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牙种植体结合上皮形成中表皮生长因子受体表达
目的观察牙种植体结合上皮形成过程、增殖核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)及表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)的表达,探讨EGFR与结合上皮形成的关系.方法建立Beagle狗牙种植体模型.分别于取材前1天、3天、6天、9天、12天、15天、20天、30天8个时间段各植入4颗种植体.取标本作HE染色及PCNA、EGFR免疫组化染色检测.结果种植术后12天结合上皮开始形成,PCNA、EGFR呈强阳性表达;15天上皮细胞增生趋于平稳,PCNA 表达显著减弱;20天形成类似天然牙的上皮附着,EGFR表达显著减弱.结论纯钛牙种植体周能形成类似天然牙的上皮附着;EGFR表达与种植体周结合上皮的形成密切相关.
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白细胞介素-1β干预下肝细胞生长因子在人牙周膜成纤维细胞中的基因表达研究
牙周病是发生在牙周组织的慢性感染性疾病，包括牙龈炎和牙周炎，是人类口腔常见的疾病之一。周病初和重要的病理改变是结合上皮的增殖和根尖迁移以及伴随着牙周袋的形成［1］。而肝细胞生长因子（hepatocyte growth fac-tor，HGF）能够促进上皮细胞的增殖，抑制上皮细胞的凋亡及促进胶原降解，抑制胶原合成［2］，因此其在牙周病发展进程中起着重要的作用。本实验拟通过观察白细胞介素（IL）-1β干预人牙周膜成纤维细胞后，HGF的基因表达情况，探讨HGF在牙周病中的表达及意义，为下一步牙周病的临床治疗以及牙周组织工程学的研究提供理论依据。
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牙龈结合上皮损伤后的超微结构的变化
目的:研究牙龈结合上皮损伤后的牙龈结合上皮在透射电镜下的组织学变化的特点以及牙龈结合上皮再附着的过程,为临床金属烤瓷修复体的修复提供参考价值.方法:16只家兔的32颗上前牙分别用金刚砂车针和手术11号尖刀破坏左侧上前牙的牙龈结合上皮,以右侧同名牙的健康未经破坏的牙龈结合上皮为对照,分别于1、2周取材,利用透射电镜观察结合上皮的组织学改变,并对两实验组进行对比观察.结果:实验组与对照组在组织学改变和超微结构变化上存在显著差异.透射电镜下可见实验组部分线粒体絮状变和空泡变、内质网脱颗粒、扩张和不完整的基膜.结论:牙体预备对牙龈结合上皮的损伤,会导致结合上皮的超微结构改变,从而影响牙龈的健康和修复体的美观.
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表皮生长因子对结合上皮和牙龈上皮体外损伤修复的影响
目的:研究表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)对结合上皮(junctional epithelium,JE)和牙龈上皮(gingival epithelium,GE)体外损伤后细胞修复和增殖的影响.方法:采用RT-PCR和免疫细胞化学方法,分别检测表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,ECFR)mRNA和蛋白在JE和GE中的表达;制备细胞爬片,待生长融合至单层时,于玻片中央作宽为3mm的损伤区,然后加入含有EGF(20ng/mL)的条件培养液继续培养,直接加新鲜培养液作为阴性对照.在损伤后第5、9和12天,分别作HE和增殖细胞核抗原(proliferating cell nucleal antigen,PCNA)染色,计算细胞修复率及PCNA阳性率,采用SAS6.12软件包进行统计学分析.结果:RT-PCR显示,JE表达EGFR mRNA,与GE之比为1:1.2;EGFR蛋白在两者表达均为阳性.在第9天,EGF促进GE和JE损伤后的细胞增殖,与阴性对照组比较,均有显著性差异(P<0.05),但GE和JE两组间无显著差别(P>0.05).另外,EGF也可以促进GE和JE损伤后的细胞修复,在第9和12天,GE的修复速度显著快于JE(P<0.05).结论:JE和GE细胞均存在EGFR,EGF对两者体外损伤后的细胞修复与增殖具有调节作用.
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人结合上皮细胞体外培养与冻存方法的改良
目的:改良人结合上皮(junctional epithelium,JE)细胞的分离培养及冻存方法.方法:取正畸拔除的牙周组织健康的前磨牙,沿龈缘剪去冠方1mm左右的沟内上皮,用无菌11号刀片紧贴牙面刮下、剪碎JE组织,简化培养操作步骤.取第2代JE细胞,加入冻存液,按设定的降温程序(从0℃开始,以每分钟下降1.5℃速度下降至-18℃,保持5min;再以每分钟下降20℃的速度降至-80℃,然后投入-196℃液氮罐)冻存细胞,40℃水浴复苏,进一步研究JE细胞的形态、增殖、鉴定及复苏后存活率等生物学活性.结果:不用Dispase冷消化,采用0.1%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化,同样可成功地培养人JE细胞;JE细胞复苏后的存活率为(93.87+3.11)%,生长状况良好,与第2代细胞相似;免疫细胞化学染色显示,培养的JE细胞角蛋白-19(cytokeratin-19.CK19)表达强阳性,而波形丝蛋白(vimentin)表达也为阳性.结论:改良的JE分离培养与冻存方法可行,JE表型在体内和体外并非完全一致,可能与细胞生长的底物有关.
