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人NDRG4-B cDNA克隆和表达

张健;王立峰;苏金;刘新平;张万会;药立波

摘要: 目的: 获得 NDRG4-B(N-myc downstream-regulated gene 4-B)的编码基因,表达NDRG4-B蛋白. 方法: 以成人脑cDNA文库为模板,通过PCR方法扩增NDRG4-B编码基因,克隆至pMD18-T载体并测序,再亚克隆至表达载体pRSET-A,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达6His-NDRG4-B融合蛋白. 结果: 从成人脑cDNA文库中扩增出编码NDRG4-B的cDNA,序列测定证实有两个沉默突变(从ATG开始,第765 bp处: G→A ; 966 bp处: A→G);成功构建了pRSET-A融合表达载体NDRG4-B-pRSET-A;表达了6His-NDRG4-B融合蛋白. 结论: 克隆与表达了人NDRG4-B.

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