大鼠小肠移植动物模型研究进展

小肠移植(SBT)虽然已开展40余年,但由于手术技术、免疫排斥、感染等原因,成功率远低于其他脏器移植,因此建立可靠、重复性好的实验动物模型是非常重要的,其中大鼠小肠移植是应用和研究广泛的动物模型,随着器官移植理论研究的深入和血管吻合技术的进步,大鼠小肠移植模型的成功率和存活率有了很大提高.

大鼠小肠移植模型的改进

目的通过改进技术,建立一种简便稳定存活率高的大鼠异位节段小肠移植模型.方法 "无损伤"游离,原位冷灌注,切取带有腹主动脉和肠系膜上静脉并门静脉的节段小肠,4℃乳酸林格氏液保存1h.游离受体左肾静脉,切除左肾.采用显微外科技术行供体腹主动脉对受体腹主动脉的端侧吻合,门静脉与受体左肾静脉行袖式吻合.移植肠近端关闭,远端外置.结果共进行87次移植实验,其中26次为正式实验.动脉、静脉吻合时间分别为25～30min和5min.26只受体鼠中21只存活超过3d,平均存活(8.93±2.59)d,长存活时间为14d.结论良好的血管吻合和充分补充液体是手术成功、移植肠具有良好活力的关键因素.

移植血管外膜早期NADPH氧化酶激活和新生血管形成

目的：动脉外膜所产生的活性氧和新生血管形成，可能导致和促进病理性血管重构的形成。本课题研究NADPH氧化酶在同种异体主动脉移植模型的外膜血管动态表达和新生血管形成。方法：将F344大鼠胸主动脉移植到Lewis腹主动脉造模。于移植后0．5、3、7和14 d收集移植血管，进行形态学分析、免疫组化和定量PCR检测。结果：血管外膜移植后3 d、内膜7 d增厚。移植血管外膜NADPH氧化酶亚基gp91phox和p47phox蛋白和mRNA表达水平3 d开始升高，14 d达高峰。免疫组化显示，巨噬细胞浸润可能是NADPH氧化酶表达的主要来源。而淋巴细胞浸润在各时点无显著差别。移植血管外膜分离、培养的原代成纤维细胞NADPH氧化酶表达也增加。 siRNA－p47phox沉默p47phox基因后，BrdU掺入和Transwell迁移实验显示，移植血管外膜成纤维细胞的增殖和迁移能力显著受抑制。此外，移植14 d，移植血管外膜增厚伴有新生血管形成明显增加，外膜中微血管密度和血管内膜厚度呈正相关。结论：移植损伤可诱导血管外膜NADPH氧化酶表达和新生血管的形成，移植引起的外膜活性提高可能成为预防、治疗血管病变的靶点。

大鼠腹部血管铸形标本的制作

大鼠的肾脏、肝脏、胰腺移植模型是器官移植领域常用的实验动物模型,这些模型的制作,多选择腹主动脉、后腔静脉、肾静脉等血管重建移植器官血流.为了了解大鼠腹部血管的立体构筑,改良或重新设计大鼠肾移植手术方式,我们设计和制作了大鼠腹部血管铸型标本,取得了良好效果,现将方法介绍如下.

胎猪皮肤前体组织异种移植模型的研究

目的 探讨胎猪皮肤前体组织异种移植模型及移植后发育过程.方法 取精确胎龄为56 d的胎猪皮肤前体组织,分组进行移植,①背部创面模型组:制备成微粒皮后移植到BALB/c裸鼠背部创面,以人尸体皮覆盖;背部皮下模型组:制备成小张邮票皮,植入裸鼠背部皮下;耳廓皮下模型组:制备成微粒皮植入裸鼠耳廓皮下.各组于移植后观察其生长发育特性,并于移植后6周和12周取材行HE染色观察其组织结构形态.新生组织块大小采用双样本t检验.结果 各模型的胎猪皮肤前体组织移植后均能存活并继续生长,背部创面模型组生长能力显著大于耳廓皮下模型组,新生皮肤组织均具有真皮和表皮,耳廓皮下模型的真皮附属器仅见毛囊(毛发),偶见皮脂腺,未见汗腺,但是背部创面模型组及背部皮下模型组不仅能发育成毛囊(毛发)、还见大量皮脂腺和汗腺.结论 背部创面移植模型适合于胎猪皮肤前体组织异种移植及移植后发育的研究.

