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医用胶原膜浸提液对CHL细胞染色体畸变作用的研究
目的:研究医用胶原膜用于医学领域的遗传毒性.方法:在代谢活化和非代谢活化测试系统下对胶原膜浸提液进行中国仓鼠肺(CHL)细胞的染色体畸变试验.结果:胶原膜浸提液终浓度在31.25～250μl/ml时,观察24h和48h收集的染色体,畸变率均在正常范围(<5%).直接诱变剂丝裂霉素C(0.20μg/ml),在非代谢活化时染色体畸变率为31%～40%,间接诱变剂环磷酰胺(60μg/ml)在S9代谢活化时染色体畸变率为37%～46%,均使染色体畸变率增加.结论:在本实验条件下医用胶原膜浸提液未诱发CHL细胞染色体畸变率增加.
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司氟沙星CHL细胞体外染色体畸变试验
目的:检测司氟沙星对CHL细胞染色体致畸变作用.方法:用体外方法检测司氟沙星在 23.63～189.00μg·mL-1浓度范围内,代谢活化组(含S9mix)及非活化组(不含S9mix)CHL细胞的染色体畸变率.结果:司氟沙星的代谢活化组(含S9mix)及非活化组(不含S9mix)的染色体畸变率均低于5%.结论:司氟沙星对CHL细胞染色体畸变实验结果为阴性.
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地红霉素对中国仓鼠肺细胞体外染色体畸变的影响
目的:检测地红霉素对中国仓鼠肺细胞(CHL细胞)染色体致畸变的影响.方法:用体外方法检测地红霉素在12.50～50.0μg·mL-1浓度范围内,代谢活化组(含S9mix)及非活化组(不含S9mix) CHL细胞的染色体畸变率.结果:地红霉素的代谢活化组(含S9mix)及非活化组(不含S9mix)的染色体畸变率均低于3%.结论:地红霉素对CHL细胞染色体畸变实验结果为阴性.
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人参皂苷Rd对中国仓鼠肺细胞染色体畸变作用
目的 研究人参皂苷Rd致中国仓鼠肺细胞(Chinese hamster lung cells,CHL)染色体畸变的作用.方法 细胞计数法测定人参皂苷Rd对CHL细胞的半数抑制浓度(IC50),根据IC50设立不同剂量组,进行染色体畸变试验,分别观察人参皂苷Rd染毒6、24h及加S9后染毒6h CHL细胞染色体的数目及结构变化,进行染色体畸变分析.结果 人参皂苷Rd染毒6、24h及加S.后染毒6h CHL细胞染色体畸变为阴性.结论 在本试验条件下,人参皂苷Rd不能引起CHL细胞染色体产生畸变.
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人参皂苷Rb3对中国仓鼠肺细胞染色体畸变作用
目的 研究人参皂苷Rb3对中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变作用.方法 测定人参皂苷Rb3对CHL细胞的半数抑制浓度(IC50),根据IC50设立不同剂量组,进行染色体畸变试验,分别观察人参皂苷Rb3接触CHL细胞6h、24 h及加S9后6h染色体的畸变情况,根据标准进行结果判定.结果 染毒6h、24 h及加S9后染毒6h染色体畸变为阴性.结论 人参皂苷Rb3不能引起CHL细胞染色体产生畸变作用.
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高纯度大豆卵磷脂对中国仓鼠肺细胞染色体畸变作用
目的 研究高纯度大豆卵磷脂对中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变作用.方法 测定高纯度大豆卵磷脂对CHL细胞的半数抑制浓度(IC50),根据IC50设立不同剂量组,进行正式试验,分别观察高纯度大豆卵磷脂接触CHL 6 h,24 h及加S9后6 h染色体的畸变情况,根据标准进行结果判定.结果 染毒6 h,24 h及加S9后染毒6 h染色体畸变为阴性.结论 高纯度大豆卵磷脂不能引起CHL细胞染色体产生畸变作用.
