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白念珠菌氟康唑耐药的分子生物学进展
随着白念珠菌临床感染的不断增加,以及以氟康唑为主的唑类抗真菌药物的广泛应用,唑类耐药现象亦随之增多,并成为困扰临床念珠菌感染治疗的难题之一.出现耐药可能的原因包括:①编码药物靶酶羊毛甾醇14 α去甲基酶的ERG11基因的过度表达和点突变导致真菌细胞膜上的麦角固醇的生物合成发生异常;②药物外流泵相关的基因有ATP结合盒转运子基因-CDR1、CDR2和主要易化子超家族基因的过度表达导致药物在真菌细胞内有效浓度的减少.氟康唑耐药的发生可能同时出现不同的机制.
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结核分枝杆菌耐乙胺丁醇的分子机制及其检测研究进展
结核病仍是目前威胁人类的三大感染性疾病之一,耐药结核菌的流行则导致更加严重的危害[1].
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2118份临床标本的细菌及药敏情况
目的:了解我院近年来细菌谱变迁及耐药情况.方法:对2000年3月-2003年2月的临床标本的细菌及其耐药情况进行统计分析.结果:2118份标本检出细菌1113株,阳性率为52.55%.阴性菌55.53%,阳性菌34.50%,真菌9.97%,阴性菌耐药率高的抗菌药有:氨苄西林、哌拉西林、四环素、磺胺等;敏感性好的有头孢三代、氨基甙类;阳性菌对苯唑西林、大环内酯类、氟喹诺酮类耐药几乎过半.结论:临床医生需加强抗菌药的合理应用,控制细菌耐药性的产生.
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儿童腹泻病原学检测及流行病学特征分析
目的:了解苍南地区儿童腹泻病的病原学分布、对抗生素耐药情况及流行病学分析,为临床医师治疗儿童腹泻提供参考.方法:对2011年1月-2013年12月期间该地区在医院门诊及住院治疗628例腹泻患儿的粪便标本进行分离培养,鉴定病原菌种类并用K-B法进行药敏实验,胶体金试纸法检测轮状病毒抗原,对腹泻发生的季节、年龄等流行病学资料进行分析总结.结果:腹泻患儿粪便病原菌的检出率为58.72％,排名前三位的病原菌依次为沙门菌属(43.88％)、大肠埃希菌属(21.17％)和轮状病毒(13.78％).病原菌对抗生素的耐药率呈逐渐上升趋势.夏秋是儿童腹泻病的高发季节,且不同年龄段儿童引起腹泻的病原菌所占比例不同.结论:革兰阴性菌和轮状病毒是儿童腹泻的主要病原菌,由于抗生素不合理使用,病原菌对抗生素的耐药性不断增加.季节和年龄是儿童腹泻病发生的影响因素.对患儿进行病原学诊断,有助于合理用药,提高治疗效果.
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衢州市2010年371株结核分支杆菌耐药状况分析
目的:了解衢州市2010年结核分枝杆菌的耐药状况,为结核病的临床诊治和控制提供参考依据.方法:采用WHO推荐的药敏比例法对371株临床分离的结核分支杆菌进行药物敏感性试验.结果:总耐药率为24％,耐多药率为6.7％；对异烟肼与链霉素的耐药率较高,分别为15.4％、11.9％.结论:衢州市结核杆菌的耐药趋势仍然严峻,相关卫生部门应引起重视.
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鄞州区50株结核杆菌6种耐药基因检测分析
目的:分析鄞州区结核杆菌耐药相关基因的突变特点,评价DNA测序分析在结核分枝杆菌耐药性检测中的价值.方法:利用DNA测序分析方法检测50株结核分枝杆菌的KatG、inhA、rpoB、embB、rpsL及rrs基因片段.结果:50株结核杆菌中,对INH、RFP、EMB、SM耐药的基因突变率分别为88％(包括KatG、inhA基因)、70％( rpoB基因)、100％(embB基因)、55％(包括rpsL、rrs基因).其中INH耐药以KatG基因突变为主,SM耐药以rpsL基因突变为主,KatG基因突变多见于315位点,rpoB基因突变多见于531位点,embB基因突变多见于306位点,rpsL基因突变多见于43位点.结论:通过对结核杆菌常见耐药基因检测,将在短时间内区分敏感株及耐药株,有效指导临床用药,具有重要的意义.
