首页 > 文献资料
-
偏钒酸钠降低糖尿病小鼠血糖及其对葡萄糖磷酸化的影响
目的通过研究偏钒酸钠对小鼠的血糖及葡萄糖磷酸化关键酶的影响,探讨偏钒酸钠降血糖作用的可能机制.方法将糖尿病小鼠和正常对照小鼠,随机分为口服偏钒酸钠组和非口服偏钒酸钠组,分别饮用200 mg/L偏钒酸钠溶液和80 mmol/L的NaGl对照溶液,持续5周.在实验第0至5周的每周末,对各组小鼠的血糖、肝脏葡萄糖激酶、肌肉己糖激酶以及胰岛素水平进行检测.结果在给予偏钒酸钠前,糖尿病小鼠血糖水平明显高于正常对照组,服药1周后,血糖值即由(18.77±1.28)mmol/L下降至(8.94±0.94)mmol/L,接近正常水平;其肝脏葡萄糖激酶和肌肉己糖激酶的活性则显著升高,分别由(1.29±0.64)mIU@min-1@mg-1蛋白质和(1.93±0.50)mIU@min-1@mg-1蛋白质上升至(15.36±1.57)mIU@min-1@mg-1蛋白质和(18.62±1.71)mIU@min-1@mg-1蛋白质(P＜0.01);而在服药前后糖尿病小鼠的胰岛素水平差异均无显著性.上述作用在小鼠服药期间始终存在.相关分析显示,糖尿病小鼠的血糖水平与葡萄糖激酶和己糖激酶的活性呈显著的负相关性.结论偏钒酸钠的降血糖作用并不依赖于体内胰岛素水平的增加;改善糖尿病小鼠体内不良的葡萄糖磷酸化过程,可能是偏钒酸钠降血糖作用的机制之一.
-
葡萄糖激酶基因6个标签单核苷酸多态性位点与2型糖尿病的相关性研究
目的 探讨葡萄糖激酶(glucokinase,GCK)基因6个标签单核苷酸多态性(tag singlenucleotide polymorphisms,tagSNPs)位点rs2971672、rs 12702070、rs2268569、rs2268573、rs2300587、rs1476891与2型糖尿病(type 2 diabetes,T2D)的关系.方法 病例对照研究.选取2013年8月至2014年12月在中山大学附属中山医院住院的中国南方汉族T2D患者499例(T2D组),同时选择在该院康体保健中心体检的汉族健康人499名作为对照组,对GCK基因的6个tagSNPs位点采用改良多重高温连接酶检测反应技术(improved multiple ligase detection reaction,iMLDR)进行基因分型,应用Hardy-Weinberg平衡规律检测样本代表性,采用x2检验、logistic回归分析比较T2D组和对照组基因型和等位基因频率的差异,并在加性、显性和隐性3种遗传模型下对各SNP位点进行相关性分析.应用Haploview软件构建GCK基因6个tagSNPs位点的单体型,分析是否存在连锁不平衡(linkage disequilibrium,LD)及不同的GCK单体型与T2D易感性的关系.结果 rs2268573、rs2300587、rs2268569、rs1476891的基因型(x2值分别为3.361、2.076、0.582、0.918,P均＞0.05)和等位基因频率(x2值分别为0.222、1.980、0.590、0.851,P均＞0.05)在T2D组和对照组之间差异均无统计学意义.rs2971672和rs 12702070的基因型(x2值分别为6.896、7.990,P均＜0.01)和等位基因分布(x2值分别为4.708、5.979,P＜0.05、P＜0.01)在D2M组和对照组之间差异有统计学意义.在显性遗传模式下(rs2971672:OR=1.74,95％ CI=1.17 ～2.57,P＜0.01;rs12702070:OR=1.54,95％ CI=1.17～2.04,P＜0.01)以及在加性遗传模式下(rs2971672:OR=1.51,95％CI=1.06～2.14,P＜0.05;rs12702070:OR=1.26,95％ CI=1.04 ～ 1.52,P＜0.05)2个SNP位点的基因型分布在D2M组和对照组之间差异有统计学意义.GCK基因6个位点中的5个位点有两个LD域,rs2971672和rs2300587共存在TC、TA、CA三种主要单体型,单体型TA和CA均降低个体患T2D的风险,OR值分别为0.81(95％ CI:0.66～1.00,P ＜0.05)和0.78 (95％ CI:0.62 ～0.98,P＜0.05).rs2268569、rs12702070和rs 1476891共存在TAG、TGG、TAT、CGG四种主要单体型,均与个体患T2D的风险无相关性(x2=2.718,P＞0.05).结论 在汉族人群中,GCK基因区域的rs2971672和rs12702070位点与糖尿病遗传易感性密切相关,而rs2268573、rs2300587、rs2268569、rs 1476891位点与糖尿病遗传易感性无明确相关性.rs2971672和rs2300587 LD域单体型TA和CA均降低个体患T2D的风险;rs2268569、rs 12702070、rs1476891 LD域四种主要单体型均与个体患T2D的风险无相关性.