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人和常用实验动物牙龈结合上皮的形态结构比较研究
目的:研究人和常用实验动物牙龈结合上皮(Junctional epithelium,JE)的形态结构,筛选适合实验用的动物、部位和方法.方法:分别选取6例人、3头猪、4条犬、6只家兔、6只大鼠下颌磨牙及牙龈颊舌向的黏膜组织石蜡切片,HE染色结合图像分析,研究JE的形态结构.结果:人、猪、犬、家兔和大鼠JE宽度分别为(1.019±0.133)mm、(0.862±0.073)mm、(1.111±0.104)mm、(0.404±0.010)mm和(0.285±0.032)mm,均占龈沟上皮(Gingival sulcular epithelium,GSE)与JE宽度和的60%左右.猪、狗JE形态结构与人相似,细长呈条索状,形态规则,向冠方增厚,与GSE连续,两者可从细胞形态和染色上区别;家兔、大鼠与人差别较大,JE位于GSE牙面侧,形态不规则,向根方增厚,冠方与GSE分离,GSE角化明显.结论:猪、狗的JE形态结构、牙颌发育与人十分接近,可作为JE研究的首选实验动物;掌握人和常用动物的JE解剖、生理特点及取材要点,筛选合适的研究对象,可为进一步研究JE生物学特性提供有用的参考资料和方法.
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牙龈结合上皮对铸造钛种植体附着状况的超微结构研究
目的:研究牙龈结合上皮对精密铸造加工的一段式钛种植体的附着情况.方法:拔除实验动物双侧前磨牙4只,愈合3个月后,植入一段式铸造钛种植体,分别于植入后6,12周取标本在透射电子显微镜下观察结合上皮对种植体的附着状况.结果:牙龈结合上皮增再生活跃,界面层以半桥粒结合方式附着于种植体表面的基质上,细胞质内有较多的粗面内质网,游离核糖体,分泌小泡,张力细丝,线粒体,有时还可见高尔基复合体.结论:牙龈结合上皮可以与铸造钛种植体形成生物性附着.
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机械损伤大鼠结合上皮后的组织修复观察
目的:观察两种机械方式破坏大鼠结合上皮(JE)后的组织修复过程.方法:12只健康SD大鼠分别用探针、龈下刮治器损伤左、右下前牙JE,于2、7、14、21 d处死大鼠,HE、PCNA染色,镜下观察计数.结果:第2天大量炎细胞浸润,上皮PCNA阳性细胞散在分布;第7天炎症减轻,上皮PCNA阳性率开始增加,增殖并部分和牙面贴附;14 d纤维组织增殖明显,上皮增厚;21 dJE基本修复.结论:龈下刮治对牙周损伤比探损伤重;结缔组织的快速增殖可能会阻止LJE形成.
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种植体生物学宽度的研究进展
种植体生物学宽度(BW)是种植体软组织愈合的基础,也是种植体软组织美学的关键.BW是指种植体或天然牙牙槽嵴顶的结合上皮和结缔组织形成的固定宽度的空间,是一种生物学封闭,这种生物学封闭可以将种植体与口腔环境隔绝,保护种植体周围骨组织,从而维持种植体的稳定.本文就BW的概念、天然牙冠延长与BW的关系、种植体与天然牙在BW上的区别和联系、种植体BW的组成和临床意义、种植体基台转换与BW的关系,以及种植体周围炎BW的关系等作一综述.
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结合上皮在牙周防御反应中的作用
结合上皮是龈牙结合部的牙龈上皮组成部分,呈领圈状紧密附着于牙面.它独特的解剖位置使得其在组织内环境稳定和抵抗微生物及代谢产物中具有重要作用.研究表明,结合上皮的组织结构、代谢更新和免疫应答等方面在牙周防御反应中发挥着积极作用.本文就这些研究进展作一综述,旨在阐明牙周病发生和发展机制.
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层粘连蛋白-5结构及功能的研究进展
层粘连蛋白-5是基底膜的主要组成蛋白之一,对上皮细胞与基底膜之间的稳定结合起着重要的作用.层粘连蛋白-5通过受体介导,具有促进上皮细胞粘附、迁移和扩散的功能.层粘连蛋白-5与结合上皮和种植体上皮的关系密切,在牙周炎性疾病中有异常表达.本文就层粘连蛋白-5的结构及功能等作一综述.
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结合上皮中细胞因子的表达和作用
结合上皮作为牙周软硬组织交界处特殊的连接和封闭结构,在抵抗细菌侵袭、维持牙周组织完整性方面有重要作用.研究表明结合上皮可分泌和表达多种细胞因子(生长因子、细胞粘附分子和炎症介质等),直接或间接参与组织平衡的调节,在牙周组织的形成发育、损伤修复中发挥重要作用.本文就这方面的研究进展作一综述,旨在探讨牙周病的发病机制,对治疗和预后均具有重要的实用价值.