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1999-2000年深圳市涂阳肺结核耐药监测
目的:了解深圳市结核病耐药流行状况.方法:用比例法对1999-2000年所有涂阳结核病人进行耐药实验.结果:初始耐药率33.4%,继发耐药率39.8%.结论:深圳市结核病耐药流行状况较为严重.
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阴沟肠杆菌的感染部位与耐药特性
目的:研究阴沟肠杆菌的感染部位及耐药特性,指导临床合理运用抗生素.方法:用K-B纸片扩散法对从临床各部位标本中分离出的122株阴沟肠杆菌作20种抗生素的药敏试验.结果:阴沟肠杆菌的感染部位广泛,以呼吸道感染率高,达51.6%;122株阴沟肠杆菌对头孢霉素类抗生素、β-内酰胺类抗生素、含β-内酰胺酶抑制剂类抗生素以及对氨基糖甙类抗生素等的耐药率较高,对氟喹诺酮类及四代头孢菌素等抗生素表现出较低的耐药率,对碳青霉烯类抗生素表现出极低的耐药率.结论:阴沟肠杆菌的感染部位广泛,对呼吸道的感染率高;阴沟肠杆菌对临床常用的抗生素表现为高耐药和多重耐药;环丙沙星、左氟沙星、头孢吡肟等抗生素可作为治疗其感染的首选药物,亚胺培南可作为二线用药来治疗其混合感染及其高耐药菌株的感染.
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132例不孕不育女性患者支原体感染及耐药情况分析
目的:不孕不育女性患者生殖道支原体感染及耐药情况分析.方法:回顾分析义乌市妇幼保健院妇科门诊收治的132例不孕不育女性患者的临床资料,并选择68例同期早孕健康妇女为对照组,对入选患者的支原体感染及耐药情况进行分析.结果:观察组患者支原体感染阳性率显著高于对照组患者支原体感染阳性率,差异有统计学意义(P值＜0.05).观察组患者单纯解脲支原体感染率、单纯人型支原体感染率和解脲支原体和人型支原体混合感染率均显著高于对照组患者相应的感染率,差异有统计学意义(P值＜0.05).观察组患者感染支原体对美满霉素、交沙霉素、米诺环素和多西环素耐药性低,对克拉霉素、罗红霉素、阿奇霉素、诺氟沙星、氧氟沙星和左氧氟沙星耐药性高.结论:不孕不育女性患者支原体感染的主要病毒为解脲支原体,其中检出的支原体对美满霉素、米诺环素和多西环素高度敏感,可作为患者治疗的首选药物.
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肠球菌的分离情况及耐药性分析
目的:对我院肠球菌的分离情况及耐药性进行分析.方法:分析2013年1月至2017年1月我院从住院患者分离出2488株肠球菌.对比分析这些菌种的耐药性.结果:粪肠球菌对呋喃妥因、红霉素、左氧氟沙星、盐酸环丙沙星、氨苄西林及青霉素G的耐药率均低于屎肠球菌,差异有统计学意义(P＜0.05).粪肠球菌对四环素、达福普汀、奎奴普丁、利奈唑胺的耐药率反而高于屎肠球菌,差异有统计学意义(P＜0.05).非耐万古霉素的屎肠球菌对10种抗菌药物的耐药率均低于耐万古霉素的屎肠球菌,但只有万古霉素、奎奴普丁、达福普汀和利奈唑胺对比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:肠球菌对抗菌药物呈多重耐药,临床应结合药物敏感试验的结果合理使用抗菌药物,有效控制由肠球菌引起的感染.
