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脓毒症常见病原菌多重实时PCR检测方法的建立
目的 建立可同时检测脓毒症患者血液中肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和白假丝酵母菌的多重实时PCR方法.方法 根据各病原菌基因组保守序列设计引物和探针,建立多重实时PCR检测方法.对建立的多重实时PCR检测方法进行特异性、敏感性和灵敏度分析,并使用该法对112份脓毒症血培养阳性标本进行验证.结果 成功建立脓毒症常见病原菌的多重实时PCR检测方法.此方法特异性、敏感性良好,灵敏度达10-5 ng/μl,与标准检测方法(血培养加生化鉴定)相比,缩短了20 h.112份临床血培养阳性标本中,目标病原菌83例,多重实时PCR检出80例阳性;非目标病原菌29例,多重实时PCR检测均为阴性.检测结果显示,该方法特异性达100％,敏感性达96.39％.结论 该多重实时PCR检测方法具有快速、高效、灵敏、特异的优点,可用于临床重症监护室患者血液常见感染病原菌的诊断.
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银离子吸附剂治疗妊娠期念珠菌性阴道炎80例临床观察
念珠菌性阴道炎也称外阴阴道假丝酵母菌病,病原体80%～90%为白假丝酵母菌,白假丝酵母菌为条件致病菌.30%孕妇阴道中有此菌寄生,由于瘙痒难忍,严重影响孕妇的身心健康,因其造成阴道口周围红肿,影响会阴侧切口的愈合,还可能造成新生儿鹅口疮.
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化脓性关节炎穿刺液中分离出白假丝酵母菌
2011年4月收治化脓性关节炎患者1例,从穿刺液中分离到1株白假丝酵母菌,现报告如下.病历资料患者,男,32岁.两年前,右膝关节曾受过外伤.1年前,因右膝关节疼痛,活动受限,曾到当地私人诊所、乡镇卫生院等多处求治,均诊断为"化脓性关节炎",多次穿刺,抽出5～10ml淡黄色、半透明液体.经"抗炎对症"治疗,效果不佳.近1个月来,疼痛加重,随来定西第二人民医院就诊.
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茶树油对白假丝酵母菌抑菌效果
目的 观察茶树油对白假丝酵母菌的抑菌效果及其抗真菌作用机理.方法 采用纸片扩散法和生化指标检测方法进行了试验研究.结果 以含1-萜品-4醇与桉叶素为主要成分的茶树油对白假丝酵母菌低抑菌浓度为体积分数1.56%;对该菌低杀菌浓度为体积分数25%.茶树油处理的白假丝酵母菌的菌体蛋白质含量明显减少,菌体胆固醇及甘油三脂含量也明显低于正常对照菌株.结论 茶树油在较低浓度条件下具有明显抑制和杀灭作用,茶树油有干扰菌体蛋白质、胆固醇及甘油三脂的合成作用从而产生抗菌作用.
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成熟生物膜与白假丝酵母菌耐药性相关
目的 观察白假丝酵母菌生物膜形成过程中耐药性产生的变化情况. 方法 利用载玻片法形成白假丝酵母菌生物膜结构,倒置显微镜观察不同阶段的生物膜形态,用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)微量稀释法检测浮游状态白假丝酵母菌耐药性,用二甲氧唑黄(XTT)减低法获得生物膜耐药性的变化情况. 结果 白假丝酵母菌耐药性随着生物膜的成熟不断增强,比游离态菌高100倍以上. 结论 成熟生物膜与耐药性增强有明显正相关性.
关键词： 生物膜 耐药性 NCCLS微量稀释法 XTT减低法 白假丝酵母菌 -
MBL抑制白假丝酵母菌诱导DC成熟和细胞因子分泌
目的:探讨甘露聚糖结合凝集素(mannan-binding lectin,MBL)对白假丝酵母菌(candida albicans,C.albicans)诱导的树突状细胞(dendritic cells,DC)成熟及分泌细胞因子的影响.方法:从健康成人外周血分离能粘附塑料的单核细胞(MNC),应用常规方法体外诱导未成熟DC(imDC),然后在有或无C.albicans和不同浓度(1-20mg/L)天然人MBL条件下继续培养2d;用倒置显微镜观察DC的形态,以FACS分析DC的表型,用ELISA检测DC培养上清中TNF-α和IL-6的含量;FACS分析MBL与C.albicans及imDC的结合,Westem blot分析IκBα磷酸化及p65/NF-κB细胞核移位.结果:ELISA检测发现,高浓度MBL(10-20 mg/L)能够下调C.albicans诱导人DC表面分子CD83和CD86表达,并抑制C.albicans诱导的TNF-α和IL-6分泌;FACS检测显示,MBL不仅能够与C.albicans结合而且能够与imDC结合;Western blot分析显示,MBL对C.albicans诱导的IκBα磷酸化及p65/NF-κB细胞核移位均有显著的抑制作用.结论:MBL能够以配体结合形式通过调节NF-κB信号途径抑制C.albi-cans诱导的DC成熟及细胞因子分泌,提示MBL能够在C.albicans诱导的免疫反应中起调控作用.