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种植体龈结合的研究进展
恢复、 稳定、 耐用是种植修复要达到的目标和努力方向.种植体与牙龈结合则是植体抵抗外界细菌侵袭的第一道屏障,此屏障如果有效的抵御细菌侵入,就可以延长种植体在口内存留时间.本文旨在总结种植体与牙龈上皮结合的研究中,何种表面处理的方式对植体与牙龈上皮结合更有利.临床医生在选择种植体时可以作为参考和借鉴.
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牙体预备对牙龈结合上皮损伤后的超微结构观察
目的:研究烤瓷修复体牙体预备对牙龈结合上皮损伤后,牙龈结合上皮在透射电镜下形态学变化的特点.方法:将16 只家兔的32 颗上前牙分别用金刚砂车针和手术刀破坏左侧上前牙的牙龈结合上皮(JE),以右侧同名牙为对照,分别于1、2周取材,利用透射电镜观察结合上皮的组织学改变,并对2 实验组进行对比观察.结果:金刚砂车针处理组和手术刀处理组2 周后牙龈结合上皮附着恢复,两处理组无明显差别,与未经手术处理的JE比较,处理组主要超微结构变化是线粒体空泡化,基膜不完整.结论:牙体预备对牙龈结合上皮的损伤,可导致结合上皮的超微结构改变.
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牙周引导组织再生技术的理论基础和临床应用
牙周引导组织再生技术（periodontal guided tissue regeneration, GTR）是当今新和先进的牙周手术治疗方法，自20世纪80年代初提出概念至今不到20年的时间里，不但持续发展和更新，而且已经在临床工作中被广泛采用，收到了良好的疗效。以下从理论到应用各方面做一介绍：1 GTR技术的基本原理 目前，常用的各种牙周治疗技术和手段的效果大多是牙周再附着(re-attachment)，很难达到理想的牙周新附着(new-attachment)，这是因为从牙周组织的结构特点、组成成分和细胞生物学基础等方面分析，牙周组织损伤破坏后的修复细胞来源有4种，即上皮细胞、牙龈结缔组织细胞、牙槽骨细胞和牙周膜细胞。离体基础研究和在体动物实验结果已经表明，哪种细胞先附着在牙根面上对组织修复的预后有着决定性的作用：如上皮细胞先附着于根面则形成结合上皮愈合，并非生理性修复；如牙龈结缔组织细胞先附着于根面则易导致牙根吸收或根骨粘连；如牙槽骨细胞先附着于根面也易导致根骨粘连；只有牙周膜来源的细胞先附着于根面才能形成理想的生理性修复，即有新生牙周膜穿通（Sharpey）纤维连接于新生的牙槽骨和牙根之间，这是因为在牙周膜中包含有多向分化潜能的未分化间充质细胞，它能在一定条件下分化和新生出功能性牙周软、硬组织成分〔1〕。因此，如何保证由牙周膜细胞优先占据根面成为牙周再生治疗的关键和研究热点。80年代初Nyman〔2〕及Gottlow〔3〕等人提出了引导性组织再生的概念，即用一种屏障膜性材料放置于牙根和牙龈组织瓣之间，以达到物理性阻挡牙龈结缔组织细胞和上皮细胞与牙根先接触，保证由根方残余的牙周膜组织来源细胞和牙槽骨细胞优先占据根面并在其上生长和向冠方爬行。组织学、动物实验和临床研究均证实这种技术能达到较理想的牙周新附着。2 GTR生物膜材料的类型 从总体上分，GTR生物膜材料可分为两大类：一类是不可吸收性生物膜，由聚四氟乙烯加工而成，结构特点为由上下二部分组成，上部的领圈含有微孔，既可允许结缔组织纤维穿过有利生物膜的固位，更重要的是能阻止结合上皮的根向迁移；下部的围裙是密闭型的，能完全阻止牙龈结缔组织与根面相接触；其优点是性能稳定，可根据病情灵活选择放置时间。近来又有新型的钛加强膜应用，能更好地抵抗和支撑牙龈组织，保证膜下再生空间的维持。缺点是需二次手术取出膜材料，增加患者痛苦和费用。另一大类是可吸收性生物膜，包括天然的胶原膜和人工高分子聚合物膜（包括常用的聚乳酸膜、聚羟基乙酸膜等），其优点在于能在体内随时间而逐渐降解，避免了二次手术，减少了损伤。应用实践表明这两大类生物膜均能显著增加牙周附着水平，二者之间并无明显差异；但在可吸收性膜之间比较，似乎高分子聚合物膜效果更佳〔4,5〕。
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新附着、再附着、牙周修复
新附着(new attachment):是牙周炎治疗后的理想愈合方式,即在原来暴露于牙周袋内的病变根面上,经治疗后有新的牙骨质、牙周膜和牙槽骨形成.新形成的牙周膜纤维一端埋入新牙骨质,另一端埋入新牙槽骨,从而形成新的功能性牙周支持组织,而新形成的结合上皮位于其冠方.新附着是真正的牙周组织再生.