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2012-2015年北京市西城区单核细胞增生李斯特菌多位点序列分型及耐药研究
目的 探讨单核细胞增生李斯特菌多位点序列分型(MLST)与耐药性的关联性,确定某些具有高致病性潜能的流行克隆株的存在.方法 采用Kirby-Bauer(K-B)纸片扩散法和E-test药敏试条法对14种抗生素进行药物敏感性试验,以MLST技术对50株菌株进行基因分型.结果 单核细胞增生李斯特菌耐药率为22.00％(11/50),并出现多重耐药株.50株单核细胞增生李斯特菌MLST分析共获得12个型别,以ST9和ST121为优势型别.结论 特定ST型别在食品生产过程中存在特定菌株之间的传递,人源性和食源性单核细胞增生李斯特菌中均发现耐药株,可能存在耐药基因的传递,应加强对具有潜在致病性的ST型别的监测力度.
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宁波市河水环境中沙门菌分布特征和耐药性
目的 了解宁波市人工河水环境中沙门菌的血清型分布特征及耐药情况,为预防、控制相应食源性疾病发生提供科学根据.方法 对河水样品进行离心浓缩、蛋白胨水增菌液增菌、亚硒酸盐胱氨酸增菌液选择性增菌和沙门菌显色平板分离沙门菌,对分离菌株采用系统生化和血清凝集进行鉴定,并采用纸片法检测菌株对8种抗生素的耐药性,对多重耐药菌株和耐β-内酰胺类抗生素菌株扩增主要相关耐药基因.结果 2014年1月至2015年12月,共采集48份河水样品,分离沙门菌株105株,主要血清型为鼠伤寒(26株)、德尔卑(14株)、里森(8株)、肠炎(4株)、阿贡纳(4株)、斯坦利(4株)、阿格玛(4株),其他及未分型沙门菌41株.70株(66.7％)耐至少一种抗生素,对抗生素的耐药率分别为氨苄西林53.3％、四环素42.9％、甲氧苄啶-磺胺甲恶唑32.4％、庆大霉素11.4％、环丙沙星4.8％、头孢噻肟4.8％和产超广谱β-内酰胺酶4.8％.β-内酰胺类抗生素相关耐药基因为TEM型(n=52)、OXA型(n=6)和CTX-M型(n=3),58.1％的菌株1类整合子基因阳性.结论 人工河水环境中沙门菌检出率较高,且部分血清型为重要的食源性致病菌,检出菌也有较高的耐药性,携带多种耐药基因,提示食源性疾病防控中需关注环境细菌的危害.
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产CTX-M-55型超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌全基因组序列耐药和毒力特征研究
目的 基于全基因组序列,对2株食源性产CTX-M-55型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药和毒力分子机制进行研究.方法 采用微量肉汤稀释法对大肠埃希菌食品分离株进行药敏试验,设计产ESBLs基因引物并通过聚合酶链式反应(PCR)扩增筛选出2株产CTX-M-55型ESBLs大肠埃希菌(编号为EC001和EC002)进行全基因组测序,并进行序列型(ST)、质粒复制子类型、血清型、耐药基因和毒力因子识别.结果 2株大肠埃希菌均为头孢类和喹诺酮类抗生素双重耐药ESBLs菌株;全基因组序列分析结果显示,2株菌的血清型均为肠道致病性大肠埃希菌(EPEC) O119∶ H8,ST型分别为ST21(EC001)和ST342(EC002),EC001菌株含有IncFⅡ、IncX1、IncY、Col156和IncI2 5个不相容群质粒,EC002菌株含有IncFⅡ和IncX1 2个不相容群质粒,2株菌株染色体中均携带blaCTx.w55和blaTEM-1412种ESBLs基因.此外,EC001菌株还携带sul2/3、tet(A)/(B)、dfrA12、strA/B、aph(3')-Ⅱa、cml/cmlA1 、floR和oqxA/B耐药相关基因,其染色体喹诺酮耐药决定区gyrA基因存在2个突变位点(S83L,D87H)、parC基因存在1个突变位点(S80I),多粘菌素耐药相关基因pmrE基因存在3个突变位点(D73Y,M185T,S225T);而EC002菌株携带fosA和qnrS1耐药相关基因.2株菌均携带致黏附与脱落(A/E)损伤的肠细胞脱落位点(LEE)毒力岛基因esc、esp、eaeA和tir,且EC001菌株还携带增强菌株在血清中存活能力的iss基因.结论 对2株食源性产CTX-M-55型ESBLs大肠埃希菌进行全基因组测序以及耐药和毒力的分子机制的研究,其结果可为后续开展大肠埃希菌耐药和毒力表型预测、指导食用畜禽养殖过程中抗生素合理使用及耐药菌株防控提供依据.
