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双试剂酶速率法测定血清同型半胱氨酸及临床应用
目前,同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)的测定方法有很多种,参考法是高效液相色谱法(HPLC),但是其操作复杂,耗时且费用较高;离子色谱法与毛细管电泳法,主要用于实验研究,临床上较少使用;酶联免疫分析法(EIA)是临床上测定同型半胱氨酸水平的常用方法,特点是操作方便,快捷,重复性好,但是大部分操作仍需要手工操作,比较耗时,不适合临床大批量标本同时测定;目前,临床上常用的是荧光偏振免疫法,虽可实现自动化分析,但需专门仪器,且试剂昂贵.
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中国新生儿脐带血TSH水平调查
目的利用1999年全国碘缺乏病监测资料,了解中国新生儿脐带促甲状腺激素(TSH)水平的现状.方法酶联免疫分析法.结果若以新生儿脐带血TSH>5 mU/L的比例<3%为标准,3 1个省份新生儿TSH>5 mU/L的比例均>3%,若以TSH>10mU/L的比例<3%为标准,则有20个省份小于或接近3%.结论根据我国具体情况采用新生儿脐带血TSH>10 mU/L 的比例不超过3%评价人群碘营养状况较为合适.
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杭州地区部分人群甲型肝炎抗体的调查
用酶联免疫分析法检测了杭州地区各年龄组部分人群甲型肝炎抗体.市区341份血清中,脐血抗体的阳性率为75%,学龄前年龄组的抗体阳性率为5%,尔后随年龄递增而上升,8~17岁青少年抗体阳性率为35%,>30龄组达95%.人群甲肝抗体的总阳性率为46%.脐血抗体的滴度为1:500,儿童甲肝抗体阳性血的抗体滴度为1:1000.农村地区303份血清的结果显示,学龄前组抗体阳性率达24%,>30龄组的抗体阳性率96%,人群甲肝抗体总阳性率为55%.
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CLIA与IRMA测定血清TSH的对比分析
TSH是调节甲状腺功能的主要激素,由腺垂体促甲状腺素细胞分泌,并受下丘脑-垂体-甲状腺轴的负反馈调控.血清TSH浓度是判断甲状腺功能的重要指标.目前实验室测定血清TSH浓度的方法有放射免疫法(RIA),免疫放射法(IRMA),酶联免疫分析法(EIA)和化学发光免疫分析法(CLIA).本文对125例标本同时应用CLIA和IRMA测定血清TSH浓度,并进行对比分析,现将结果报告如下.
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乌头碱免疫抗原及多克隆抗体的制备
乌头碱与戊二酸酐反应得半抗原乌头碱-3-基戊二酸单酯,并采用活泼酯法使其与牛血清白蛋白(BSA)结合,制得乌头碱免疫抗原(AC-GH-BSA),经MALDI-TOF质谱分析其蛋白偶联率为18.以此抗原免疫新西兰兔,制得的多克隆抗体能够特异性结合乌头碱,并采用间接酶联免疫吸附法测定抗体效价.结果显示,制备的乌头碱多克隆抗体效价为1;1 280 000.
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血清Reg Ⅳ蛋白在胃癌患者血清中的表达
目的 检测Reg Ⅳ蛋白在胃癌患者血清中的表达,探讨其作为浸润性胃癌检测标志物的可能性.方法 酶联免疫分析法定量检测64例胃癌患者血清中Reg Ⅳ蛋白的表达水平.结果 肿瘤浸润至肌层(T2)和浆膜层(T3)的胃癌患者血清Reg Ⅳ蛋白水平要显著高于肿瘤局限在黏膜层和黏膜下层(T1)者(P<0.01);有淋巴结转移者血清Reg Ⅳ蛋白水平要高于无淋巴结转移者(P<0.05);病理Ⅲ期患者血清Reg Ⅳ蛋白水平高于病理Ⅰ期患者(P<0.05).结论 Reg Ⅳ蛋白可能与胃癌的生长侵袭有关.
