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流式细胞仪检测淋巴细胞亚群糖皮质激素受体的表达:创伤后应激病患者糖皮质激素受体减少
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刺五加皂甙对肝癌细胞细胞动力学的影响
1. 材料与方法:刺五加皂甙(acan-thophopanaxenticosus,ASS)由白求恩医科大学化学教研室提供,1640培养液稀释抽提。人HepG2肝癌细胞株由空军广州医院肝病研究所提供。细胞周期动力学测定:将HepG2肝癌细胞置37℃二氧化碳孵箱培养,调节细胞浓度为1×109/L,分别加入含ASS和RA的1640完全培养液,ASS终浓度为1g/L、0.5g/L及0.25g/L,按上述浓度分为高浓度组、中浓度组及低浓度组,另设细胞空白对照组,每组测定3管。继续培养16h、24h和48h,收集细胞,流式细胞仪检测,记录细胞周期各时相的比例,计算凋亡细胞百分率。
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IL-6对沙眼衣原体K血清型诱导细胞凋亡的影响
目的 探讨IL-6对沙眼衣原体(Ct)K血清型诱导细胞凋亡的影响.方法 用ELISA双抗体夹心法检测衣原体感染细胞分泌IL-6水平变化;用流式细胞仪(FCM)检测凋亡细胞百分率,DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡"梯状带",观察anti-IL-6抗体拮抗IL-6活性对沙眼衣原体K血清型感染的McCoy细胞凋亡的影响.结果 沙眼衣原体K血清型感染细胞分泌IL-6水平明显升高(P<0.05);感染同时加anti-IL-6抗体组在感染36、48、60 h细胞凋亡百分率均显著高于相应的无感染对照组及沙眼衣原体K血清型感染组(P<0.01),且呈时间依赖性(P<0.01).结论 IL-6可部分抑制沙眼衣原体K血清型诱导的McCoy细胞凋亡.
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异鼠李素体外抗肿瘤作用的研究
目的:观察异鼠李素对人细胞株A549、MCF-7、PC3、Caco-2、K562、AD293、Hacat等细胞增殖、分化的影响及相关基因的变化.方法:不同浓度异鼠李素处理上述细胞,光镜电镜下观察细胞形态;进行集落形成实验,3H-TdR掺人实验、生长曲线法、MTT法测细胞生长抑制率;流式细胞仪检测凋亡峰及bax,bcl-2等凋亡相关基因的表达.
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三七总皂甙诱导HL-60细胞凋亡的研究
目的:观察三七总皂甙是否能诱导人白血病细胞株HL-60细胞凋亡及相关基因的关系.方法:取200~1600ug/ml三七总皂甙处理HL-60细胞,光镜下观察细胞形态;MTT法测细胞生长抑制率;流式细胞仪检测细胞周期;免疫组化法检测p53,bcl-2凋亡相关基因的表达,采用真彩色图像分析仪定量分析免疫组化的结果;其结果表明200~1600ug/ml三七总皂甙可抑制HL-60细胞生长,抑制率随着剂量的增加而增加.流式细胞仪检测凋亡峰随药物浓度增大而增加.800,1600ug/毫升三七总皂甙可使p53基因表达上调,bcl-2表达明显下降,这两种基因表达改变有浓度依赖性.结论:三七总皂甙可抑制HL-60细胞生长,诱导其凋亡,其诱导凋亡的作用与凋亡相关基因p53的表达上调,而抗凋亡基因bcl-2表达下调有关.
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以自身免疫性溶血性贫血为首发症状的原发性巨球蛋白血症1例
患者,女,65岁.2004年12月,因面色苍白,并头晕、心累、气促半月入院.查体:中度贫血貌,皮肤巩膜轻度黄染,脾肋下2 cm.血常规WBC 3.6×109·L-1,RBC 2.33×109·L-1, Hb 68 g·L-1, PLT 84×109·L-1;间接胆红素31.6 μmol·L -1,直接胆红素 7.4 μmol·L -1;血清球蛋白正常;清蛋白电泳结果正常,γ带未见M蛋白(monoclonalprotein,MP,M蛋白)单株峰;血IgG 、IgA、IgM正常.B超示脾左肋下 2 cm;骨髓增生活跃,粒系、红系增生受抑,淋巴约占83.7%,其中幼淋8.7%,成熟淋巴63.9%,变淋11.1% ,示淋巴细胞增生性骨髓象.骨髓细胞流式细胞仪检测:CD19(+)、CD20(+).Coobms 试验阳性.诊为自身免疫性溶血性贫血,淋巴细胞增殖性疾病.经肾上腺皮质激素治疗,病情逐渐好转,溶血停止,血色素恢复正常出院.
