基质效应在农药残留检测中的研究现状及进展

在农药残留检测分析中,基质效应普遍存在于色谱检测中,从而对目标物质的准确定性与定量带来严重的影响.本文主要从在农药残留分析检测中的基质效应产生的机理、影响因素、其消除和补偿方法以及每种方法存在不足之处进行综述.从基层检测人员的视角,提出可行有效的应对建议,在帮助基层检测人员全面了解基质效应的同时,对实际检测中如何减弱基质效应的影响也有一定的参考价值.

气相色谱法测定蔬菜水果中农药残留的基质效应研究

目前，蔬菜、水果中的农药残留问题日益严重，已严重危害到人民群众的生命安全。中国对于蔬菜、水果中的农药残留问题十分重视，每年都要投人大量的人力、物力用于检测蔬菜、水果中的农药残留。根据农业标准方法NY／T761—2008，蔬菜、水果中的农药残留采用气相色谱法进行测定，然而用该方法测定农药残留很容易产生基质效应。

QuEChERS样品制备方法应用于LC/M S和LC/UV测定橙汁中多菌灵和其他康唑类杀菌剂

本文讨论了橙汁中康唑类杀菌剂（包括多菌灵）的样品制备策略。首先，使用QuEChERS方法的DisQuE产品进行样品制备，用以检测各种水果、蔬菜和果汁中的杀虫剂含量。结合QuEChERS方法，UPLC/MS/MS可以轻易检测出10μg/L（p p b）包括多菌灵在内的5种康唑类杀菌剂，且无需进行进一步的样品制备操作。QuEChERS提取液可以作为前体样品，然后进一步净化并使用液相色谱UV检测器分析其中ppb水平的多菌灵和其他康唑类杀菌剂目标分析物。利用Oasis MCX小柱进行固相萃取（SPE）可对待测物进行富集，并减少基质干扰。该方法通过使用配备UV检测的液相色谱可完成多菌灵样品在低ppb水平的准确定量。Oasis MCX净化操作虽然不是UPLC/MS/MS分析的必需步骤，却能够减少基质效应而得到更加洁净的提取物。因此，使用QuEChERS方法DisQuE产品制备的样品适用于UPLC/MS/MS直接分析，及经混合模式SPE富集和净化之后的HPLC/UV测定。

古洛糖酸内酯在5种有机磷农药检测中的应用研究

目的 评价古洛糖酸内酯在气相色谱-质谱系统中对甲拌磷、二嗪农、乐果、甲基对硫磷、马拉硫磷5种有机磷类农药检测的改善作用.方法 通过比较用不同浓度(0、0.3、0.6、0.9和1.2mg/ml)古洛糖酸内酯-甲醇溶液配置的相同浓度(500ng/m1)有机磷农药峰面积的变化,确定古洛糖酸内酯的佳用量.结果 当古洛糖酸内酯溶液浓度<1mg/ml时,5种有机磷农药在相同检测条件下的峰面积随其浓度的增加呈上升趋势;当浓度等于1mg/ml时.峰面积达到高水平;随其浓度的增加,峰面积无明显变化,且5种化合物变化趋势相同.二嗪农灵敏度提高4倍,甲拌磷灵敏度提高5倍,乐果、甲基对硫磷和马拉硫磷的灵敏度提高10倍,且峰型改善明显,拖尾现象消失.结论 古洛糖酸内酯可以有效提高5种有机磷类农药检测的灵敏度,改善因活性住点引起的峰型拖尾、不对称现象,能够有效补偿基质效应引起的定量偏倚.浓度为1mg/ml时,具有佳的补偿效应.

尿中多环芳烃单羟基代谢产物的液相色谱-质谱测定方法研究

目的 建立同时测定尿泣中萘、菲和芘的单羟基代谢产物1-羟基萘、2-羟基萘、3-羟基菲和1-羟基芘等的液相色谱-质谱检测方法.方法 尿液样品经酶水解后,利用液液萃取进行净化提取,吹氮定容后进液相色谱质谱仪进行分析,利用内标标准曲线法对目标化合物进行定量.结果 利用内标法进行定量分析.提高了方法的重现性和精密度,4种目标化合物的回收率在89.7%-103.O%范围内,批内和批间精密度分别在11 0%-4.2%和1.8%-5.8%范围内;1-羟基萘、2-羟基萘和1-羟基芘的检出限为0.2μg/L,3-羟基菲的检出限为0.1μg/L.结论 液相色谱-质谱法灵敏度高,重现性和回收率好,适用于正常人群和多环芳烃暴露人群尿中1-羟基萘、2-羟基萘、3-羟基菲和1-羟基芘等多环芳烃代谢产物的检测.

