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去卵巢骨质疏松大鼠拔牙创模型研究
目的 通过卵巢切除术及大鼠左侧上颌第一磨牙拔除术建立去卵巢骨质疏松大鼠拔牙创模型.方法 选用3个月龄雌性SD大鼠24只,随机分为模型组、对照组,每组12只,卵巢切除术2个月后对两组大鼠行左侧上颌第一磨牙拔除术,于卵巢切除术后2个月及拔牙术后第2、4、8周分4批处死大鼠,通过体质量、血清生化检测、Micro-CT检测及组织学观察对动物模型进行评价.结果 卵巢切除术前模型组体质量((300.52±5.94)g)与对照组((298.88±6.21)g)相比无显著差异;术后2个月,模型组((355.64±12.09)g)相比于对照组((328.30±10.03)g)体质量明显增加(P＜0.05).卵巢切除术后2个月模型组雌二醇水平((10.21±4.35) pg/mL)较对照组((22.49±2.94) pg/mL)明显降低(P＜0.05),同时模型组大鼠股骨远端骨小梁较为稀疏不连续.Micro-CT示拔牙术后(4周(0.113 8±0.009 9)mm,8周(0.122 7±0.019 7)mm)模型组骨小梁厚度均明显低于对照组(4周(0.142 3±0.010 6)mm,8周(0.201 3±0.052 7)mm) (P＜0.05).组织学观察显示拔牙术后模型组拔牙创骨小梁纤细,稀疏,不规则,骨量少,新骨愈合质量降低.结论 采用卵巢切除术结合大鼠左侧上颌第一磨牙拔除术可建立去卵巢骨质疏松大鼠拔牙创模型,为探讨绝经后骨质疏松对拔牙创愈合的影响及其机制提供了有效的手段.
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维生素K对去卵巢大鼠肝氧化应激及炎症因子的影响
目的:探讨补充维生素K对去卵巢大鼠肝氧化应激及炎症的影响.方法:以去卵巢SD大鼠作为围绝经期模型,比较维生素K补充与不补充对肝组织丙二醛,超氧化物歧化酶(SOD),还原型谷胱甘肽(GSH)等氧化应激指标以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6(IL-6)的影响.将30只6月龄雌性SD大鼠随机分为3组,每组均为10只,即假手术组,去卵巢组以及去卵巢后补充维生素K组(维生素K组).术后1周开始分组给药,维生素K组将维生素K昆于丙三醇中每日灌胃,而假手术组和去卵巢组每日给予丙三醇灌胃.90 d后,取肝组织测定丙二醛,SOD,GSH;冰冻切片行苏木素-伊红(HE)与活性氧(ROS)荧光染色;免疫印迹检测TNF-α和IL-6的表达.结果:维生素K组肝组织丙二醛水平较去卵巢组明显降低,但明显高于假手术组(P均＜0.05).维生素K组肝组织SOD,GSH水平均较去卵巢组明显降低(P＜0.05),与假手术组比较差异无统计学意义.形态学检测表明维生素K组肝细胞胞质内小空泡数目明显少于去卵巢组,而假手术组则未见空泡;维生素K组肝细胞内活性氧荧光强度明显低于去卵巢组,与假手术组相近.免疫印迹结果表明维生素K组肝内TNF-α与IL-6表达水平均介于去卵巢组和假手术组之间;去卵巢组两种因子水平明显高于假手术组.结论:去卵巢大鼠肝组织处于较高的氧化应激状态,并伴有促炎因子表达增高,这种改变能在一定程度上被维生素K缓解.
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去卵巢和激素致骨质疏松模型中骨密度与血清指标的比较
目的 通过建立去卵巢与地塞米松致SD大鼠骨质疏松模型,了解去卵巢和地塞米松对骨代谢的影响,探讨两种模型在不同时间点骨密度和血清学的区别.方法 选用6月龄健康雌性SD大鼠,采用肌注地塞米松及手术方法切除大鼠两侧卵巢分别制作去卵巢(OVX)及激素致大鼠骨质疏松模型.比较两者不同时间点血钙、磷、碱性磷酸酶(ALP)、骨密度、骨结构、骨组织形态学的变化.结果 去卵巢组与地塞米松组大鼠的骨组织形态学都呈现出典型的骨质疏松状态,在各个时间点的骨密度均明显低于对照组(P＜0.05或P＜0.01).另外在不同时间点两组模型大鼠体内ALP水平均显著升高(P＜0.01),去卵巢组血钙、磷维持在正常范围(P＞0.05),而地塞米松组钙降低(P＜0.05),磷升高(P＜0.05).结论 去卵巢与地塞米松所致的骨质疏松模型在不同时间点上的血清学指标、骨形态计量学存在一定的区别.同时发现去卵巢模型的造模成功时间可以提前到10周,而激素模型的造模时间则应为5周或更长.
