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布鲁氏菌与耶尔森氏菌感染的鉴别诊断试验研究(Ⅱ)
目的用PCR和酶联试验鉴别布氏菌与耶尔森氏菌感染.方法以不同种布氏菌及不同型耶尔森氏菌分别感染动物,不同时间采样进行PCR和DAgS-ELISA及其他血清学方法进行检查.结果两菌感染血清的SAT都出现了不同程度的交叉,RBPT及DAgS-ELISA几乎无交叉反应.布氏菌与耶尔森氏菌O:9型的B.abortus36KD蛋白基因引物的PCR有明显交叉反应.结论用RBPT或DAgS-ELISA对两菌感染的鉴别是有益的.用B.abortus 36 KD蛋白基因引物的PCR鉴别两菌感染是困难的,而且有交叉扩增.
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耶尔森氏菌培养方法和检测技术
致病性的yersinia菌包括y.pestis,y.pseudotuberculosis,y. enteroolitica,非致病性的yersinia包括y.intermedia,y.frederksenii,y.kristensenii,y.mollaretii,y.bercovien,y.aldovae,y.rohdci,y.ruckeri,其中y.mollaretii和y.bercovien是近年来从y.enterocolitia血清型中单独被命名的菌.在三中致病性的yersinia菌中,y.pseudotuberculesis和y.enterocolitica为肠道致病菌,在经粪口途径进入动物体内之前,自由的生活在淡水系及潮湿的自然环境下和食物中,引起感染大部分为胃肠炎症状,偶而侵入肠膜淋巴结进入血液、肝脏、脾脏引起伤寒症状,生存环境决定着基因的表达和致病性,37℃几乎丧失运动性,而在25℃左右运动性强[1].鼠疫菌能引起鼠疫,更多交替式地隐匿在蚤体或宿主体内.
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吉林省耶尔森氏菌分布调查研究
目的调查吉林省鼠疫历史疫区和非鼠疫地区的家畜及野生动物Y.enterocolitica分布情况.方法采集家畜的粪便及野生动物盲结肠、直肠内容物、肠系膜淋巴结等.进行细菌培养.结果从猪粪便中分离Y.enterocolitica 6株,鼠疫历史疫区、非疫区各3株,从鼠疫疫区黄鼠盲结肠内容物分出3株.结论首次从黄鼠盲肠内容物分离出Y.enterocolitica,具有重要的流行病学意义.
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两种培养基对病原性耶尔森氏菌检测的效果观察
目的观察VYE和IN培养基检查病原性Yersinia(耶尔森氏菌)属菌的作用效果.方法通过VYE和IN培养基培养后挑选可疑菌落进行生化鉴定实验,鉴别病原性Yersinia属菌.结果VYE培养基检出率比IN培养基高,二者并用于病原性Yersnia属菌很容易与非病原性Yersinia属菌区别.结论VYE和IN两种培养基并用,方法简便易行,建议推广应用.
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广东省65株耶氏菌的系统鉴定与鼠疫疫源地性质的探讨
目的 鉴定65株耶氏菌,了解菌株的生物学特性,抗原抗体与鼠疫菌的相关性,探讨疫源地的现状和性质.方法65株菌用3种致病性耶氏菌诊断血清,分别做玻片、试管凝集试验、生化试验、生长特性,挑选14株菌做毒力因子、毒力基因、致病性、交叉免疫原性、动物试验和血清学、药敏试验.结果 63株小肠结肠炎耶氏菌血清型42株O:3、21株O:9,中间型1株,假结核血清Ⅱ型1株；VW+2株,VW± 10株,VW-2株；14株菌FlAg、F1Ab全阴；小肠结肠炎5株菌均有2个毒力基因(ail、ystA)阳性,VW+和VW±对小白鼠、家兔有致病性,动物感染一种耶氏菌后有交叉免疫力,抗原、活菌交叉吸收鼠疫抗血清后血清学IHA、RIHA没有交叉性,常用抗菌素敏感.结论 目前动物感染小肠结肠炎菌普遍,猪感染高,局部已爆发流行,假结核菌偏低,鼠疫处于静息期.
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吉林省家畜耶尔森氏菌分布调查
目的调查在吉林省家畜中耶尔森氏菌的分布情况.方法采集家畜的粪便,进行细菌分离培养.结果检出致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌66株,未检出假结核耶尔森氏菌.结论在吉林省存在致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌.
