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小鼠淋巴瘤细胞经有限代次培养后Tk基因及相邻位点的基因型分析
小鼠淋巴瘤细胞胸腺嘧啶激酶基因突变测试(mouse lymphoma assay,MLA),现已广泛应用于化学物质的潜在遗传毒性检测[1-2].我国也已将该检测方法纳入保健食品毒理学测试规范和安全性评价程序[3].
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011短柔毛大戟中能逆转小鼠淋巴瘤细胞多药耐药性的二萜成分
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单一剂量美法仑治愈荷瘤C57BL/6小鼠动物模型的建立
[目的]建立单一剂量化疗药物治愈荷瘤小鼠的动物模型,为研究在体内化疗药物治愈肿瘤与机体免疫力和肿瘤细胞耐药之间的关系奠定基础.[方法]用MTT法在体外检测小鼠淋巴瘤EL4细胞对化疗药物美法仑的敏感性.野生型C57BL/6小鼠皮下接种小鼠淋巴瘤EL4细胞建立荷瘤小鼠模型,不同剂量的美法仑单次腹腔内注射,观察不同剂量的美法仑体内治疗的效果及其毒、副作用,找出美法仑可发挥大抑瘤作用、并能使荷瘤小鼠的肿瘤消退、不再复发的小治疗剂量.[结果]体外美法仑对EL4细胞的直接杀伤作用与所用美法仑的剂量呈正相关.接种1×105EL4细胞可使C57BL/6小鼠肿瘤进行性生长,接种后12 d平均肿瘤直径为6 mm,动物致死时间平均为(17.7±1.0)d.接种后12 d的荷瘤小鼠腹腔单次注射不同剂量的美法仑,观察发现:应用0.75 mg/kg～30 mg/kg的美法仑,肿瘤结节缩小的速率与所用美法仑的治疗剂量呈正相关;在肿瘤结节完全消退后,肿瘤的复发率与所用美法仑的治疗剂量呈负相关.7.5 mg/kg美法仑单次腹腔内注射后不但使野生型C57BL/6荷瘤小鼠的肿瘤完全消退,治疗后2个月内无肿瘤复发,并且再次接种等量肿瘤细胞无肿瘤生长.[结论]单一剂量(7.5 mg/kg)的美法仑腹腔内注射是可以治愈野生型C57BL/6荷瘤小鼠的低有效剂量.该动物模型的建立为研究化疗药物治愈恶性肿瘤的机制奠定了基础.
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羊膜对YAC-1细胞增殖影响的实验研究
目的观察羊膜对其基质面培养的YAC-1细胞增殖的影响。方法将YAC-1细胞接种于羊膜基质面，用MTT自动比色法分别于接种后1、3、7d检测羊膜对YAC-1细胞增殖的影响。结果接种后1、3、7d，羊膜均对YAC-1细胞有明显的促增殖作用(P＜0.01)。结论羊膜有促进肿瘤细胞增殖的作用，对眼表面肿瘤摘除同时行羊膜移植术时需慎重。
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血清灭活对小鼠淋巴瘤试验结果的影响
目的 探索小鼠淋巴瘤胸腺激酶(tk)位点基因突变试验中血清灭活对结果的影响.方法 取对数生长期的小鼠淋巴瘤细胞(L5178Y3.7.2c-tk+/-)设立阴性对照组和阳性对照组,阴性对照组加入100 μL DMSO,阳性对照组加入100 μL 10μg/mL 4-硝基喹啉(4-NQO)诱导突变,测定细胞悬浮增长率(SG)、相对悬浮增长率(RSG)、平板效率(PE)、相对存活率(RS)和相对总生长率(RTG)等指标.根据血清灭活与否和选择突变剂三氟胸苷(TFT)的含量,在筛选突变集落过程中,将阴性对照组和阳性对照组各分为:灭活组、未灭活+1.5倍TFT组、未灭活组,测定突变频率(MF),对试验结果进行评价.结果 阴性对照组SG在8～32,细胞倍增速度符合试验要求;PE在65％～120％,符合试验成立条件.阳性对照的灭活组、未灭活+1.5倍TFT组、未灭活组中MF均比阴性对照组至少增加300×10-6且小克隆突变频率至少占40％,符合试验要求.阴性对照灭活组的MF数值在标准范围内,未灭活组的MF数值明显高于灭活组,超过标准数值范围,且96孔板中的大小克隆不易区分;阴性对照未灭活+1.5倍TFT组使得MF数值在标准范围内,但远高于灭活组.结论 在小鼠淋巴瘤试验中,测定MF的平板一定要用灭活的血清,未灭活血清可能通过抵消TFT作用对结果产生很大影响.
关键词： 小鼠淋巴瘤细胞 胸腺激酶(tk)基因突变 热灭活血清 突变频率