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戊酸雌二醇对去卵巢大鼠子宫、阴道、乳腺雌激素受体表达的影响
以去卵巢大鼠为研究模型,观察戊酸雌二醇对去卵巢大鼠子宫、阴道、乳腺组织病理变化及雌激素受体α(ERα)和雌激素受体β(ERβ)表达的影响,探讨其雌激素样作用机制.采用HE染色法观察去卵巢大鼠组织的病理改变;采用免疫组织化学和Western blot技术检测子宫、阴道、乳腺ERα和ERβ蛋白的表达水平.结果显示,戊酸雌二醇可明显拮抗去卵巢大鼠靶器官的萎缩,其机制可能与上调靶器官雌激素受体(ERs)表达有关.
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假药对去卵巢糖尿病骨质疏松大鼠血糖、骨代谢、氧化应激的影响
目的 观察假蒟对去卵巢糖尿病骨质疏松大鼠血糖、骨代谢指标、氧化应激指标、骨小梁的影响,探讨其对去卵巢糖尿病骨质疏松大鼠的治疗作用及其机制.方法 采用随机数字表法将大鼠分为模型组、格列本脲组、雌二醇(E2)组、假蒟组和假手术组5组,每组10只.假手术组只切除双侧卵巢周围少许脂肪组织,其余4组切除双侧卵巢后予链脲佐菌素(STZ)诱导制备去卵巢糖尿病骨质疏松模型.格列本脲组采用格列本脲5mg/(kg·d)灌胃,E2组采用E2 100μg/(kg·d)灌胃,假蒟组采用假蒟125mg/(kg·d)灌胃,模型组和假手术组采用0.9％氯化钠溶液8ml/(kg·d)灌胃.药物干预4周后,检测空腹血糖(FBG)、TC、TG、血钙(Ca)、血磷(P)、E2、空腹胰岛素(FINS)、糖化血清蛋白(GSP)、骨钙素(OC)、碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、晚期糖基化终末产物(AGEs)水平.HE染色观察骨组织病理形态学改变.结果 干预后,假蒟组血清FBG、TC、TG、AKP、MDA、AGES水平均低于模型组,血清SOD活性高于模型组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).假蒟组与格列本脲组血清FBG水平比较差异无统计学意义(P＞0.05).骨组织病理形态学观察:与假手术组比较,假蒟组骨小梁数量减少不明显,排列较规则,连续性、完整性较好.结论 假蒟降糖效果非劣效于格列本脲,其可能通过改善高血糖状态、抗氧化应激,从而抑制去卵巢糖尿病骨质疏松模型大鼠骨代谢紊乱.
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雌激素与去卵巢小鼠外周血T淋巴细胞亚群及免疫球蛋白关系的研究
目的 通过对去卵巢小鼠补充E2治疗,观察外周血T淋巴细胞亚群及免疫球蛋白水平变化,探讨E2对上述指标的影响.方法 60只健康雌性小鼠随机分为3组,假手术组不给药物,去卵巢小鼠分别接受苯甲酸雌二醇(用药组)及注射油(非用药组)皮下注射治疗,每周2次,共注射25次(12周),酶联免疫吸附法检测3组血清E2及免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA)水平,流式细胞仪检测血CD4+ T细胞和CD8+T细胞变化.结果 (1)术后12 周用药组血CD8+T细胞数(18.16±4.04)比非用药组(25.73±3.63)降低(P＜0.05);假手术组血CD8+T细胞数(16.54±3.12)比非用药组(25.73±3.63)降低(P＜0.05),差异有统计学意义.(2)与非用药组比较,用药组及假手术组CD4+ T细胞数呈上升趋势,但差异均无统计学意义(均P ＞0.05).(3)血清IgG、IgM、IgA水平3组比较差异均无统计学意义(均P ＞0.05).结论 E2可降低去卵巢小鼠外周血CD8+T细胞水平,参与免疫系统调节.