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106 耶尔森菌感染后反应性关节炎发病机理研究进展
小肠结肠炎耶尔森氏菌感染后引起的反应性关节炎中，关节的局部免疫反应非常重要。耶尔森氏菌热休克蛋白Yehsp60是T细胞识别的免疫优势抗原，引发局部CD4+T细胞反应和CTLT细胞反应，然而它能否引起机体对自身热休克蛋白60的自身免疫尚不清楚。耶尔森氏菌LPS可诱导自身反应克隆的激活。本文综述该领域的研究现状。
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布鲁氏杆菌与0∶9型耶尔森氏菌血清学交叉反应观察及其可疑病例的鉴别诊断
自1996年开始,在我省部分地区布鲁氏杆菌病(布氏菌病)监测中发现试管凝集试验阳性,血清滴度甚至相当高,但却无临床症状的布氏菌病病人.为此,我们应用同源抗体滴度高于异源抗体滴度的理论,利用确诊布氏菌病患者血清,观察了布鲁氏杆菌与0∶9型耶尔森氏菌(以下简称Y0∶9)的血清学交叉反应,再对人群布氏菌病"阳性”血清进行鉴别诊断,结果如下.
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用TaqMan探针实时定量PCR法快速检测鼠疫耶尔森菌
目的建立一种快速、准确、特异的定量检测鼠疫耶尔森菌的方法.方法针对鼠疫耶尔森菌特异的染色体标识序列设计引物和TaqMan探针,进行实时定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)分析,优化反应体系,检测其灵敏度、特异性和重复性.结果以EV76灭活培养物为对象,检测灵敏度可达每反应体系0.08 CfU;30株非鼠疫菌株的检测结果表明,对照菌株均为阴性,检测特异性良好;对同一样品进行17次重复检测,其循环阈值的标准偏差为0.35.结论 TaqMan探针法能够灵敏、特异、稳定地对鼠疫耶尔森氏菌进行定量检测,为鼠疫监控、诊断提供有力手段.
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UDPE法检测鼠疫菌的应用研究
［目的］评价UDPE(UDG-Duplex PCR-EIA)技术在鼠疫菌检测中的效果和应用价值。［方法］用UDPE方法对鼠疫菌和其它耶尔森菌等17株细菌及对鼠疫菌不同的菌量梯度进行检测。以鼠疫菌接种动物，并取动物模型的不同脏器组织同时进行分离培养和UDPE检测比较。［结果］ UDPE检测系统可以特异性地对鼠疫菌进行检测；在梯度稀释菌液提取的模板检测中，灵敏度可达0.05个菌/μl；对于接种动物的肝、脾等脏器材料阳性检出率显著高于分离培养法。［结论］ UDPE技术是一套特异性强、灵敏度高的检测系统，可有效地应用于鼠疫菌的检测和鉴定。
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三种致病耶尔森氏菌Hsp60基因序列的比较研究
目的研究3种致病耶尔森氏菌Hsp60基因序列的差异.方法根据文献和基因库中的Hsp60基因序列设计了两对PCR引物,获得Hsp60基因的部分序列.将扩增产物纯化回收,克隆至pGEM-T载体后进行测序.结果用CLUSTAL X软件进行序列分析,发现3种耶尔森氏致病菌的Hsp60基因序列较为保守,其中鼠疫耶尔森氏菌和假结核耶尔森氏菌的该基因序列在所研究范围内仅相差一个碱基.结论 3种菌的Hsp60基因保守,不足以在此区间设计种特异性探针.小肠结肠炎耶尔森氏菌与鼠疫耶尔森氏菌和假结核耶尔森氏菌的Hsp60基因序列差异较大,易与这两个种区分开.
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克氏耶尔森氏菌败血症2例误诊分析
近年来，我们曾遇克氏耶尔森代菌败血症误诊2例，现摘其中1例报告如下。 患者女，56岁，因腹痛、腹泻2周，伴发热40天，于1999年7月15日来院。发病以来，患者明显消瘦，体重下降约7kg，伴纳差、乏力、夜间盗汗。20年前患肺结核已治愈。体检：T37.3℃，P96次／分，R22次／分，Bp120／70mmHg（lmmHg＝0.133kPa）。
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2010年登封市外环境感染性腹泻病原菌监测分析
目的 了解登封市外环境中感染性腹泻病原菌的变化趋势及病原分布特点,为制定预防措施提供参考依据.方法 收集外环境(家畜、家禽粪便)标本,送实验室检验.利用SPSS软件对检测数据进行统计分析.结果 采集外环境标本431份.121份阳性外环境粪便标本中,O157有22份(18.18%),耶尔森氏菌有51份(42.15%),OX+有34份(28.1%).结论 初步揭示了登封市外环境中存在的感染性腹泻流行病原谱.
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由携带耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌引起的腹泻
2000年8月28日,途经沈阳的某旅行团发生腹泻爆发,发病76人,主要症状为腹痛、腹泻,经流行病学资料分析、实验室检测,证实为由携带小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛的大肠杆菌引起的腹泻爆发.
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从腹泻病人粪便中分离小肠结肠炎耶尔森氏菌的检出报告
从1 32份腹泻病人标本中检出小肠结肠炎耶尔森氏菌13株,分属3个血清型,O:3型6株,O:6型3株,O:9型4株.
