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40株肠球菌应用两种仪器鉴定结果的比较研究
目的 比较VITEK-32与VITEK 2 compact两种仪器对肠球菌鉴定的准确性.方法 分别应用VITEK-32与VITEK 2 compact 对40株临床标本分离的肠球菌同时鉴定,用多重PCR技术对鉴定结果有差异的菌株进行种的检测并对产物测序.结果 40株肠球菌中,32株用两种仪器鉴定结果完全相同,86株鉴定结果不一致.8株菌的PCR产物测序结果与GenBank中的屎肠球菌比较有97%～98%同源性,与VITEK2 compact鉴定结果完全相同.结论 VITEK 2 compact鉴定屎肠球菌的准确性优于VITEK-32.
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比较全自动微生物分析仪与基因分析在凝固酶阴性葡萄球菌鉴定中的作用
目的 比较Vitek32鉴定系统和16S rRNA序列分析法鉴定凝固酶阴性葡萄球菌的灵敏度和特异性.方法 选择2004年12月～2006年11月重症监护病房分离的凝固酶阴性葡萄球菌70株,常规细菌培养后,用Vitek32鉴定系统和16S rRNA基因测序进行分类,以API Staph系统为参照,比较2种鉴定方法的优势和不足.结果 根据Vitek32鉴定系统判断标准,将鉴定结果分为3组:Ⅰ组(25株):"不可接受",%id＜80;Ⅱ组(35株):"可接受的",%id 80～90;Ⅲ组(10株):"好的",%id 90～98,标准菌株为金黄色葡萄球菌(ATCC29213),分别进行16S rRNA基因测序.16S rRNA基因分析法全部鉴定到种,2种方法鉴定符合率分别为Ⅰ组64%、Ⅱ组74.3%、Ⅲ组100%,总体鉴定符合率74.4%.结论 Vitek32在进行凝固酶阴性葡萄球菌鉴定时有局限性,16S rRNA序列分析可以弥补鉴定上的不足,在发展难培养和不能培养微生物的鉴定中将发挥重要作用.
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万古霉素对金黄色葡萄球菌体外抗菌活性研究
目的调查万古霉素对金黄色葡萄球菌的体外抗菌活性.方法收集温州医学院附属第一医院2005年2～7月从临床各种标本分离的金黄色葡萄球菌112株,PCR检测mecA基因确定MRSA,采用琼脂稀释法和全自动微生物分析仪检测金黄色葡萄球菌万古霉素MIC值,使用4 mg/L万古霉素脑心浸液琼脂(BHIA)筛选异质性耐万古霉素金黄色葡萄球菌(hVRSA).结果MRSA的检出率为64.3%,万古霉素的MIC大多数≤2 mg/L,MIC90为2mg/L,有2株菌在4mg/L万古霉素BHIA平皿上生长,经菌群分析法证实非hVRSA.仪器法检测的万古霉素MIC值与琼脂稀释法的符合率只有35.7%,琼脂稀释法万古霉素MIC高于仪器法,仪器法检测的2株万古霉素中介耐药的菌株经琼脂稀释法和K-B法证实为敏感株.有6株对万古霉素的MIC为4 mg/L,按美国NCCLS/CLSI 2006年的标准被确定为万古霉素中介耐药株.结论万古霉素对金黄色葡萄球菌具有较强的体外抗菌活性,未发现耐药株,但MIC值较大.仪器法检测金黄色葡萄球菌对万古霉素的敏感性结果不可靠.按NCCLS/CLSI2006年的标准临床上能检测到对万古霉素中介耐药的金黄色葡萄球菌临床分离株.
