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HSP70诱饵载体的构建及其在酵母双杂交系统中自激活作用的检测

李静;杨守京;刘彦仿;周鹏;韩骅

摘要: 目的: 构建用于酵母双杂交系统的"诱饵"载体pGBKT7-Hsp70,并检测其是否具有自激活作用. 方法: 用PCR的方法从质粒pBBS212-Hsp70中扩增出Hsp70基因片段,引入酶切位点EcoRⅠ, BamHⅠ. 测序正确后,将Hsp70基因克隆至载体pGBKT7中,并检测 pGBKT7-Hsp70在MATHMAKER GAL4 Two-Hybrid System 3中的自激活作用. 结果: 成功构建了"诱饵"载体pGBKT7-Hsp70,并证明其在酵母双杂交系统中无自激活作用. 结论: pGBKT7-Hsp70可以用于酵母双杂交系统中,寻找与Hsp70相互作用的分子.

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