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药物流出泵抑制剂联合咪康唑清除白假丝酵母菌生物被膜的研究
目的 观察咪康唑分别与两种药物流出泵抑制剂联用清除耐药株(persister)的效果.方法 白假丝酵母菌参考株YEM30,在96孔板中形成生物被膜(biofilm),CDR1抑制剂Enniatin B、CDR1/CDR2抑制剂Milbemycins α25单独或联合与咪康唑作用后,采用菌落形成单位(CFU)计数的方法统计耐药株的数量.采用SAS8.0统计软件包对数据进行q检验.结果 咪康唑分别联合两种药物流出泵抑制剂清除生物被膜耐药株的效果明显优于咪康唑单独使用(P<0.001),其中咪康唑与Enniatin B联用效果更佳.结论 咪康唑与药物流出泵抑制剂联合应用具有清除生物被膜中表现型耐药株的作用,这为提高抗真菌治疗的效果提供了一条新途径和新思路.
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焦作市第二医院感染白假丝酵母菌患者的耐药变迁
近年来肿瘤患者及自身免疫性疾病患者的增多,以及临床广谱抗菌药物的不规范使用使真菌感染逐年增多.真菌对临床抗真菌药物耐药性使真菌感染的治疗困难越来越大,其中以白假丝酵母菌为常见.
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白假丝酵母菌简便培养方法的建立及临床应用研究
目的：探讨真菌简便培养方法的临床应用价值。方法收集2006年1月-2013年12月我院门诊及住院患者疑似真菌感染标本，建立真菌简便培养基对收集标本进行培养，并将其与法国梅里埃培养基进行比较；对比新鲜自制简便培养基与2～8℃放置6个月后简便培养基的真菌检出率。结果在2011-2013年收集的307份标本中，简便培养基白假丝酵母菌的检出率为38．4％，而梅里埃培养基的检出率为26．1％，自制简便培养基对阴道分泌物标本、痰标本白假丝酵母菌检出率优于梅里埃培养基，且差异均有统计学意义（P均＜0．05），而尿标本和咽拭子标本中两种方法白假丝酵母菌的检出率差异均无统计学意义（P均＞0．05）。白假丝酵母菌在两种培养基上的菌落形态相似，但梅里埃培养基上白假丝酵母菌菌落显示蓝色，而自制简便培养基白假丝酵母菌菌落呈奶油色，并且均能抑制大部分杂菌的生长。痰标本、阴道分泌物标本及其他标本的白假丝酵母菌检出率在新鲜与2～8℃放置6个月后培养基中差异均无统计学意义（P均＞0．05）。在2006-2010年共2840份阴道分泌物标本中，检出白假丝酵母菌以外的其他致病菌475份，阳性检出率为16．7％（475/2840），其中白假丝酵母菌与其他致病菌双重感染者有87例，阳性检出率为3．1％（87/2840）。结论真菌简便培养基制作简单、成本低廉，对白假丝酵母菌有良好选择性，可向农村基层医疗机构推广使用。
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白假丝酵母菌引起抗菌药物相关性腹泻的临床检验特点及耐药情况分析
目的探讨白假丝酵母菌引起抗菌药物相关性腹泻（antibiotic－associated diarrhea， AAD）的临床检验特点和耐药情况。方法选择我院2014年4月－2015年7月住院的102例AAD患者进行回顾性分析，对所有AAD患者的粪便标本进行细菌培养和鉴定，其中感染白假丝酵母菌的患者（51例）作为观察组，未感染白假丝酵母菌的患者（51例）作为对照组，并对两组患者的相关生化指标的变化情况和药敏试验结果进行统计学分析。结果观察组患者血钾、血钠和空腹血糖水平均明显高于对照组患者，而白蛋白水平明显低于对照组患者，且差异均有统计学意义（P均＜0.05）。药敏试验结果显示，观察组患者对氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、两性霉素B、氟胞嘧啶、青霉素G和左氧氟沙星的耐药率低于对照组、敏感率高于对照组，而万古霉素和呋喃妥因的耐药率高于对照组、敏感率低于对照组。结论白假丝酵母菌引起的AAD较其他菌种引起的AAD严重。对AAD患者早期给予粪便标本的细菌培养和鉴定以明确菌种，有助于指导临床合理使用抗菌药物，提高抗菌药物使用的安全性，对白假丝酵母菌引起的AAD的诊疗具有重要意义。