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体外染色体畸变试验染色体标本制备的质量控制
目的 探讨体外染色体畸变试验染色体制备过程的影响因素及质量控制,总结分析体外染色体标本成功制备方法及要点.方法 选用中国仓鼠肺细胞(CHL)进行细胞培养及染色体制备,阳性诱变剂选用丝裂霉素和环磷酰胺,经过常规低渗、固定、滴片,后镜检阅片.结果 CHL染色体畸变试验,丝裂霉素、环磷酰胺处理后染色体畸变率显著增高,均>20%;而阴性对照组在有和无代谢活化系统两种测试条件下,染色体结构畸变率均小于5%.所制备的染色体分散良好,长短适中,成功率较高.结论 影响体外染色体畸变试验细胞染色体标本制备的因素很多,每一个步骤都很关键,必须严格按照操作规程,掌握每一个步骤的原理,细致、耐心、科学地操作,才能制备出好的标本.
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二氧化硫体内衍生物诱发中国仓鼠肺细胞微核的效应
目的为了解二氧化硫(SO2)对哺乳类细胞的遗传毒理效应.方法以SO2在体内的衍生物——亚硫酸氢钠和亚硫酸钠处理培养的中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL),并对其诱发微核(MN)形成的作用进行了分析.结果对照盐水组和l、2、5、10 mmol/L的SO2衍生物处理组CHL的MN率(‰)分别为8.17、9.83、10.33、12.83、13.33及14.17,从2 mmol/L的SO2衍生物处理组开始与对照组差异有显著性,且呈剂量依赖关系.无论是否有S9混合物存在,SO2衍生物均可诱发CHL的MN率显著增高,且SO2衍生物处理细胞时间愈长,引起细胞遗传损伤所需的低浓度就愈低.结论SO2是不需要体内酶促转化的直接的细胞染色体断裂剂和基因毒性因子.同时也启示,长期接触环境低浓度SO2污染,有引起人体细胞遗传物质损伤的潜在危险.
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煤焦沥青对中国仓鼠肺细胞周期和凋亡的影响
目的 探讨煤焦沥青对中国仓鼠肺(CHL)细胞c-jun、fos和表皮生长因子受体(EGFR) mRNA表达和细胞周期和凋亡的影响.方法 常规培养CHL细胞,常规消化细胞后,将细胞接种于6孑孔板中,待其融合度达到40％左右时,加入含有煤焦沥青的培养液,调整浓度至0、20、40 mg/L,分别于作用24、72 h后提取细胞总RNA,采用半定量RT-PCR技术检测c-jun、fos和EGFR mRNA的表达水平;将等量的细胞接种在50 ml的培养瓶中,待细胞融合度达到40％左右时,加入含煤焦沥青的培养液,调整浓度为0、20、40 mg/L,每组设置6个重复样品,分别加入谷胱甘肽(GSH)和N-乙酰半胱氨酸(NAC),调整浓度至0、2.5、10 mmol/L,作用120 h后收集细胞,采用流式细胞术检测细胞凋亡率和S期细胞的构成比.结果 在20 mg/L煤焦沥青作用24 h后,CHL细胞的fos、c-jun和EGFR mRNA的表达水平均高于0 mg/L剂量组,差异均有统计学意义(P＜0.05);作用72 h后c-jun和EGFR的表达水平显著高于0 mg/L剂量组(P＜0.05).在40 mg/L剂量组作用24和72 h后,fos、c-jun和EGFR mRNA的表达水平均高于0 mg/L剂量组,差异均有统计学意义(P＜0.05).煤焦沥青作用后,细胞凋亡率降低,在GSH作用下,凋亡率有所增加,NAC作用下的凋亡率增加的幅度更加明显,但以上差异均无统计学意义(P＞0.05);20 mg/L的煤焦沥青作用120 h后,S期的细胞构成显著增加(P＜0.05);GSH和NAC可以显著抑制S期的细胞构成改变,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 煤焦沥青可以诱导fos、c-jun和EGFR mRNA的表达水平和S细胞周期的构成增加、抑制细胞凋亡率,而GSH和NAC可以抑制这种诱导效应.