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两种耶尔森氏菌对动物的致病和交叉免疫性试验
目的 了解广东省鼠疫静息期小肠结肠炎、假结核耶尔森氏菌的致病和交叉免疫性.方法 致病性试验:菌株分皮下注射、饮水感染昆明小鼠,观察其发病和死亡情况,然后剖检.交叉免疫性试验:提取假结核鼠株冻溶抗原加佐剂研磨免疫家兔,然后分别用小肠结肠炎0∶3猪株和鼠疫菌EV76株攻毒.试验均设对照组.结果 0∶3猪株皮下注射小鼠5只全部死亡,饮水感染死亡3只,2只发病;0∶9鼠株皮下注射死亡2只,饮水感染仅发病;假结核鼠株两种途径感染仅发病.假结核鼠株免疫的家兔能抵抗0∶3猪株攻毒,用EV76株攻毒未能产生鼠疫F1抗体.结论 0∶3猪株毒力强,0∶9鼠株弱,耶尔森氏菌对动物有交叉免疫力.
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广东省非鼠疫疫源地三株耶尔森氏菌生物学特性的研究
目的 研究三株耶尔森氏菌生物学特性,查明该菌株与鼠疫菌的免疫原性关系.方法 采用生长特性、糖醇酵解试验、毒力因子和免疫原性交叉等试验方法.结果 试验菌株的菌落呈圆形光滑、G-短杆菌、22℃有动力、37℃无动力,生化测试葡萄糖、蔗糖、尿素、甘露醇和山梨醇阳性,鸟氨酸出现不稳定,而赖氨酸、鼠李糖、明胶和乳糖呈阴性,对氯霉素和链霉素呈高度敏感,而青霉素有耐药性,三株菌与鼠疫菌和假结核菌的抗血清不起凝集作用,而且与鼠疫反向试验的诊断液不发生凝集.三株菌抗血清与鼠疫间接血凝试验的诊断液不起凝集作用.结论 153和271菌株属小肠结肠炎菌(生物Ⅰ型),而272菌株属中间型耶氏菌,它们与鼠疫菌和假结核菌无免疫原性交叉反应.
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4种小肠结肠炎耶尔森菌培养方法的研究与评价
目的 建立一种高效的临床培养方法检测腹泻病人粪便中的小肠结肠炎耶尔森氏菌.方法 用改良培养方法和3种传统培养方法同时检测200份腹泻病人粪便,以比较其检出率.结果 改良培养方法(YSE-CIN))从 200份腹泻粪便中检测到18份含有小肠结肠炎耶尔森氏菌的样本,而另外3种方法(PBSS-SS法、PAE-NYE法、PAE-DYS法)的阳性例数分别为3、5、8.经McNemer检验,改良方法与其他3种方法的检出率具有显著性差异.结论 改良方法比其他3种方法的检出率更高,可应用于临床.
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广东省鼠疫疫源地小肠结肠炎耶尔森氏菌生物学特性研究
目的 了解广东省鼠疫疫源地8株耶尔森氏菌的生物学特性及与鼠疫菌的免疫原性关系.方法 采用生长特性、糖醇酵解、毒力因子、药敏、动物试验和免疫原性血清学等试验.结果 试验菌株菌落圆形光滑,G-短杆菌,22 ℃有动力、37 ℃无动力;生化试验6株菌与标准株基本一致,2株菌有偏差;8株菌均对氯霉素、痢特灵、舒普深、环丙沙星、先锋噻肟、庆大霉素敏感;2株菌为VW+株,3株为VW±株,VW+及VW±株对小白鼠有致病性;8株菌均与小肠结肠炎菌0∶3血清型的抗血清呈强凝集反应,与鼠疫菌、假结核菌的抗血清不凝集;每株菌免疫血清进行鼠疫IHA试验均阴性.结论 8株菌为小肠结肠炎菌0∶3血清型,其中6株为典型菌株,2株为非典型菌株,血清学上与鼠疫菌、假结核菌无免疫原性交叉反应.
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广东省鼠类耶尔森氏菌现状分析
目的了解广东省鼠疫疫源地和非鼠疫疫源地鼠类耶尔森氏菌的分布和相互抑制的情况.方法分别采用间接血球凝集试验(IHA)、放射免疫沉淀试验(RIP)进行鼠疫耶尔森氏菌特异性F1抗体检测,并分别对鼠类回盲部内容物和肝、脾、舌进行冷增菌后,以选择培养基分离.结果广东省鼠疫疫源地未检出任何一种耶尔森氏菌,而非鼠疫疫源地区检出小肠结肠炎耶尔森氏菌2株,中间型耶尔森氏菌1株. 结论广东省鼠疫疫源地处于静息期,在鼠疫疫源地区和非疫疫源地区耶尔森氏菌存在互相抑制现象.