丙氨酸氨基转移酶试剂盒在不同检测系统下的可比性

目的 探讨丙氨酸氨基转移酶试剂盒在不同检测系统下的可比性.方法以国家和(或)国际标准物质作为检测样本,分别以12家企业生产的丙氨酸氨基转移酶试剂盒及配套校准品作为目标检测系统,以试剂盒及国际标准物质作为自建检测系统,按说明书要求,分别考察重复性及准确度.结果与在目标检测系统下比较,不同企业丙氨酸氨基转移酶试剂盒在自建检测系统下测定结果的准确度较差.结论自建检测系统与目标检测系统下的丙氨酸氨基转移酶测定结果存在偏差,建议采用企业配套校准品进行校准,以避免基质效应,从而提高检测结果的准确度.建议各企业试剂盒校准品统一溯源,为结果互换互通奠定基础.

高效液相色谱-串联质谱法测定双壳类水产品麻痹性贝类毒素

目的 采用Supelco ENVI-Carb柱净化双壳类水产品中的麻痹性贝类毒素(PSP),建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法检测双壳类水产品中的PSP,为水产品中的PSP检测提供方法依据.方法 选用色谱柱TSK-GEL Amide-80(2.0 mm×250 mm,5μm),以2 mmol/L甲酸铵-50 mmol/L甲酸水和95％乙腈水(含2 mmol/L甲酸铵-50 mmol/L甲酸)为流动相,采用梯度洗脱进行分离.样品用1％乙酸溶液进行提取,上清液加入氨水后(pH=4.0)经Supelco ENVI-Carb柱净化,将洗脱液抽干收集,上机测定.多重反应监测(MRM)模式检测.结果 PSP的线性范围为8.1～705.0 μg/kg,检出限为10 ～ 35 μg/kg,回收率在47.0％ ～91.3％之间.结论 本方法提取效果好、基质效应小,适用于双壳类水产品中麻痹性贝类毒素的痕量检测.

QuEChERS-气相色谱-质谱法测定土豆中109种农药残留

目的 建立土豆中109种农药残留的气相色谱-质谱(GC-MS)检测方法.方法 土豆样品以乙腈提取后,经N-丙基乙二胺(PSA)分散固相萃取净化(d-SPE),采用电子轰击电离源(EI)和负化学电离源(NCI)两种电离模式进行GC-MS测定.结果 各农药的定量限在0.001 ～0.010 mg/kg之间,对空白土豆样品的平均加标回收率为72.7％ ～ 118.7％,RSD在1.1％ ～17.3％之间.在EI模式下,土豆基质对绝大多数农药具有明显的基质效应,因此采用基质匹配标准曲线进行定量分析.应用此方法对欧盟农药残留参比实验室组织的国际比对考核的土豆样品进行定性筛查和定量测定,共检测出13种农药残留,含量范围在0.002～ 1.669 mg/kg之间,所提交的测定结果的Z评分值在-1.00 ～ 1.00之间.结论 本方法简便快速、准确、灵敏度高,适用于农产品中农药多残留的分析.

免疫亲和柱净化-高效液相色谱-串联质谱法测定鱼肉和肝脏中河鲀毒素

目的 采用免疫亲和柱净化鱼肉和肝脏中的河鲀毒素,建立高效液相色谱-三重四级杆质谱串联(LC-MS/MS)方法检测鱼肉和肝脏中的河纯毒素,为水产品中的河纯毒素检测提供方法依据.方法 选用Zic-Hilic色谱柱(150 mm×2.1mm,5μm),以10 mmol/L甲酸铵-0.1％甲酸-乙腈为流动相,采用梯度洗脱进行分离.样品用1％乙酸-甲醇沉淀蛋白提取,上清液加入PBS缓冲液后经免疫亲和柱净化,将洗脱液氮吹至干定容后上机测定.多重反应监测(MRM)方式检测.结果 河纯毒素的线性范围为1.0 ～1 000.0 ng/ml,鱼肉和肝脏中河纯毒素的检出限分别为0.3和0.2μg/kg,回收率在52.4％～72.6％之间.结论 本方法特异性强、提取效果好、无基质抑制效应,适用于鱼肉和肝脏中河鲀毒素的痕量检测.