良恶性前列腺组织移植模型的发展和评价

三种裸鼠胰腺癌建模方法的比较

目的 建立人胰腺癌细胞株BXPC-3裸鼠皮下瘤、腹腔内种植转移瘤以及原位移植瘤模型,探讨模型建立方法及其生物学特性.方法 采用直接皮下瘤细胞注射法建立胰腺癌裸鼠皮下瘤模型,开腹后瘤块包埋法建立腹腔内种植转移瘤模型,瘤细胞悬液置入胰腺包膜下建立原位移植模型,观察三种模型接种阳性率及瘤块生长的速度,对移植瘤做病理检查.结果 3种模型构建的阳性率分别为:皮下瘤模型47％(7/15),腹腔种植转移瘤模型100％(14/14),原位移植模型100％ (14/14).后两种模型1月后发生肝转移、腹膜转移、肠系膜转移,3组间肿瘤生长速度比较,原位移植模型快,腹腔种植转移模型其次,皮下瘤模型慢,差异具有统计学意义(P＜0.01).病理检查符合胰腺低分化腺癌.结论 成功建立了胰腺癌BXPC-3细胞株的皮下移植瘤模型、腹腔种植转移模型及原位移植模型,显示了各种模型的独特优势,为胰腺癌生物学行为的基础研究及治疗提供了实验平台.

人原发性胃恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植模型的建立

目的为探讨胃恶性淋巴瘤的发病机制和治疗方法提供理想的动物模型.方法采用人胃恶性淋巴瘤术中原发灶和肝转移灶新鲜瘤组织植入裸小鼠胃黏膜下层,观察原位移植成瘤率,移植瘤的侵袭和转移率,进行形态学、染色体核型和流式细胞分析.结果 13例人胃恶性淋巴瘤标本9例移植成功.依据WHO新分类标准,从中筛选出1株人胃原发性非霍奇金B细胞恶性淋巴瘤裸鼠原位移植肝转移模型HGBL-9903,1株人胃原发性非霍奇金B细胞恶性淋巴瘤裸鼠原位移植模型HGBL-9904和1株人胃原发性霍奇金B细胞恶性淋巴瘤裸鼠原位移植模型HGBL-9902.免疫组织化学示CD19、CD20、CD22、CD45和CD79a均阳性.染色体众数范围75～87条,流式细胞分析示DI值1.23～1.47,均为异倍体.3株模型分别传至83代、87代和89代,共移植裸鼠785只;自第3代起肿瘤的移植生长率和液氮冻存复苏成活率均为100%.HGBL-9903肝转移率为100%,脾转移率为36.7%,淋巴结转移率为57.6%.人胃恶性淋巴瘤在裸鼠胃壁内自主侵袭性生长,侵袭破坏胃壁各层组织结构.发生血液(肝,脾)转移,淋巴转移和腹腔内种植转移.结论 HGBL-9904、HGBL-9903和HGBL-9902三株人胃原发性恶性淋巴瘤裸鼠原位移植模型,移植瘤的组织病理学、超微结构、DNA含量测定及染色体核型分析结果与来源人胃恶性淋巴瘤细胞相一致.完整的模拟了人胃恶性淋巴瘤患者的自然临床过程.

小鼠待移植皮片的制备方法

小鼠皮肤移植技术作为一种重要的移植模型,应用较为广泛[1,2],以往制取小鼠皮片采用修剪制皮法,易剪破皮肤,且皮片厚薄不一、制取时间长.本文介绍一种快速有效地制取小鼠待移植皮片的方法,以期为进行与皮肤移植相关的医学实验提供帮助.

脑肿瘤动物模型

由于脑肿瘤生物学特性及血脑屏障的存在,脑肿瘤的治疗效果较差.随着分子生物学技术及遗传学等学科的发展,建立了越来越多的脑肿瘤动物模型,因此对脑肿瘤的生物学特性也了解得越来越多,为临床治疗脑肿瘤打下了坚实的基础.目前建立的脑肿瘤动物模型主要有:化学物质诱导模型,病毒诱导模型,移植模型(同种移模型、异种移植模型),基因模型(转基因模型、基因敲除模型、基因突变模型),这些模型在临床治疗脑肿瘤上发挥了极大的指导作用,但是各种模型都有它的优缺点,因此有待进一步探讨.

脑肿瘤动物模型

由于脑肿瘤生物学特性及血脑屏障的存在,脑肿瘤的治疗效果较差.随着分子生物学技术及遗传学等学科的发展,建立了越来越多的脑肿瘤动物模型,因此对脑肿瘤的生物学特性也了解得越来越多,为临床治疗脑肿瘤打下了坚实的基础.目前建立的脑肿瘤动物模型主要有:化学物质诱导模型,病毒诱导模型,移植模型(同种移模型、异种移植模型),基因模型(转基因模型、基因敲除模型、基因突变模型),这些模型在临床治疗脑肿瘤上发挥了极大的指导作用,但是各种模型都有它的优缺点,因此有待进一步探讨.