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邻氨基苯甲醚对中国仓鼠肺细胞毒性作用的实验研究
目的观察邻氨基苯甲醚对中国仓鼠肺细胞(Chinese hamster lung cells,CHL)的毒性作用.方法噻唑蓝(MTT)比色法.结果不同浓度的邻氨基苯甲醚(6.86,13.71,27.43,54.85,109.70 μg/ml 培养液)处理一定时间后,细胞存活率均下降,呈现出时间-剂量-反应关系,同时显微镜观察,细胞形态发生改变.结论邻氨基苯甲醚可以抑制CHL细胞生长,降低线粒体代谢活性.
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甲醛、三氯乙烯、三氯化铝的细胞联合毒作用
目的研究甲醛、三氯乙烯和三氯化铝的联合毒作用类型.方法噻唑蓝法(MTT)测定3种物质各自的半数生长抑制浓度(IC50)及混合物(甲醛、三氯化铝、三氯乙烯)的IC50,根据Finney数学模型和Logistic回归方法判断联合作用类型.结果甲醛、三氯乙烯、三氯化铝及其混合物质的IC50分别为0.0226,0.368,0.589和0.124 mg/ml,据Finney法求得Q值为1.08,Logisitc回归模型参数β4差异无统计学意义.结论甲醛、三氯化铝、三氯乙烯(6:11:33)混合染毒,对中国仓鼠肺细胞的联合毒性表现为相加作用.
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彗星试验检测雄黄对中国仓鼠肺细胞DNA的损伤作用
目的 检测含砷中药雄黄对中国仓鼠肺细胞(CHL细胞)DNA的损伤作用.方法 测定雄黄对CHL细胞的半数抑制浓度(IC50),根据IC50设立不同剂鼍组,进行彗星试验,观察并比较不同组别不同损伤等级细胞数的差异.结果 给药干预后,各剂量组及阳性对照组DNA损伤细胞数明显增加,且各剂量组随着给药浓度的增加,Ⅲ、Ⅳ级(中、重度)损伤细胞数增多.结论 中药雄黄可引起CHL细胞DNA损伤.
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一种宫内节育器的染色体畸变试验研究
目的 检测一种宫内节育器的体外细胞的染色体畸变作为遗传毒性评价的一部分.方法 在加和不加S9活化系统条件下,试验组用三种不同浓度的节育器浸提液处理CHL细胞20h,对照组分别加入阴性、阳性进行交换,各组置37℃培养箱中培养.24h后采集细胞并分析中期细胞染色体畸变情况,计算染色体畸变率.结果 在4g/20mL的浓度下受试物对细胞有明显的细胞毒性,其稀释浸提液的畸变率与阴性对照相比,在统计学上无显著性差异(P＞0.05).结论 在该试验条件下,受试物稀释浸提液未诱发CHL细胞染色体畸变.
关键词： 体外细胞染色体畸变试验 中国仓鼠肺细胞 遗传毒性 -
顺爽滋养去屑型洗发露CHL细胞体外染色体畸变试验
目的:检测顺爽滋养去屑型洗发露对CHL细胞染色体致畸变作用.方法:用体外方法检测顺爽洗发露在0.5 mg/ml、0.25 mg/ml、0.125 mg/ml时,代谢活化组(含S9mix)及非活化组(不含S9mix)CHL细胞的染色体畸变率.结果:顺爽洗发露代谢活化组(含S9mix)及非活化组(不含S9mix)的染色体畸变率均低于5％.结论:在本实验条件下顺爽滋养去屑型洗发露未诱发CHL细胞染色体畸变率增加.