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北京市食源性非伤寒沙门菌的分子分型和耐药性研究
目的 了解北京市食源性非伤寒沙门菌的分子特征及耐药情况.方法 对2004-2010年北京市食源性致病菌监测网收集的100株沙门菌进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型和抗生素敏感性检测.结果 100株非伤寒沙门菌通过PFGE分型分为62个不同的带型,每个带型包含1～11株菌.抗生素敏感性结果显示,100株菌中有55株菌表现为对至少1种抗生素耐药,其中多重耐药菌株15株.菌株对各抗生素的耐药率为萘啶酸40％、四环素30％、氯霉素15％、庆大霉素10％、甲氧苄啶/磺胺甲恶唑10％、环丙沙星9％、头孢西丁1％、头孢噻肟0％.结论 沙门菌PFGE带型和耐药谱均与血清型存在很高的一致性.提示北京市食源性非伤寒沙门菌的耐药情况比较严重,开展对该菌分子分型与耐药特征分析的联合监测意义重大.
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我国食品中大肠埃希菌O157耐药及PFGE分子分型特征分析
目的 了解我国食品中分离的110株大肠埃希菌O157的耐药及脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型特征,完善我国食品中大肠埃希菌O157菌株特征的基础信息,为该菌的风险评估提供依据.方法 使用琼脂稀释法对确认的110株大肠埃希菌O157进行药敏试验,完成耐药特征的分析.参照美国疾病预防控制中心PulseNet试验方法,对110株大肠埃希菌O157,运用XbaⅠ酶进行酶切并完成PFGE分析,利用BioNumerics软件对分离株的指纹图谱进行聚类分析.结果 ①110株菌中,43株菌至少对一种抗生素有抗性.耐药率多的前三种抗生素依次是四环素(30.0％,33/110),磺胺甲恶唑(29.1％,32/110),萘啶酸(26.4％,29/110);②一共有24个耐药谱,耐两种以上抗生素的菌株有34株,耐3种以上抗生素的多重耐药菌株有32株.常见的三种耐药谱依次是SMX(6),AMP-NAL-SMX-SXT-TET(6),AMP-CHL-NAL-SMX-SXT-TET(4)/AMP-SMX-SXT-TET(4)/TET(4);③大肠埃希菌O157非H7(O157∶ hund)对所测试的抗生素的耐药率明显高于大肠埃希菌O157∶ H7(x2 =72.010 P ＜0.05).其中37株携带了志贺毒素基因的大肠埃希菌O157∶H7仅对磺胺甲恶唑(2.7％,1/37)、萘碇酸(2.7％,1/37)有耐药,没有多重耐药菌株;④通过不同种类食品中大肠埃希菌O157菌株耐药率比较发现,从生猪肉、生禽肉中分离的菌株耐药率相对高于其他食品种类;⑤PFGE分子分型研究显示菌株具有基因多态性,且可以很好将大肠埃希菌O157非H7和大肠埃希菌O157∶H7菌株区分开.结论 我国食品中分离的大肠埃希菌O157耐药现象严重.我们应加强养殖环节和零售环节食源性致病菌,特别是大肠埃希菌O157(包括产志贺毒素大肠埃希菌O157)菌株药敏特征的监测,探明食品与养殖环节菌株耐药的传播关系,并为国家制定科学的养殖业抗生素用药提供依据.