-
葡萄糖激酶基因E339K突变的功能学研究
目的 探讨葡萄糖激酶(GCK)基因E339K突变引起青少年的成年起病型糖尿病2型(MODY2)的分子机制.方法 MODY2家系成员进行葡萄糖耐量试验,测定空腹及负荷后2h血糖、糖化血红蛋白、空腹胰岛素.PCR扩增GCK基因并直接测序.构建E339K突变质粒.表达并纯化野生型和突变型GCK蛋白.酶偶联分析法进行功能学测定.结果 与非突变成员相比,突变者空腹、负荷后2 h血糖、糖化血红蛋白更高;空腹胰岛素、胰岛素分泌指数明显降低;胰岛素抵抗指数无显著差异.突变导致GCK蛋白产量降低[(12.7±1.72)mg/L比(16.2±2.65)mg/L,P＜0.01];当ATP为饱和浓度时酶促反应速度达到1/2大反应速度时的葡萄糖浓度(S0.5)[(13.96±1.89)mmol/L比(5.92±0.99)mmol/L,P＜0.001]和当葡萄糖为饱和浓度时酶促反应速度达到1/2大反应速度时的ATP浓度(ATP-Km)显著升高[(3.27±1.14)mmol/L比(0.30±0.09)mmol/L,P＜0.001];GCK对葡萄糖的催化常数显著下降[(1.62±0.35)/s比(25.18±2.10)/s,P＜0.001];热稳定性下降,表现为在相对更低的孵育温度下或同一温度相对更短的时间内活性丧失.结论 GCK基因E339K突变导致的蛋白表达下降、对葡萄糖和ATP的亲和力下降以及热稳定性下降是造成胰岛β细胞分泌胰岛素减少进而发生MODY2的可能分子机制.
-
葡萄糖激酶mRNA、葡萄糖转运蛋白2在慢性乙型重型肝炎患者糖代谢异常中的作用
目的 通过研究葡萄糖激酶(GCK) mRNA、葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)在慢性乙型重型肝炎(慢重肝)患者肝组织中的表达来初步探讨其在慢重肝糖代谢异常中的作用.方法 运用RT-PCR法测定10例慢重肝患者和10例肝硬化(CTP评分A级)患者肝脏GCK mRNA的表达；免疫组织化学方法检测上述10例慢重肝患者及10例正常对照肝组织GLUT2表达.两组间均数比较采用t检验,相关性采用Pearson相关分析.结果 慢重肝肝组织GCK mRNA表达低于肝硬化组,(1.13±0.11)vs(1.44 ±0.14),P＜0.05.慢重肝肝组织GCK mRNA水平与碳水化合物氧化率呈正相关(r=0.845,P＜0.01),与空腹血糖无明显相关性(r=0.03,P ＞0.05).慢重肝肝组织GLUT2表达减少,且分布在假小叶结节周围细胞.结论 肝脏GCK mRNA水平与糖氧化利用密切相关,GCK mRNA与GLUT2表达减少是慢重肝糖代谢障碍发生的机制之一.
-
高度稀释的葡萄糖溶液提高含亚砷酸盐培养基中大肠埃希氏杆菌的葡萄糖摄取
目的:高度稀释的顺势疗法药物对活体系统的作用一直被质疑.因此,本研究检测依据顺势医学理论而高度稀释的葡萄糖溶液对暴露于亚砷酸盐的大肠埃希氏杆菌的作用.方法:大肠埃希氏杆菌在Luria-Bertani培养基中培养至对数期后分组.分别加入1％或3％的葡萄糖溶液、葡萄糖30C(在70％乙醇中稀释1060倍)、1 mmol/L或2 mmol/L的亚砷酸钠、1 mmol/L或2 mmol/L的亚砷酸钠加葡萄糖30C、1 mmol/L或2 mmol/L的亚砷酸钠加乙醇30C（安慰剂）.分析用药后45 min及90 min大肠埃希氏杆菌的葡萄糖摄取、己糖激酶及葡糖激酶活性、细胞膜电位、细胞内三磷酸腺苷含量以及葡萄糖通透酶基因的表达情况,并测定细胞内及细胞外（培养基内）亚砷酸盐的浓度.结果:暴露于亚砷酸盐的大肠埃希氏杆菌的葡萄糖摄取量增加,己糖激酶及葡糖激酶活性、细胞内三磷酸腺苷含量及细胞膜电位降低,葡萄糖通透酶基因的表达增加.在加入1％或3％葡萄糖或高度稀释的葡萄糖30C的培养基内,大肠埃希氏杆菌的葡萄糖摄取量进一步增加,而在加入乙醇30C（安慰剂）的培养基内,大肠埃希氏杆菌的葡萄糖摄取量没有明显增加.结论:本研究的结果证实了高度稀释的葡萄糖溶液对于真正的葡萄糖溶液的模仿作用.这种顺势疗法理论下高度稀释的葡萄糖溶液能够调节大肠埃希氏杆菌己糖激酶和葡糖激酶的表达以及葡萄糖通透酶基因的表达,证实了顺势疗法中高度稀释的药物的有效性.
-
葡萄糖激酶激动剂对胰岛α细胞胰升糖素分泌的影响
目的 探讨葡萄糖激酶激动剂(GKA)对胰岛α细胞胰升糖素分泌的影响. 方法 (1)αTC1-9细胞株采用0,0.1及1 μmol/L的GKA处理,原代胰岛细胞用0,0.5及1 μmol/L的GKA处理,时间均为1 h,检测低糖刺激的细胞胰升糖素的分泌变化.(2)灌胃法给予SD大鼠0,3及30 mg/kg的GKA处理,分别观察0,15,30,60及120 min时SD大鼠体内血糖、血浆胰升糖素及胰岛素的变化. 结果 (1)αTC1-9细胞株经1 μmol/L的GKA作用1 h后,可显著降低低糖刺激的胰升糖素分泌,比对照组下降了45.16％.(2)原代胰岛细胞经0.5及1 μmol/L的GKA作用1 h后,可显著降低低糖刺激的胰升糖素分泌,分别比对照组下降了68.7％和84.3％.(3)GKA可剂量依赖性地降低SD大鼠的血糖水平,并可刺激大鼠体内胰岛素分泌;3及30 mg/kg的GKA可显著抑制SD大鼠体内的胰升糖素水平. 结论 GKA可抑制胰岛α细胞胰升糖素的分泌,从而改善糖代谢.