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396株女性生殖道感染细菌的分布及耐药性分析
目的：了解女性生殖道感染病原菌的分布及耐药情况，为临床治疗提供依据。方法收集我院2011年1月-2014年6月妇科门诊及住院的396例患者的宫颈分泌物标本进行分离培养，采用DL-96细菌测定分析系统对其进行鉴定和体外药敏试验，采用WHONET 5.5统计软件对药敏试验结果进行统计分析。结果396株病原菌中，革兰阳性球菌137株（34.60％），革兰阴性杆菌102株（25.76％），真菌157株（39.65％），分别以粪肠球菌（37／396，9.34％）、大肠埃希菌（50／396，12.63％）和白假丝酵母菌（108／396，27.27％）的检出率高。药敏试验结果显示，粪肠球菌对红霉素的耐药率高，为91.89％，对替考拉宁的耐药率低，为0.00％；大肠埃希菌对氨苄西林的耐药率高，为80.00％，对亚胺培南和美罗培南的耐药率低，均为0.00％；白假丝酵母菌对伊曲康唑的耐药率高，为59.26％，对两性霉素B的耐药率低，为1.85％。结论女性生殖道感染病原菌种类较多，了解致病菌菌群和耐药性特点，有助于临床医生合理、安全使用抗菌药物。
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ERG11基因突变介导白假丝酵母菌对唑类药物耐药的研究进展
白假丝酵母菌是健康人群皮肤、黏膜表面共生的微生物,是一种条件致病性真菌.在免疫缺陷患者可引起口腔、阴道黏膜感染或严重的系统性感染,危及生命,如艾滋病(AIDS)患者晚期往往会发生口咽念珠菌病(OPC).
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随机扩增多态性DNA技术用于白假丝酵母菌临床分型
白假丝酵母菌亦称白念珠菌,是医院感染常见的病原菌.本研究应用随机扩增多态性(RAPD)DNA技术用于白假丝酵母菌分型,以了解其流行病学意义.
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医用微生态制剂分离菌株对白假丝酵母菌芽管形成的抑制作用
目的:研究市售医用微生态制剂分离的单菌株对白假丝酵母菌芽管形成的影响.方法:分离市售益生菌产品单菌株10株,采用结晶紫芽管染色法,通过计算出芽率检测各益生菌分离菌株培养上清,活菌体和热灭活菌体对白假丝酵母菌的出芽抑制.结果:五种微生态制剂单菌的中性培养上清对白假丝酵母菌的芽管生成均具有显著的抑制作用(P＜0.01);长双歧杆菌1,嗜酸乳杆菌及两株芽孢杆菌的活菌可以抑制出芽;热灭活菌体无法抑制白假丝酵母菌的出芽.结论:市售医用微生态制剂具备抑制白假丝酵母菌出芽的抑菌效果.
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肝病住院患者真菌感染调查与药敏分析
目的 观察肝病住院患者真菌感染情况,并分析其药敏结果.方法 选择医院2011年1月-2015年12月收集标本中培养出真菌1000例住院肝病患者进行研究,收集患者的真菌培养结果及药敏试验结果.结果 1000例肝病患者分离出1410株真菌中,酵母样真菌1189株占84.3%,丝状真菌221株占15.7%;1189株酵母样真菌中,痰及咽拭子感染737株占62.0%,胸腹水和尿感染分别为146株占12.3%和140株占11.8%;221株丝状真菌中,痰及咽拭子感染202株占91.4%.酵母样真菌中,对氟康唑、伊曲康唑、两性霉素和伏立康唑的耐药率分别为12.1%、2.3%、0.3%和1.9%;丝状真菌中,对氟康唑、良性霉素、伊曲康唑和伏立康唑的耐药率分别为93.7%、16.7%、5.9%和4.5%;酵母样真菌对氟康唑、伊曲康唑、良性霉素和伏立康唑的耐药率均低于丝状真菌(P<0.05).结论 住院肝病患者以酵母样真菌感染为主,白假丝酵母菌的感染率高,且对抗真菌药的耐药率均低于热带假丝酵母菌.