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慢性阻塞性肺病患者血清炎症因子与肺功能相关性探讨
目的 研究慢性阻塞性肺病各级肺功能患者血清中IL-1β、IL-8、IL-18、TNF-α的水平以及与肺功能的关系.方法 采用酶联免疫分析法测定慢性阻塞性肺病(COPD)各级肺功能分组患者血清中IL-1β、IL-8、IL-18、TNF-α的水平,并作比较;将4种因子水平与肺功能分级做相关性分析.结果 COPD患者血清中4种炎症因子水平随着肺功能分级递增而逐级升高,各级间差异有高度统计学意义(P<0.01);4种炎症因子水平与肺功能分级表现出高度的相关性(P<0.01).结论 炎症因子的升高是导致COPD患者肺组织慢性损伤以及肺功能持续降低的重要因素.
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肺炎支原体感染与儿童哮喘的相关性
目的 探讨肺炎支原体(MP)感染与儿童哮喘发作的关系.方法 对我院收治的哮喘急性发作患儿102例同时应用:①酶联免疫分析法(EIAS)检测血清中肺炎支原体IgM,IgG;②咽拭子支原体快速培养;③深部痰PCR,MP-DNA检测,支原体感染情况,片以同期80例哮喘缓解期(入选前6个月未发病病例对照或过敏性鼻炎患儿对照).结果 哮喘急性发作患儿MP感染显著高于哮喘缓解组(P<0.01),有统计学意义.结论 MP感染可致哮喘发作,MP感染与哮喘的发病密切相关.
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继发型肺结核血清细胞因子测定临床意义分析
目的:分析继发型肺结核患者中血清细胞因子含量。方法选择86例继发型肺结核患者和39例陈旧性肺结核患者,通过酶联免疫分析法,检测其血清中白介素2受体(IL-2R)、白介素6(IL-6)、白介素8(IL-8)、白介素10(IL-10)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量,分析其与临床特征的关系。结果继发型肺结核患者IL-2R和TNF-α含量高于对照组,P<0.05,其余血清因子检测两组差异无统计学意义(P>0.05)。继发型肺结核患者痰涂片阴性、阳性和强阳性IL-2R含量逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.001);无空洞患者IL-10含量较有空洞患者低,差异有统计学意义(P=0.013);不同结核杆菌类型IL-2R含量差异有统计学意义(P值均<0.05),其余指标差异均无统计学意义。结论血清IL-2R、IL-10和TNF-α可作为继发型肺结核感染及严重程度的有效指标。
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聚乙二醇重组人粒细胞集落刺激因子注射液Ⅰ期临床药代动力学和药效学研究
目的 评价聚乙二醇重组人粒细胞集落刺激因子(PEG-rhG-CSF)注射液在化疗引起的中性粒细胞减少症中的药代动力学(PK)和药效学(PD).方法 入组24例肿瘤患者接受2个周期且剂量相同化疗方案,第1周期为对照周期,第2周期于化疗药物给药结束后48 h皮下注射不同剂量的PEG-rhG-CSF 1次,共设置60、100和150 μg·kg-1 3个剂量组,每组受试患者8例,ELISA法检测受试者血清中PEG-rhG-CSF浓度,并计算PK参数,同时监测受试者CD34+、血常规、血生化指标变化.结果 PEG-rhG-CSF 3个剂量组主要药代参数如下:T12分别为(37.5±7)、(40.8±12)、(80.7±48)h;CL_F分别是(17±9)、(9±4)、(7±2)ml·h-1·g-1;AUC0-t分别是(5,593.6±5,435)、(14,651.3±12,183)、(23,002.5±6,655)mg·h·L-1.第2周期3个剂量组的中性粒细胞绝对值(ANC)低点均值分别为1.9×109、2.3×109、4.2×109 cells·L-1,均比第1周期有所提高.结论 PEG-rhG-CSF在体内呈现非线性药代动力学特征,其在体内维持药效时间长,1次注射即可达到较好疗效.
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时间分辨免疫荧光技术在检验医学中的发展现状
标记免疫分析法创立于60年代初期,是将多种标记示踪技术的高度敏感性和医学免疫学抗原抗体反应的高度特异性相结合的产物,包括放射免疫(RIA),酶联免疫分析法(EIA)、化学发光免疫分析法(CLIA)、电化学发光免疫分析法(ECLIA)、时间分辨荧光免疫分析(TRFIA).TRFIA具有零本底、灵敏度高、重复性好、特异性强、线性范围宽和应用广泛等特点,是继放射免疫分析之后,标记免疫分析法发展的一个新的里程碑,是当代配基分析中有发展前景的分析手段.本文就时间分辨免疫荧光分析技术作如下综述.