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SD大鼠绝经后骨质疏松疾病动物模型的构建
目的 构建绝经后骨质疏松疾病动物模型,探讨该疾病的发病机制与防治措施.方法 将3个月龄健康雌性SD大鼠40只,随机分为2组,分别为去卵巢组和假手术组.去卵巢组切除大鼠双侧卵巢,手术后3个月通过检测体重、阴道涂片、血钙、子宫湿重、骨组织病理学、骨组织形态计量参数等对模型进行评价.结果 手术后3个月,去卵巢组大鼠体重较假手术组明显增加(P＜0.05),子宫湿重、血钙含量较假手术组量明显下降(P＜0.05),阴道涂片显示去卵巢组大鼠均无发情表现,骨组织病理学观察显示去卵巢大鼠胫骨骨小梁断裂,小梁间距变宽,结构紊乱,骨形态计量学数据显示去卵巢大鼠胫骨、股骨干骺端骨小梁面积百分率、骨小梁平均厚度均较假手术组减少(P＜0.05).结论 3个月龄SD大鼠去卵巢后3个月可成功复制出绝经后骨质疏松模型.
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辅酶Q10对去卵巢大鼠骨质和骨密度的影响
目的:研究辅酶Q10(CoQ10)对去卵巢大鼠骨钙、骨镁及骨羟脯氨酸含量及骨密度的影响,并探讨其防治骨质疏松症的作用及其机制.方法:3月龄SPF级SD雌性未孕大鼠,随机分为假手术组(Sham)、去卵巢模型组(OVX)、小麦胚芽油组(WGO)、辅酶Q10高剂量组(CoQ10H)、辅酶Q10低剂量组(CoQ10L)、戊酸雌二醇(EV)组,连续给药12周.实验第91天处死大鼠,取右侧胫骨进行骨钙、骨镁及骨羟脯氨酸含量测定,取右侧股骨及第4腰椎进行骨密度测定.结果:与Sham组比较,OVX组的各项反映骨质和骨密度指标含量均显著减少;与OVX组比较,Q10L、戊酸雌二醇组均可提高大鼠的骨钙、骨镁及羟脯氨酸含量,增加骨密度.结论:辅酶Q10可防治去卵巢引起大鼠骨钙、骨镁、骨羟脯氨酸含量下降及骨密度减小.
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应激与去卵巢对小鼠行为活动的影响及中药复方Ⅰ的防治作用
目的:观察应激和去卵巢造模对小鼠行为活动的影响,并观察中药复方Ⅰ对其的防治作用.方法:本研究首次采用应激和去卵巢造模观察对小鼠睡眠时间、常压耐缺氧时间、爬绳时间及活动次数的影响,观察中药复方Ⅰ对其的防治作用.结果:单纯应激、单纯去卵巢以及应激与去卵巢对小鼠睡眠、耐常压缺氧、爬绳及活动次数有不同程度的影响,但应激与去卵巢比单纯应激、单纯去卵巢对小鼠的影响更为强烈.应激和去卵巢可致小鼠睡眠障碍加剧,其睡眠潜伏期延长,睡眠时间缩短;常压缺氧存活时间缩短,爬绳时间缩短,小鼠活动次数增加.结论:应激能使去卵巢小鼠对外界环境改变的敏感性增强,与目前临床更年期综合征发病机制相符.由酸枣仁、知母等药组成的中药复方Ⅰ可改善应激与去卵巢小鼠的睡眠,缩短小鼠入睡潜伏期,延长小鼠睡眠时间;能增加小鼠体力,使其耐常压缺氧存活时间延长,爬绳时间延长;还具有一定的镇静作用,可使小鼠活动次数减少.