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2007-2016年四川省德尔卑沙门菌耐药与分子分型分析
目的 研究2007-2016年四川省德尔卑沙门菌分子分型和耐药趋势,掌握四川省德尔卑沙门菌污染状况,为暴发预警、溯源调查及抗生素使用策略提供参考数据.方法 运用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和微量肉汤稀释法对2007-2016年四川省自临床病例、食品从业人员、食物中毒样品、养殖动物及零售食品中分离的106株德尔卑沙门菌进行分子分型及14种抗生素的敏感性测试.结果 106株德尔卑沙门菌对8类14种抗生素均有不同程度耐药,人源性和动物源性菌株对四环素、萘啶酸、氯霉素、复方磺胺的耐药率均大于20％.其中人源性菌株对头孢噻肟、环丙沙星、氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢唑啉的耐药率均明显高于动物源性菌株;动物源性菌株对四环素、萘啶酸、氯霉素耐药率均明显高于人源性菌株.经XbaI酶切后106株菌共分为67个PFGE带型,不同年份的临床病例、食品从业人员及零售食品生猪肉分离株具有相同PFGE带型.结论 四川省德尔卑沙门菌分离株耐药率较高,并有逐年上升趋势.PFGE型别呈多样性,部分临床病例、食品从业人员分离株与生猪肉分离株PFGE具有相同带型.
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北京市集贸市场生鲜猪肉肠球菌种水平鉴定及耐药特征
目的 评价和比较不同肠球菌种水平鉴定方法的准确性,了解北京市集贸市场生鲜猪肉肠球菌的种水平分布及耐药特征.方法 利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和VITEK 2 COMPACT两种方法对北京市集贸市场生鲜猪肉肠球菌开展种水平鉴定,两种方法鉴定结果不一致的菌株使用API 20 Strep、16S rRNA和23S rRNA序列分析再次鉴定.比较不同种肠球菌对10种临床常用抗生素的药物敏感性.结果 在5种肠球菌种水平鉴定方法中,16S rRNA序列分析和终结果的符合率高,为100.0％;VITEK 2 COMPACT符合率低,仅为4.0％ (1/25).在86株肠球菌中,粪肠球菌占82.6％ (71/86),其次为希拉肠球菌占14.0％ (12/86).粪肠球菌对环丙沙星(CIP)的耐药率高于希拉肠球菌,差异有统计学意义(x2=10.751,P＜0.01);对四环素(TET)、高浓度链霉素(HLSR)和高浓度庆大霉素(HLGR)的耐药率均高于希拉肠球菌,但差异无统计学意义(TET:x2=3.865,P＞0.05;HLSR:x2=1.608,P＞0.05;HLGR:x2=0.553,P＞0.05),但对红霉素(ERY)和氟霉素(CHL)的耐药率明显低于希拉肠球菌,差异有统计学意义(ERY:x2=20.244,P＜0.01;CHL:x2=14.139,P＜0.01).结论 16S rRNA和MALDI-TOF-MS序列分析技术在肠球菌种水平快速鉴定上有较高准确性,不同种属肠球菌呈现不同耐药特征,本研究为有效监测食源性耐药肠球菌的传播和流行提供了科学数据.