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武汉市荨麻疹患儿特异性IgE及过敏原检测
采用酶联免疫分析法,对荨麻疹患者血清中的过敏原特异性IgE抗体进行检测.结果特异性IgE阳性率达64.22%,吸入组过敏原阳性率36.30%,其中以尘螨、粉螨、屋尘为主,食入组过敏原阳性率26.88%,以鱼、蟹、虾为首.尘螨、粉螨、屋尘为本地区荨麻疹患儿的主要过敏原.
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脑小血管病患者血浆血管内皮生长因子水平的变化及意义
目的 探讨脑小血管病患者血浆血管内皮生长因子水平的变化及意义.方法 选择符合纳入标准的83例脑小血管病患者,依据头颅M RI检查结果分为单发腔梗组39例,多发腔梗合并脑白质病变组44例,并选取经头颅磁共振检查无异常的健康志愿者40例为对照组,采用酶联免疫分析法对各组血浆血管内皮生长因子水平测定,并运用Spearman相关性分析对脑小血管病患者血浆血管内皮生长因子与影像学病灶增多的相关性进行分析.结果 与对照组相比,单发腔梗组、多发腔梗合并脑白质病变组血浆血管内皮生长因子均上升,差异有统计学意义(P<0.05);血浆血管内皮生长因子与影像学病灶增多呈正相关(P<0.05).结论 脑小血管病变患者血浆血管内皮生长因子水平存在变化,可能是其自我保护机制之一,且这种自我保护机制的强度与脑小血管病病灶数量呈正相关.
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龙胆苦苷人工抗原的合成与鉴定
目的 为建立龙胆苦苷免疫检测方法,需合成龙胆苦苷(GTP)的免疫抗原和包被抗原.方法 将琥珀酸酐与龙胆苦苷中的羟基进行反应,再利用混合酸酐法将龙胆苦苷半抗原与载体蛋白(BSA和OVA)偶联形成龙胆苦苷-载体蛋白人工抗原,进而利用紫外分光光度计法(UV)、红外光谱法(IR)、聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)鉴定人工抗原,结合三硝基苯磺酸法(TNBS)测定人工抗原的偶联比率,并免疫小鼠,后用间接ELISA方法检测免疫小鼠血清中抗体效价.结果 IR、UV和SDS-PAGE法检测结果均表明龙胆苦苷与载体蛋白偶联成功,TNBS结果表明GTP-BSA(免疫抗原)和GTP-OVA(包被抗原)偶联比分别为9∶1和6∶1,间接ELISA结果表明免疫小鼠血清中抗龙胆苦苷抗体效价均达到1∶12800以上.结论 本实验成功合成并鉴定了龙胆苦苷人工抗原,为龙胆苦苷免疫分析提供了实践基础.
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6 062例次他克莫司全血浓度监测结果分析
目的 通过监测器官移植患者他克莫司全血浓度,观察他克莫司在三联免疫抑制用药方案中的理想治疗范围,为临床合理应用该药提供参考.方法 用ELISA法测定他克莫司全血浓度,对640例患者共6 062例次监测结果进行比较分析.结果 他克莫司全血浓度随移植后时间延长而逐渐下降.移植后1个月内、第2~3个月、第4~6个月和>6个月时,用ELISA法监测他克莫司全血谷浓度的治疗范围应分别为8~15,6~12,5~10和3~8 μg·L-1,较为适宜.结论 常规监测他克莫司全血浓度,参考推荐治疗范围调整给药方案,可获得满意的免疫抑制治疗效果.