关键词： 顺爽滋养去屑型洗发露 中国仓鼠肺细胞 染色体畸变 -
1-溴丙烷致中国仓鼠肺细胞hprt基因位点突变作用研究
目的 探讨1-溴丙烷(1-BP)对中国仓鼠肺细胞(V79)次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hprt)基因位点的致突变作用.方法 将V79分为大鼠肝微粒体混合功能氧化酶(S9)代谢活化系和非S9代谢活化系,每系各设3.375、6.750、13.500 g/L3个不同质量浓度的1-BP实验组;另设1.000 g/L甲磺酸乙酯阳性对照组(非S9代谢活化系)、0.001g/L甲基硝基亚硝基胍阳性对照组(S9代谢活化系)和溶剂对照组,溶剂对照组加等体积的无血清培养基.染毒时间为6h.应用细胞克隆检测法检测V79 hprt基因位点的突变率.结果 非S9代谢活化系,1-BP实验组突变率与溶剂对照组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05)；S9代谢活化系,3.375、6.750 g/L 1-BP实验组突变率均高于溶剂对照组,差异均有统计学意义(P＜0.01),但不存在剂量-反应关系.结论 1-BP经代谢活化后可能对V79 hprt基因位点具有致突变作用.
关键词： 1-溴丙烷 中国仓鼠肺细胞 HPRT基因位点突变 -
育发剂对中国仓鼠肺细胞活力和染色体畸变的影响研究
目的 评估2种育发剂对中国仓鼠肺细胞(CHL)细胞活力的影响及其诱导染色体畸变的能力.方法 在非代谢活化和代谢活化情况下,采用MTT法和体外哺乳动物细胞染色体畸变试验检测2种(编号A和B)育发剂对CHL细胞活力和染色体畸变率的影响.结果 A育发香波在不含S9的系统中,受试物终浓度为0.156 μl/ml时细胞存活率为54.9％;在含S9的系统中,受试物终浓度为0.313 μl/ml时细胞存活率为52.4％;B育发膏在不含或含S9的系统中,受试物终浓度为5 mg/ml时细胞存活率均超过90％.与对照组比较,A育发香波各剂量组的染色体畸变率差异无统计学意义(不加S9的体系下Pearson Chi-Square值=0.341,P=0.952,在S9体系下的Pearson Chi-Square值=0.687,P=0.876),B育发膏在加S9和不加S9试验体系下高剂量组的染色体畸变率与阴性对照组相比,有显著性差异(不加S9的体系下Pearson Chi-Square值=16.611,P =0.000,在S9体系下的Pearson Chi-Square值=11.971,P=0.01;重复试验不加S9的体系下Pearson Chi-Square值=15.457,P=0.000,在S9体系下的Pearson Chi-Square值=15.341,P=0.000),低、中剂量组的染色体畸变率无显著性差异(不加S9的体系下Pearson Chi-Square值=0.000,P=1.000,在S9体系下的Pearson Chi-Square值=0.687,P=0.709).结论 在本实验条件下,A育发香波无致突变性,B育发膏有致突变性.
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蚓激酶对中国仓鼠肺细胞染色体畸变的影响
目的 研究蚓激酶的安全性.方法 采用中国仓鼠肺(CHL)细胞染色体畸变试验检测蚓激酶的安全性.结果及结论 蚓激酶不能诱发CHL细胞染色体畸变.
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人参皂苷Rb2致中国仓鼠肺细胞染色体畸变的作用
目的:研究人参皂苷Rb2致中国仓鼠肺细胞(Chinese hamster lung cells,CHL)染色体畸变的作用.方法:细胞计数法测定人参皂苷Rb2对CHL细胞的半数抑制浓度(50％inhibition concentration,IC50),根据IC50设立不同剂量组,进行CHL细胞染色体畸变试验,分别观察人参皂苷Rb2染毒6、24 h及加S9后染毒6 h CHL细胞染色体的数目及结构变化,进行染色体畸变分析.结果:人参皂苷Rb2染毒6、24 h及加S9后染毒6 h CHL细胞染色体畸变均为阴性.结论:在本试验条件下,人参皂苷Rb2未引起CHL细胞染色体产生畸变.