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含辅酶Q10的红曲胶囊对去卵巢合并D-半乳糖大鼠股骨的影响
目的采用大鼠去卵巢合并D-半乳糖诱导老年性骨质疏松的动物模型来评价含辅酶Q10的红曲胶囊对其股骨的骨药理学作用,并与雌激素己烯雌酚比较。方法3 mon龄SPF级♀ SD大鼠,随机分为假手术对照组(CON),去卵巢组( OVX)、模型组( MOD),己烯雌酚组( DES)和红曲胶囊组( RYR),连续给药60 d。实验结束时,取左侧股骨检测钙、磷和羟脯氨酸含量；取右侧股骨进行三点弯曲实验,然后用Micro CT进行骨量分析。结果与CON组相比,MOD组的大鼠体重明显增加；股骨的大载荷、刚度、大强度、断裂强度、弹性模量均明显降低；股骨的Ca、P、Hyp含量均明显降低；Micro CT指标BV/TV、Tb. N、BMD、Conn-Dens均明显降低,Tb. Sp、SMI均明显增加。与MOD组相比,RYR组体重明显降低；各力学指标均有增加的趋势；Ca和P的含量均明显增加；BV/TV、Tb. N、Tb. Th、BMD、Conn-Dens均明显增加,Tb. Sp明显降低。与MOD组相比,DES组股骨的各项指标趋势与RYR组相一致。但与DES组相比,RYR组体重明显降低,Ca和P含量明显增加,BV/TV、Tb. N、Tb. Th、Conn-Dens明显升高, Tb. Sp、SMI明显降低。结论去卵巢合并D-半乳糖可诱导大鼠股骨出现老年性骨质疏松的表现,含辅酶Q10的红曲胶囊可使去卵巢合并D-半乳糖大鼠的体重明显减轻,股骨矿物质含量丢失得到恢复；股骨的骨丢失明显减轻,骨微观结构得到明显改善。且0．5颗· kg-1的红曲胶囊在增加松质骨骨小梁数量上比30μg·kg-1己烯雌酚效果要好。
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女贞子治疗去卵巢大鼠骨质疏松的实验研究
目的 观察女贞子对去卵巢(ovariectomy,OVX)大鼠骨质疏松(osteoporosis,OP)的治疗作用,并探讨其作用机制.方法 大鼠骨质疏松模型,女贞子(9、4.5、2.25 g·kg-1·d-1)灌胃给药,实验过程称体重,连续给药26周后测定血钙(S-Ca)、血磷(S-P)、尿钙(U-Ca)、尿磷(U-P)的含量,ELISA试剂盒双抗体夹心法测定血清碱性磷酸酶(ALP)、血清骨特异性碱性磷酸酶(BALP)含量、骨钙素(OCN)含量、尿液中脱氧吡啶啉(DPD)含量,DEXA型骨密度仪分析大鼠的股骨、胫骨、第4椎骨的BMD(bone mineral density),动物处死后完整取下心、肝、脾、肺、肾、胸腺、脑、子宫进行称重,采用HE染色法进行子宫病理学检查.结果 女贞子能有效抑制去卵巢所致的大鼠体重增加、升高S-Ca、S-P、降低U-Ca、U-P、降低ALP、BALP、OCN、DPD的含量,增加大鼠股骨、胫骨、第4椎骨的BMD,并且长期用药对子宫无明显刺激作用.结论 女贞子对OVX大鼠所致的骨质疏松症有良好的治疗效果,其作用机制可能与其能降低高的骨转换率有关.
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不同疗程阿仑膦酸钠对去卵巢大鼠骨骼的影响
目的探讨阿仑膦酸钠(固邦)不同疗程对去卵巢大鼠所致骨质疏松的骨计量学参数的影响. 方法用3 mon龄♀SD大鼠,阿仑膦酸盐1 mg*kg-1*d-1,分别灌胃给药30 d和90 d,体内双荧光标记.实验终止时处死大鼠,取左侧胫骨近心端行骨组织形态计量学分析.结果去卵巢大鼠骨小梁面积百分率分别减少25%(30 d)和62%(90 d), 出现骨吸收大于骨形成的高转换型骨质疏松;阿仑膦酸钠30 d和90 d均完全对抗去卵巢大鼠的骨高转换.与OVX组比较,阿仑膦酸钠作用30 d骨量增加45%, 90 d骨量增加219%,有效防止去卵巢后骨质疏松. 结论阿仑膦酸钠30 d和90 d均通过抑制骨吸收和骨高转换对去卵巢大鼠有预防骨质疏松的作用, 而阿仑膦酸钠90 d的作用比30 d的强.