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川芎嗪对苯妥英钠血脑浓度以及脑内P-糖蛋白含量的影响
目的 研究不同浓度川芎嗪对苯妥英钠血清、脑组织中浓度以及对脑内P-糖蛋白含量的影响.方法 大鼠腹腔注射盐酸川芎嗪注射液协同灌胃苯妥英钠,采用高效液相色谱法检测大鼠血清及脑浆中苯妥英钠的浓度,采用酶联免疫法测定不同给药浓度的川芎嗪对脑内P-糖蛋白含量的影响.结果 与苯妥英钠对照组相比,盐酸川芎嗪能显著增加血液及脑组织中的苯妥英钠浓度(P< 0.05或P<0.01);降低脑组织中P-糖蛋白含量(P<0.01).结论 川芎嗪能够增加血液及脑组织中的苯妥英钠含量,降低脑组织P-糖蛋白的浓度含量,具有促进苯妥英钠入血和通过血脑屏障的作用.
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促甲状腺素受体抗体化学发光免疫、酶联免疫分析法检测比较
目的 比较促甲状腺素受体抗体采用化学发光免疫、 酶联免疫分析法(ELISA)检测的效果.方法 选取我院2016年10月至2017年10月期间收治的150例甲状腺功能异常患者作为观察组,另选取150例健康体检者作为对照组.采用化学发光免疫及ELISA检测两组的促甲状腺素受体抗体水平,对比分析两种检测方式的结果 .结果与化学发光免疫法相比,采用ELISA的对照组、 甲状腺功能亢进、Graves患者的促甲状腺素受体抗体水平较高(P<0.05).采用ELISA的对照组、 甲状腺功能亢进、Graves患者的促甲状腺素受体抗体检测阳性率与化学发光免疫法比较无统计学差异(P>0.05).化学发光免疫法和ELISA检测共同阳性103例,共同阴性151例,两种检测方法结果存在交叉状况.结论 化学发光免疫法和ELISA检测促甲状腺素受体抗体的效果相当,两者均有优势,临床上将两种检测方法结合应用,可提升诊断效果.
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无偿献血人群乙肝“两对半”模式、HBV病毒载量及ALT特点的初步研究
目的 探讨无偿献血人群乙肝“两对半”、HBV病毒载量及ALT的关系.方法 对50例HBsAg ELISA检测双试剂阳性的无偿献血标本进行乙肝“两对半”定量、HBV-DNA定量及ALT检测,分析不同乙肝“两对半”模式下年龄、性别、ALT和HBV-DNA定量结果的关系.结果 50例乙肝献血者中“小三阳”占86% (43/50)、“大三阳”占12% (6/50).“大三阳”献血者HBV-DNA检出率为100%,高于“小三阳”组的47%(P<0.05).HBV献血者中98%ALT在正常范围. “大三阳”组在年龄、ALT、HBsAg定量、HBcAb定量、HBV病毒载量及HBV病毒检出率上均高于“小三阳”组(P<0.05).结论 无偿献血者乙肝“两对半”模式多为“小三阳”,肝损害程度相对较轻,这大大降低了HBV输血传播的风险,更有利地保障了血液安全.
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变态反应性疾病过敏原特异性及总IgE的检测
目的 为了解临床常见的变态反应性疾病特异性过敏原及血清总IgE水平变化. 方法 采用酶免疫分析法(ELISA)对100例10种常见变态反应性疾病血清过敏原及总IgE水平进行了定量检测. 结果 100例变态反应性疾病患者中过敏原阳性率以尘螨为高,其次为蟑螂和牛奶,且病患血清中总IgE的含量显著高于对照组(P<0.05). 结论 血清过敏原特异性及总IgE酶免疫分析可以帮助临床合理寻找相应过敏原,为变态反应性疾病的预防、诊断和治疗提供依据.
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葛根素含量检测酶联免疫法与高效液相色谱法相关性的研究
目的:ELISA与HPLC法检测葛根素含量的相关性研究.方法:利用SPSS软件分析二者的相关性,并将数据进行线性拟合,得到相应的线性方程.结果:ELISA与HPLC法检测结果之间的P<0.01,相关系数为0.993,二者极显著相关;所得线性方程为Y=0.911X +0.852(R2=0.9865),将ELISA结果带入方程可直接转化为药典法定HPLC检测结果.结论:通过二者相关性的研究,可使ELISA法与药典HPLC方法检测结果相互转化,其结果准确可靠,重复性好,可实现对药材及配方颗粒的高通量快速质量评价.