感觉神经元(SN)和运动神经元(L7,MN)互相接触而形成的突触模型,培养到第4 d时,将部分感觉神经细胞体去除(SN/L7,-CB),其余仍保留细胞体部(SN/L7,+CB),应用5-HT处理上述突触模型,之后将处理后的模型继续培养,在此后24 h和48 h,分别检测去除和保留感觉神经细胞体突触模型的长时程易化(LTF)效应.结果在应用5-HT后24 h,去除胞体组突触的LTF明显高于保留胞体组;而在应用5-HT后48 h,去除细胞体组突触的LTF呈明显下降,与保留细胞体组无明显差异;应用5-HT后24 h和48 h保留感觉神经细胞体组突触的LTF水平无明显变化.结论去除感觉神经细胞体在较短的时程内(24 h)可以提高突触LTF表达水平,而这种高水平的LTF无法长时间维持(48 h),保留感觉神经细胞体突触的LTF在一定时程内(48 h)可以在一定水平上稳定表达.

一种提高海兔神经节成像清晰度的清晰化技术

无论在脊椎动物还是无脊椎动物中,提高神经环路的成像效果对于神经环路的功能研究都是必不可少的.因此,一种新的基于鼠脑的成像技术——清晰化技术(CLARITY),正吸引越来越多的研究者将它运用到其它物种中.这里我们将改进过的清晰化技术应用于无脊椎动物海兔的神经节的清晰化成像中.改进之处包括为海兔神经节修改了水凝胶溶液配方并设计了一个专用的容器.我们使用预先经过免疫组化处理的神经节,再使用改进的清晰化技术.我们采用荧光和共聚焦成像检查这些技术的相容性以及成像效果的改善程度.结果显示,这种改进过的清晰化技术确实可以使样本更清晰,并且进一步提高了海兔神经节中神经肽CP2免疫阳性神经元的清晰度.例如,这种方法提高了神经节深处的一些弱免疫阳性神经元的可视化效果.这种改良方法使得清晰化技术不仅更适合海兔整体神经节的结构成像,也会对其它的无脊椎动物神经节的成像起到帮助作用.

匹诺塞林对体外共培养海兔SN/L7神经元电生理活动的作用

目的 研究匹诺塞林(PNCB)对海兔神经元共培养体系(SN/L7)的电生理效应,探讨可能的作用机制.方法 体外共培养海兔(aplysia)的感觉神经元(SN)和运动神经元(L7),使其互相接触形成突触连接.细胞培养至d 5,给予不同浓度的PNCB刺激,考察药物对SN/L7兴奋性突触后电位(EPSP)的影响,随后撤去药物,观察EPSP的恢复情况.另取细胞,在PNCB孵育后加入0.005 mmol·L-15-羟色胺(5-HT),观察SN/L7对5-HT的反应性的变化.结果 PNCB作用5 min,使SN/L7的EPSP幅值降低.药物浓度低于0.1 mmol·L-1时,作用强度与药物剂量呈负线性关系(r>0.995),在0.1~0.4 mmol·L-1的浓度范围内,作用强度与药物剂量呈正线性关系(r>0.998);撤去药物后,SN/L7的 EPSP幅值可恢复至初始值.PNCB使SN/L7对5-HT的反应性消失,撤去药物后,该反应性得以恢复.结论 PNCB可逆地抑制体外共培养的海兔SN/L7神经元突触的兴奋性传导,并可逆地抑制SN/L7对5-HT的反应性.这一效应可能与突触后膜的谷氨酸受体有关.