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沙眼衣原体K血清型诱导细胞凋亡
目的 探讨沙眼衣原体(CT)K血清型对细胞凋亡的影响.方法 用流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡百分率,DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡"梯状带",观察沙眼衣原体K血清型感染36 h,48 h,60h对BGM细胞和McCoy细胞凋亡的影响.结果 沙眼衣原体感染的BGM细胞在36 h,48 h,60 h的细胞凋亡百分率分别为(3.41±0.09)%,(8.96±0.78)%和(16.60±0.41)%,沙眼衣原体感染的McCoy细胞在36 h,48 h,60h的细胞凋亡百分率分别为(2.63±0.11)%,(8.78±0.58)%和(12.93±0.45)%,均显著高于相应的对照组(P<0.01),且凋亡百分率随时间延长而增加(P<0.01).结论 沙眼衣原体K血清型能诱导细胞凋亡.
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新型结核杆菌抗原的免疫原性和保护效力
鉴于结核病仍然是全球人类发病和死亡的主要原因,故迫切需求一种新的疫苗。结核亚单位疫苗已经显示出在人类能诱导强有力的免疫应答,并在HIV地方流行区可作为一种BCG的替代疫苗加以使用。在这项研究中,作者研究了16种不同的新的结核分枝杆菌抗原的保护效力,作者采用肺部结核病小鼠模型进行此项研究。这些抗原被用来作为亚单位疫苗而与双十八烷基溴化铵( DDA )-D (+)同海藻糖6.6 dibenenate(TDB)(DDA/TDB)佐剂配制成制剂,作为单价疫苗接种小鼠或者多价联合疫苗接种小鼠,这些抗原中有6种( Rv1626、Rv1753、Rv1789、Rv2032、Rv2220及Rv3478)抗原同未接种的对照小鼠比较,能够降低小鼠肺部的细菌负荷。这6种抗原中有3种( Rv1789、Rv2220和Rv3478)能够诱导具有保护水平的免疫,而这种免疫与具有高度免疫原性的抗原85 B所诱导的保护相当(相对于幼鼠在肺部产生>0.5 log10 CFU降低)。重要的是当这3种抗原联合应用时,所产生的保护作用基本上与 BCG 所介导的保护作用相当。当或者是Rv1626或者是Rv2032与具有高度保护性的E6-85融合蛋白(抗原85 B 与ESAT-6相融合)联合应用时,观察到的保护作用与BCG疫苗诱导的在气溶胶感染后1个月和3个月的保护水平相当,并且明显地比单独给予E6-85疫苗接种于感染后3个月时的保护水平要高一些,使用多参数流式细胞仪检测,单功能性IFN-γCD4 T细胞和不同的多功能性CD4 T细胞亚类能够分泌多种细胞因子( IFN-γ、TNF-α和/或IL-2),显示这是由3种重要的保护性抗原诱导的,并伴有脾细胞CD4 T细胞的频率要比仔鼠对照组中观察到的结果明显的高。这些具高度免疫原性的TB抗原的鉴定以及抗原联合应用将会使人们改进抗结核策略成为可能。
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溶媒二甲基亚砜对细胞生长与活力的影响研究
目的 观察不同浓度二甲基亚砜( dimethyl sulfoxide,DMSO)对PC12细胞生长、形态与活力的影响,为DMSO作为脂溶性溶媒提供依据.方法 用培养液将DMSO稀释到不同浓度,孵育细胞24 h后,采用显微镜观察细胞形态,四甲基偶氮唑蓝(MTT)显色法和流式细胞仪技术分别检测细胞活力和细胞凋亡.结果 DMSO终浓度低于2%时,PC12细胞能够正常生长并保持形态完整,细胞活力与对照组相比无差异,细胞未发生凋亡,但浓度超过4%时,细胞生长异常,细胞活力显著降低(P<0.01),细胞凋亡率梯度性增高.结论 DMSO对PC12细胞生长的影响存在剂量效应线性相关性, 可作为细胞药物干预实验的脂溶性溶媒.
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中西医结合治疗促进柯萨基病毒感染患者免疫功能恢复观察
柯萨基病毒是一种肠道病毒,可经呼吸道感染,在冬春季可出现局部流行.感染者症状类似上感,但比一般上感患者重,发热较高,少数患者甚至会并发病毒性心肌炎,因此感染者在"非典"流行期间需与"非典"鉴别.我们在"非典"流行期间,从1774例发热门诊病人中筛选出柯萨基病毒感染引起的外感风热证64例,随机分为两组,一组用常规西医治疗,另一组采用中西医结合治疗.两组在入院初和出院前分别用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞表面的各种CD抗原以监测其免疫状态的变化,现总结如下.