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全自动微生物分析系统对布鲁杆菌属和种鉴定效果的研究
目的 鉴定与分析布鲁杆菌的生化特征,评价对全自动微生物分析系统的鉴定效果和临床意义.方法 17株标准菌株和121株实验菌株来自于中国疾病预防控制中心传染病预防控制所布鲁杆菌病(简称布病)研究室菌种库,实验菌株为全国26个省(市、自治区)1957-2014年历次流行自布病患者和羊、黄羊、岩羊、牛、猪分离的布鲁杆菌菌株.用GN鉴定卡在VITEK2 COMPACT全自动微生物分析系统上对标准菌株和实验菌株进行生化检测,根据布鲁杆菌属和种的生化阳性鉴定标准,通过对比分析,获得布鲁杆菌属和种的生化阳性鉴定结果.对系统鉴定异常的菌种,采用传统鉴定方法进行氧化酶、脲酶、动力、硫化氢测定和碱性复红敏感性试验、噬菌体裂解试验及A/M单相特异性血清凝集试验进行菌种的重新判定.结果 对138株布鲁杆菌菌株的全自动微生物分析系统生化鉴定结果显示,布鲁杆菌属的主要阳性鉴定指标为L-脯氨酸芳胺酶(ProA)、酪氨酸芳胺酶(TyrA)、尿素酶(URE)、氨基乙酸芳胺酶(GlyA)、乳酸盐产碱(1LATK)、ELLMAN (ELLM);与系统值比较,全部菌株生化功能相似率为97.99％(135.23/138),其中标准菌株为96.71％(16.44/ 17),实验菌株为98.17％(118.79/121);菌株鉴定需要的时间为6.1 ～ 7.7 h,其中标准菌株为7.3 h,实验菌株为6.9 h.区分是否为布鲁杆菌属的阳性鉴定指标为ProA、TyrA、URE、GlyA;区分羊种布鲁杆菌的阳性指标为ELLM;区分牛种布鲁杆菌的阳性指标为1LATK;区分猪种布鲁杆菌的阳性指标为丙氨酸-苯丙氨酸-脯氨酸芳胺酶(APPA);犬种无明显的阳性指标.从实验菌株中鉴定出4株人苍白杆菌,传统方法显示,氧化酶阳性、脲酶阳性、硫化氢阳性、动力阴性;碱性复红敏感性试验有抗性2株(牛种),敏感2株(猪种);硫堇实验敏感2株(牛种),有抗性2株(猪种);噬菌体裂解试验阳性2株(牛种),阴性2株(猪种).A/M因子单相特异性血清凝集试验,牛种布鲁杆菌(A)阳性,羊种布鲁杆菌(M)阴性,排除人苍白杆菌,终鉴定均为布鲁杆菌种.结论 全自动微生物分析系统在鉴定布鲁杆菌时速度快,可靠性较高,对不同菌株属和种鉴定的主要阳性指标明确,可用于临床诊断.当鉴定为人苍白杆菌时,需与布鲁杆菌进行鉴别,以免误诊.
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全自动微生物分析仪对肠球菌的鉴定及药敏分析
目的研究肠球菌的分布特点及其对常用抗生素的药敏分析，指导临床合理用药。方法应用MicroScan WalkAway-40全自动微生物分析仪对从临床标本中分离的104株肠球菌进行鉴定、药敏试验及庆大霉素和链霉素增效筛选试验。结果 104株肠球菌中，粪肠球菌占77.9%，屎肠球菌占15.4%，鸟肠球菌占6.7%。104株肠球菌在各标本中的分布位于前三位的是尿液、脓液分泌物和痰液，它们分别占已分离到肠球菌的50%、18.3%和13.5%。肠球菌对万古霉素、青霉素和氨苄西林的敏感率分别为90.4%、65.4%和69.2%，对庆大霉素和链霉素增效筛选试验的敏感率分别为48.1%和54.8%，对利福平、环丙沙星、四环素和红霉素的敏感率较低。结论临床分离到的肠球菌以粪肠球菌为主。肠球菌在尿液标本中分布高。除对万古霉素外肠球菌对抗生素的敏感性较低，而屎肠球菌比粪肠球菌和鸟肠球菌具有更严重的耐药性。检测肠球菌对高浓度氨基糖苷类抗生素的敏感性对临床具有指导意义。
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革兰阳性菌引起的血培养阳性标本直接细菌鉴定和药敏的方法探讨
目的 探讨革兰阳性菌引起的血培养阳性标本直接细菌鉴定和药敏的可行性.方法 将血培养瓶放入Bact/Alert 3D全自动血培养仪中,阳性报警后涂片染色,选革兰阳性菌143份进行试验,抽取培养液,利用梯度离心法,用VITEK 2 Compact全自动鉴定药敏仪直接做鉴定和药敏试验.用传统法的鉴定和药敏结果对直接法的鉴定和药敏结果进行评估.结果 143株革兰阳性菌中包括金黄色葡萄球菌46株、溶血葡萄球菌33株、表皮葡萄球菌25株、人葡萄球菌20株、粪肠球菌11株、屎肠球菌8株,鉴定符合率分别为100％、97.0％、100％、85.0％、91.0％、87.5％,总符合率为97.1％.革兰阳性菌引起的血培养阳性标本药敏用直接法与传统法进行比较总符合率为96.4％,大部分药敏符合率＞95.0％,非常重大错误率为0.1％,重大错误率0.7％.结论 Bact/Alert 3D全自动血培养仪阳性标本,涂片为染色革兰阳性菌梯度离心后直接用VITEK 2 Compact全自动鉴定药敏仪直接做鉴定和药敏试验是可行的,并可缩短临床报告时间,为临床诊断和治疗提供依据,有较高的应用价值.
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全自动微生物分析仪直接鉴定血培养阳性标本
1 临床资料 2000-11/2001-08发热有全身感染症状患者血液样本302例. 一次性全封闭血培养瓶,采用B-D公司BACTEC9050系统专用瓶. 细菌鉴定及药敏用美国德灵公司Walk Away-40全自动微生物细菌药敏试验鉴定仪. 美国德灵公司专用细菌和药敏试验鉴定卡,包括PC11综合板,