HT-ED联合UPLC-MS/MS技术分析白头翁皂苷B4的大鼠血浆蛋白结合率

目的:建立血浆中白头翁皂苷B4的分析方法,测定白头翁皂苷B4大鼠血浆蛋白结合率.方法:采用96通道高通量平衡透析系统(HTD 96b)进行透析,利用UPLC-MS/MS测定透析内外液中白头翁皂苷B4的浓度,研究白头翁皂苷B4在大鼠血浆中的血浆蛋白结合率,使用Waters XTerra MS C18色谱柱(2.1 mm×50mm,5μm),流动相0.1％甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱,流速0.7 mL·min-1,柱温40℃,进样量5μL.结果:白头翁皂苷B4在5～2000 ng·L-1线性关系良好,其精密度RSD及准确度均＜8.0％,重复性RSD＜ 9.0％,稳定性的RSD均＜15％;提取回收率和基质效应均在80％～115％.白头翁皂苷B4在低、中、高(6,12,24 mg·L-1)3个质量浓度下大鼠血浆蛋白结合率分别为(95.32 ±0.37)％,(94.32±0.63)％,(88.64±0.37)％.结论:白头翁皂苷B4与大鼠血浆具有较强的蛋白结合率,且结合率不具有质量浓度依赖性.

葛根芩连汤中黄芩活性成分在大鼠体内的组织分布

目的:考察大鼠灌服葛根芩连汤后黄芩活性成分在心、肝、胃、肺、脾、肾、小肠中分布特性.方法:采用LC-MS/MS测定黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷及汉黄芩素在大鼠各组织中的含量,Shiseido CAPCELL PAK C18色谱柱(2.0 mm×100 mm,5 μm),流动相0.1％甲酸乙腈-0.1％甲酸水溶液梯度洗脱,采用ESI正离子检测,多反应监测模式测定.按15 g·kg-1灌胃葛根芩连汤,分别于给药后2,4,6,8,12 h断颈动脉放血处死动物,立即分取心、肝、胃、肺、肾、脾、小肠7个组织处理,测定各组织中活性成分的分布情况.结果:黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷及汉黄芩素的线性范围分别为6.150 ～3 077,3.030～1 515,6.170～3 085,3.140～1 569 μg·L-1,日内精密度RSD5.4％ ～11.7％,日间精密度RSD7.8％ ～11.9％,准确度RE-6.4％～7 5％,各组织中4种活性成分的提取回收率均＞75.5％,基质效应可忽略,大鼠肝脏组织中4种活性成分在放置4℃保存24h,-20℃冰箱内反复冻融1,3次及-70℃冰箱内保存4周条件下稳定性良好.结论:活性成分在各组织中浓度差异较大,大鼠灌服葛根芩连汤后黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷及汉黄芩素主要分布于肝脏、胃及小肠中,其次为肾、心、肺、脾.

LC-MS/MS法测定人血浆中氨氯地平浓度:改善色谱条件消除基质效应

LC-MS/MS法测定人血药浓度的基质效应研究进展

由于血药浓度可反映药物在体内(靶器官)的状况,准确测定血药浓度在设计和优化临床给药方案和药动学研究方面发挥着越来越重要的指导作用.LC-MS/MS因其高灵敏度、高准确性、高专属性的特点在药学研究领域尤其是定量测定血药浓度方面被广泛应用.然而,由于血液成分复杂,基质效应成为影响血药浓度测定结果的可靠性、准确度及精密度的主要因素.本文通过查阅国内外近几年的文献,对血药浓度测定中基质效应的可能机制、评价方法、验证方法及解决方案进行了综述.

高效液相色谱质谱联用检测血浆莎巴比星的基质效应影响因素

目的:考察EDTA-K2和肝素锂抗凝血浆不同前处理方法和液相条件对于高效液相色谱质谱联用法检测莎巴比星及其代谢产物M3基质效应的影响.方法:以含不同抗凝剂的空白血浆配制低、中、高浓度样品,乙酸乙酯或氯仿液液萃取,流动相:A:0.1％甲酸水,B:乙腈,等度洗脱或梯度洗脱.莎巴比星、M3和内标多柔比星检测离子对分别为:m/z 644→130,m/z 646→333.2,m/z 544→360.采用提取后加入法,评价各浓度莎巴比星和M3在2种抗凝剂血浆中基质效应的差异以及方法优化对基质效应的影响.结果:低浓度时,EDTA-K2组莎巴比星和M3基质效应分别为123％和110％,肝素锂组分别为143％和160％.基质效应在不同抗凝剂组间差异有统计学意义(莎巴比星:P ＜0.05;M3:P ＜0.05).氯仿萃取肝素锂抗凝血浆中莎巴比星低、中、高浓度基质效应分别为142％,94％和78％,M3分别为123％,102％和89％.梯度洗脱莎巴比星低、中、高浓度基质效应分别为108％,81％和73％,而M3分别为93％,83％和73％.终低浓度莎巴比星和M3基质效应分别为85.4％和98.7％,高浓度分别为88.5％和96.0％.结论:肝素锂抗凝血浆中莎巴比星及其代谢物M3的基质增强效应更强,且在不同浓度存在较大差异,优化前处理方法以及液相方法后基质效应得到显著改善.