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移植肾并发白假丝酵母菌感染性假性动脉瘤二例
移植肾假性动脉瘤是肾移植术后较为少见的血管并发症,在肾移植人群中的发生率约为0.95%[1] ,其中真菌感染所致的移植肾假性动脉瘤更为罕见[2]. 然而,单纯的假性动脉瘤破裂出血及难以控制的真菌感染会造成移植物功能减退或丧失,甚至导致受者死亡,应引起足够重视,早期诊断和血管重建尤为重要,术后抗真菌治疗亦是关键. 中国人民解放军北部战区空军第463 医院自1994年10月至2017 年1 月,共完成同种异体肾移植500 余例,其中发生移植肾动脉真菌感染性假性动脉瘤2例(2例受者供肾均来自同一供者),现报道如下.
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体外诱导耐环吡酮胺白假丝酵母菌的实验研究
目的 拟建立白假丝酵母菌对环吡酮胺的耐药模型.方法 采用浓度梯度递增的环吡酮胺体外诱导妇产科门诊外因阴道假丝酵母菌病患者阴道分泌物分离的白假丝酵母菌,参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐的M27-A3方案的微量液基稀释法方法对试验中0.03、0.06、0.125、0.25、0.5、1、2、4和8 μg/ml各不同药物诱导浓度下的菌株进行药物敏感性检测.结果 用环吡酮胺诱导白假丝酵母菌20代,菌株对环吡酮胺的低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)≤0.5pg/ml.结论 采用环吡酮胺浓度梯度递增方法,在20代诱导中不能使白色假丝酵母菌株对其产生耐药.
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白假丝酵母菌对人阴道上皮细胞TLR4 mRNA表达的影响
目的 探讨白假丝酵母菌对人阴道上皮细胞Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)mRNA表达的影响.方法 用白假丝酵母菌热灭活孢子刺激体外培养的人阴道上皮细胞12 h和24 h,应用实时定量逆转录聚合酶链反应(QRT-PCR)检测细胞TLR4 mRNA的表达水平.结果 正常人阴道上皮组织和体外培养人阴道上皮细胞均表达TLR4 mRNA.白假丝酵母菌热灭活孢子刺激12 h,上皮细胞中TLR4 mRNA表达明显高于对照组和刺激24 h组P<0.05,刺激24 h组与对照组比较,无明显差异P=0.50.结论 人阴道上皮细胞构成性表达少量TLR4,白假丝酵母菌刺激12 h时人阴道上皮细胞表达TLR4 mRNA增加,推测TLR4可能在人阴道上皮细胞识别白假丝酵母菌和启动防御感染的早期起一定作用.
关键词： 白假丝酵母菌 Toll样受体4 上皮细胞 阴道 外阴阴道假丝酵母菌病 -
孕期不同阶段阴道假丝酵母菌的分型研究
孕期妇女的阴道假丝酵母菌检出率高于非孕期妇女[1],且以白假丝酵母菌为常见.与非孕期妇女比较,由于用药限制、孕期机体的生理变化等因素而使孕期妇女阴道假丝酵母菌感染难以治愈.我们利用随机扩增多态性和限制性酶切分析两种方法,对孕期不同阶段的阴道白假丝酵母菌基因型进行研究,旨在了解孕期不同阶段妇女阴道白假丝酵母菌是否存在基因型差异,为进行针对性的药物治疗奠定基础.
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早产儿白假丝酵母菌感染并发侵袭性泌尿系统真菌感染五例临床分析
目的 探讨早产儿白假丝酵母菌感染并发侵袭性泌尿系统真菌感染的早期诊断及治疗体会.方法 回顾性研究8例白假丝酵母菌感染的早产儿、血培养均为白假丝酵母菌,常规行尿常规、尿培养、泌尿系统彩色多普勒超声及肾脏CT检查.结果 8例血培养阳性患儿中5例尿培养有白假丝酵母菌生长,尿常规均有白细胞升高,4例彩色多普勒超声检查可见肾窦强回声改变,CT检查可见肾窦区斑片状高密度影,其中1例并发肾脓肿改变.确诊病例均给予氟康唑静点治疗,其中2例由于疗程短,出现复发.结论 早产儿白假丝酵母菌感染易并发侵袭性泌尿系统真菌感染,且症状隐匿,需常规多次行尿常规、尿培养及泌尿系统影像检查,选择敏感抗真菌药物,要足疗程治疗,疗程至少6～8周,防止复发.
