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热疗结合健脾理气抑瘤方诱导人肝癌细胞HepG2凋亡及机制探讨

周宇姝;招柏明;张晓轩;吴万垠

摘要: 目的 研究热疗结合健脾理气抑瘤方体外诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的作用和机制.方法 以人肝癌细胞HepG2为研究对象,培养并收集对数生长期的HepG2细胞,分为热疗组、健脾理气抑瘤方组(JPLQYLF)、联合组、对照组.将各组细胞置37℃、5%C02条件下在培养箱中分别培养24,48,72 h后,通过MTT法检测对细胞增殖的影响;培养24h后,流式细胞仪(Annexin V-FITC/PI双染)检测细胞凋亡;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达情况.结果 与对照组比较,JPLQYLF组、热疗组和联合组人肝癌细胞HepG2的增殖抑制率均明显升高(P<0.05).JPLQYLF组呈剂量依赖性和时间依赖性抑制肝癌细胞的增殖,而热疗组呈时间依赖性抑制细胞的增殖.与热疗组和JPLQYLF组比较,联合组的细胞增殖抑制率升高明显(P<0.05),热疗与JPLQYLF结合对细胞的增殖抑制更为显著.热疗与各浓度JPLQYLF联合时,各组的q值均大于0.85,具有协同效应.与作用48h、72h比较,作用24h后各组的q值明显升高,二者结合的协同效应更强(P<0.05).与对照组比较,热疗组、JPLQYLF组及联合组细胞的凋亡率均明显升高(P<0.05).JPLQYLF呈剂量依赖性诱导细胞凋亡;热疗组呈时间依赖性诱导细胞凋亡.与热疗组、JPLQYLF组比较,联合组的细胞凋亡率明显升高(P<0.05),热疗与JPLQYLF结合能更显著诱导细胞的凋亡.与对照组比较,热疗组、JPLQYLF组和联合组Bax的表达均上升(P<0.05),Bcl-2的表达均下降(P<0.05).与热疗组、JPLQYLF组比较,联合组呈剂量和时间依赖性显著上调Bax的表达,同时显著下调Bcl-2的表达.结论 热疗结合JPLQYLF抑制肝癌细胞增殖和诱导细胞凋亡可能与上调促凋亡蛋白Bax的表达,同时下调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达有关,二者联合应用时具有明显的协同效应.

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