LC-MSn应用于生物样品检测中基质效应的评价

液质联用技术具有灵敏度高,特异性强的特点,巳被广泛运用于生物样品的分析和检测中.然而基质效应问题往往被忽略,事实上基质效应的存在可能极大影响液质联用技术的准确度和精确度,降低实验数据的可靠性.文中通过查阅和比较美国FDA和欧洲EMEA相关指导原则,探讨基质效应存在的原因和消除基质效应的方法,提出基质效应的评价方法和评价指标,供生物样品分析工作者参考.

体内药物分析方法学研究中易忽略的LC-MS/MS法基质效应和逆转化问题

进行体内药物分析前,研究者会按照相关要求做方法学考察,以保证分析方法的准确和可靠.由于生物基质的复杂性,并不是所有影响准确性的因素均能在方法学考察时反映出来.本文总结了两个影响测试准确性的因素:外源性基质(制剂中的辅料、药物的代谢产物及合用的其他药物等)产生的基质效应以及代谢产物的逆转化现象,以期引起相关人员的重视.

液质联用超滤法测定注射用复方荭草中原儿茶酸、异荭草素及野黄芩苷的血浆蛋白结合率

目的 测定注射用复方荭草中原儿茶酸、异荭草素及野黄芩苷的血浆蛋白结合率,为临床安全用药提供参考.方法 以超高效液相色谱-质谱联用为检测手段,结合超滤离心法,由于基质背景的差异分别建立血浆样本及超滤液中的含量测定方法考察原儿茶酸、异荭草素及野黄芩苷与血浆蛋白的结合情况.结果 注射用复方荭草在人血浆中浓度为5～100 μg· mL-1时,原儿茶酸、异荭草素及野黄芩苷与血浆蛋白的平均结合率分别为(65.33±0.61)％+(85.97±0.43)％,(90.09±0.28)％.结论 原儿茶酸与血浆具有中等强度的结合,异荭草素及野黄芩苷与血浆结合力较强,它们与血浆蛋白结合能力在考察的浓度范围内无浓度依赖性.建立的方法灵敏度高,重现性好,操作简单,能够满足定量分析测试要求.

液相色谱-串联质谱在生物样品定量测定中存在的不准确因素分析和对策

液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术是目前生物样本中小分子成分及部分蛋白和多肽定量分析中广泛使用的技术.与LC相比,LC-MS/MS具有分析速度快、分辨率和灵敏度高、方法开发简单、可多组分同时测定等优点.在方法学开发过程中,分析者的主要操作一般是遵循法规的要求逐项进行方法学验证.但是,基于LC-MS/MS定量分析的原理,即使所建立的分析方法完全按照法规的要求进行了验证,在一些方面如不加以注意,也可能带来定量不准确的问题,即所谓的陷阱(生物分析风险).笔者归纳了使用LC-MS/MS进行生物样本分析中常见的与不准确有关的问题,尤其是一些不能通过常规方法学验证发现的问题,包括:生物样本处理过程的逆转化、基质效应、源内裂解以及质荷比相近离子的干扰等.为了解决以上问题,除加强质量体系建设和进行严格的分析方法验证外,还可以采取去除基质效率高的样本处理方法、加强色谱分离、选择合适的离子反应、使用给药后样本进行方法学验证等措施.

化学发光免疫分析甲功五项的基质效应及临床意义

目的：探讨化学发光免疫分析甲功五项的基质效应及临床意义。方法选取甲功五项高值血清，用8种基质山羊血清、马血清、牛血清、生理盐水、水解明胶、正常人血清、甲亢人血清和甲减人血清分别对三碘甲状原氨酸（T3）、甲状腺素（T4）、游离T3（FT3）、游离T4（FT4）和促甲状腺激素（TSH）的高值血清进行倍比稀释，观察基质效应，检测8种基质中蛋白含量，分析蛋白含量与基质效应的相关性。结果T3项目中牛血清、水解明胶有明显的基质效应，T4和FT3项目中牛血清、生理盐水、水解明胶有明显的基质效应，FT4项目中马血清、牛血清、生理盐水、水解明胶有明显的基质效应，TSH项目中均无明显的基质效应，甲功五项中正常人血清、甲亢人血清和甲减人血清均无明显的基质效应；血清中蛋白含量多少与基质效应无关。结论人血清是基质效应小的液体，稀释T3、T4、FT3和FT4高值血清可选择甲减人血清，稀释TSH高值血清可选择甲亢人血清。

酶法测定的影响因素及对策

本文从酶法测定时的干扰、自动分析仪的影响、基质效应等三个方面综述了脱氢酶--紫外法和氧化酶——显色法常见的影响因素及其克服的方法.并且提出了在选用酶法测定时要采用IFCC推荐的或国内公认的方法,才能保证测定结果的准确可靠.