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青岛市屠宰场整鸡中沙门菌污染水平定量检测及耐药性分析
目的 调查青岛市规模化肉鸡屠宰场屠宰后整鸡样品中沙门菌的污染及抗生素耐药谱分布状况.方法 2014年10 ～ 12月在青岛市选择2家规模化肉鸡屠宰场,采用胴体漂洗法定量检测3次共采集的141份屠宰后整鸡样品中沙门菌,根据Kauffmann-White表对沙门菌菌株进行血清学鉴定,应用微量肉汤稀释法检测菌株对11种抗生素的耐药性.结果 整鸡样品沙门菌总体污染率为74.5％(105/141),污染水平3.6 ～＞1 100 MPN/100 g,中位数为43 MPN/100 g;共分离355株沙门菌,血清型分布为肠炎沙门菌220株,印第安纳沙门菌88株和阿贡纳沙门菌19株,以及其他型28株.355株沙门菌分离株的总体耐药率为90.4％(321/355),茶啶酸(NAL)耐药率高(88.7％,315/355).220株肠炎沙门菌中219株(99.5％)耐药,6株(2.7％)为多重耐药株,优势耐药谱为奈啶酸(156株).88株印第安纳沙门菌均耐药,85株为多重耐药株,优势耐药谱为庆大霉素-氯霉素-环丙沙星-萘啶酸-氨苄西林-青霉烷砜/氨苄西林-头孢他啶-头孢噻肟-复方新诺明.19株阿贡纳沙门菌除1株对奈啶酸耐药外,其余18株对所测试11种抗生素均敏感.结论 青岛市肉鸡屠宰场沙门菌污染率较高,血清型以肠炎沙门菌、印第安纳沙门菌和阿贡纳沙门菌为主.沙门菌总体耐药率较高,并呈现多重耐药性趋势.
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进口水产品中副溶血性弧菌耐药性和毒力基因的调查
目的 了解宁波口岸进口水产品中副溶血性弧菌的耐药性和毒力基因分布情况.方法 将分离自宁波口岸进口水产品中的129株副溶血性弧菌作为研究对象,利用K-B纸片扩散法测定细菌对15种抗生素的耐药性,使用PCR方法检测副溶血性弧菌的4个毒力基因(tdh、tlh、trh、toxR).结果 菌株对氨苄西林、羧苄西林、头孢拉定的耐药率分别为90.70％、98.45％和51.17％;对卡那霉素、头孢氨苄、头孢唑啉、头孢呋辛的耐药率分别为1.55％、13.18％、2.33％、20.16％,中敏感率分别为33.33％、52.71％、46.51％、40.31％;其他8种抗生素(四环素、强力霉素、阿米卡星、庆大霉素、头孢哌酮、氧氟沙星、氯霉素、复方新诺明)则比较敏感;毒力基因trh,tdh,tlh和toxR的携带率分别为0％、0.78％、100％和100％.结论 强力霉素、庆大霉素、复方新诺明是治疗由进口水产品引起的副溶血性弧菌感染的首选抗生素;进口水产品中副溶血性弧菌的主要致病毒力基因携带率比较低.
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北京市食源性金黄色葡萄球菌耐药及分子分型研究
目的 分析北京市食源性金黄色葡萄球菌对常用抗生素的耐药情况及其分子分型特征,预防和控制由该菌引起的食源性疾病,为临床合理用药提供依据.方法 收集2010-2012年北京地区食源性致病菌监测网分离到的金黄色葡萄球菌187株,采用微量肉汤稀释法检测金黄色葡萄球菌对8种常用抗生素的敏感性.采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分子分型.结果 116株金黄色葡萄球菌表现出对抗生素耐药,耐药率为62.03％,对抗生素的耐药率为红霉素(ERY) 45.45％、苯唑西林(OXA) 27.81％、克林霉素(CLI) 20.86％、四环素(TET) 13.90％、氯霉素(CHL) 11.76％、环丙沙星(CIP) 6.42％、甲氧苄啶/磺胺甲恶唑(TPM/SMZ) 5.88％.其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)52株、对甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA) 135株.分离到的MRSA中34株菌表现出多重耐药.全部菌株共分为129种PFGE带型,优势带型不明显.结论 食源性金黄色葡萄球菌的耐药和多重耐药普遍存在,PFGE带型分布分散与耐药谱的关联性较差.