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联合应用特乐定与固邦对去卵巢大鼠骨骼作用研究
目的观察特乐定与固邦联合用药是否对大鼠骨骼产生增强疗效的作用.方法 3 mon龄♀SD大鼠42只 , 体重(266±22) g, 随机分为6组,除了第1组实行Sham手术外,其余5组均实行去卵巢(Ovx)手术.Sham大鼠给予蒸馏水,各Ovx大鼠分别给予蒸馏水、1 mg*kg-1*d-1固邦、270 mg*kg-1*d-1的葡萄糖酸钙、5.6 mg*kg-1*d-1的特乐定及结合1 mg*kg-1*d-1固邦与5.6 mg*kg-1*d-1的特乐定.实验期限为3 mon,处死前注射荧光标记.实验结束后取左侧胫骨近心端,行骨组织形态计量学分析.结果固邦增加大鼠骨量,抑制去卵巢大鼠的骨形成指标(%L.Pm,BFR/BS)和骨吸收指标(N.Oc/Tb.Pm).单独补充葡萄糖酸钙未能缓解Ovx大鼠的骨量丢失.特乐定亦未能有效恢复Ovx大鼠丢失的骨量.固邦与特乐定联合用药虽然增加去卵巢大鼠的骨量,但其骨量不比单用固邦的骨量高.结论固邦与特乐定的联合应用,不能发生疗效增强的效果,不推荐两药同时使用.
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鹰嘴豆芽素A对雌激素缺乏诱发大鼠骨质疏松症的作用
骨质疏松（osteoporosis，OP）是以骨量减少，骨组织微细结构破坏，骨脆性增加为特征的一种系统性、全身性骨骼疾病，是常见的老年性骨代谢疾病，女性因绝经后雌激素明显缺乏而易发生。鹰嘴豆芽素 A（biochanin A）来源于豆科植物鹰嘴豆种子的胚芽部分，红车轴草全草等，已证实具有雌激素样作用。本研究通过去卵巢手术，建立大鼠绝经后骨质疏松动物模型，研究鹰嘴豆芽素 A 对去卵巢骨质疏松大鼠的作用，并观察其对大鼠乳腺组织的影响。
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蛇床子素对大鼠雌激素样作用的实验研究
蛇床子素(Osthole,Ost)是中药蛇床子中的香豆素类化合物,其能够增加去势♂大鼠的血清睾酮水平[1],表现出雄激素样作用;也能改善长期去卵巢导致的♀大鼠骨质疏松[2].为确证蛇床子素的雌激素样作用,初步探讨其雌激素样作用机制,本研究考察蛇床子素与雌二醇(estradiol,E2)对21 d龄♀大鼠子宫系数的影响,并进一步考察蛇床子素对去卵巢大鼠的雌激素样作用.
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苦菜总黄酮对去卵巢豚鼠骨代谢生化指标的影响
目的:探讨苦菜总黄酮对去卵巢豚鼠骨代谢的影响.方法:用去卵巢方法建立豚鼠骨代谢紊乱动物模型,30只雌豚鼠,随机分为5组:正常对照组、骨质疏松模型组、阳性药物组、低剂量苦菜总黄酮组(0.1 mg/kg)、高剂量苦菜总黄酮组(0.3mg/kg).建模1周后,分别给予生理盐水、雌激素和不同剂量的苦菜总黄酮,给药6周后,检测豚鼠骨长度和骨质量指数,同时检测血清电解质、碱性磷酸酶(AKP)、骨钙素(BGP)和肝组织抗酒石酸酸性磷酸酶(TrACP-5b)等生化指标.结果:①苦菜总黄酮可以增大股骨和胫骨长度指数;②苦菜总黄酮可提高降钙素的含量;③苦菜总黄酮能升高血清AKP,降低TrACP-5b的含量.结论:苦菜总黄酮可通过调节骨形成和骨吸收途径,改善去卵巢豚鼠骨代谢的紊乱,显示类雌激素样功效,对绝经后骨质疏松症可能起治疗作用.
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雌性自发性高血压大鼠去卵巢后对血压血管结构及血脂的影响
流行病学资料表明中年妇女心血管疾病的发病率比中年男性低,但绝经后发病率则逐年上升,接近甚至超过同年龄段男性.这种现象已逐渐引起医学界的重视.有的研究表明老年妇女雌激素水平低下是其罹患心血管疾病增加的主要原因,老年妇女应用雌激素替代治疗后冠心病发病率和残废率显著下降,心血管事件减少50%～70%[2].
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右归饮对去卵巢血管钙化大鼠NMDAR1蛋白表达的影响
目的:观察右归饮对去卵巢血管钙化中谷氨酸受体变化的影响.方法:将40只远交群雌性大鼠(sprague dawley,SD)随机分为假手术组、模型组、低剂量组、高剂量组和辛伐他汀组,采用皮下注射华法令加维生素D3制备血管钙化模型,造模后,低剂量组、高剂量组分别给予右归饮浓缩液5.35 g/(kg·d)和16.05 g/(kg·d)灌胃,辛伐他汀组给予辛伐他汀混悬水溶液5.25 mg/(kg·d)灌胃,假手术组和模型组给予等量生理盐水,共12周;实验结束时采集血浆标本测定雌二醇及血脂四项,采用苏木精-伊红染色法(HE染色)观察动脉钙化的情况,并采用免疫印迹试验检测N-甲基-D-天门冬氨酸受体(NMDAR,NR)1蛋白的表达.结果:模型组大鼠雌二醇、甘油三酯含量和NR1蛋白表达降低,P＜0.05,低密度脂蛋白升高,P＜0.05;高剂量组和低剂量组雌二醇、甘油三酯含量升高,NR1蛋白表达增加,P＜0.05;高剂量组、低剂量组和辛伐他汀组低密度脂蛋白的含量降低,P＜ 0.05;辛伐他汀组雌二醇无变化,P＞0.05.结论:右归饮可抑制大鼠去卵巢血管钙化的形成,可能与提高雌激素水平和NR1蛋白的表达有关.
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壮骨止痛方提取物对去势骨质疏松症雌鼠血清E2、BGP水平的影响
目的:观察壮骨止痛方提取物对去势骨质疏松症雌鼠血清雌激素(E2)和骨钙素(BGP)的影响.方法:60只3月龄雌性SD大鼠随机分为正常组(A组)、假手术组(B组)、模型对照组(C组)、壮骨止痛方提取物组(D组)四组,15只/组,除正常组及假手术组外,其余组去势(去卵巢)后建立绝经后骨质疏松症模型大鼠,假手术组则去除卵巢周边相应体积的脂肪.大鼠皆灌胃13周后处死取材,测定血清中E2、BGP的含量并观察股骨头病理组织形态学变化.结果:D组大鼠E2水平明显升高,同时血清BGP的水平降低,与C组比较,有显著性差异(P<0.05,P<0.01).病理形态学镜下观察C组骨小梁稀疏、破坏,骨髓腔扩大,骨小梁密度明显下降,A组与B组骨小梁分布均匀,股骨骨小梁密度正常,D组骨小梁密度分布比较均匀,骨小梁密度基本恢复正常.结论:壮骨止痛方提取物不仅能促进雌激素分泌,而且可以通过调节BGP以降低骨转换率,减少骨量丢失,达到抗骨质疏松的目的.
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去卵巢、去松果体对大鼠梨状皮质细胞凋亡的影响
目的 探讨去卵巢(OVX)、去松果体(PX)对大鼠梨状皮质细胞凋亡的影响.方法 63只大鼠通过手术制造动物模型,随机分为对照组、假OVX组、OVX组、假PX组、PX组、假OVX+假PX组、OVX+PX组共 7组各9只.术后60 d取脑组织,用HE、Tunel染色观察各组梨状皮质细胞凋亡数.结果 对照组、假手术组均无梨状皮质细胞凋亡,OVX、 PX、OVX+PX各组均出现梨状皮质细胞凋亡,细胞凋亡数由多到少依次为PX+OVX组、PX组、OVX组,三组间比较差异有显著统计学意义(P均<0.01).结论 OVX、PX可诱发梨状皮质细胞凋亡,而且PX比OVX 影响大,OVX+PX影响更大.
