乳腺化生性癌临床病理特点及预后影响因素分析

目的 乳腺化生性癌(metaplastic breast carcinoma,MBC)是一种罕见的乳腺恶性肿瘤,对于其治疗模式及预后的研究文献较少.本研究分析MBC患者的临床病理特点及预后影响因素,旨在探讨该病基于浸润性乳腺癌治疗模式下的治疗结果与预后,以进一步探讨其合理治疗模式.方法 回顾性分析天津医科大学肿瘤医院1980-01-01-2012-12-31诊断为MBC的84例患者的病例资料,采用Kaplan-Meier法计算生存率并Log-rank法检验和单因素分析.结果 全组84例中,1例患者未治疗,单纯手术者17例,手术联合化疗者48例,手术联合放化疗者16例,手术联合放疗者2例.男1例,女83例.年龄22～87岁,中位年龄53岁.肿块直径20～130 mm,中位直径30 mm.79例患者描述了腋淋巴结转移情况,腋窝淋巴结阳性29例(36.7％),阴性50例(63.3％).全组16例出现复发或转移,占病例的19.0％.全组免疫组化雌激素受体(estrogen receptor,ER)阳性为21.7％(13/60),孕激素受体(progesterone receptor,PR)阳性为21.7％(13/60),人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)阳性为20.4％(11/54).p53表达阳性率为61.9％(26/42),Ki-67表达阳性率为95.6％(43/45),血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达阳性率为76.9％(10/13).按2012年版乳腺肿瘤世界卫生组织(World Health Organization,WHO)分类标准,癌伴间叶分化31例,鳞状细胞癌27例,混合性化生癌10例,梭型细胞癌8例,低度恶性的腺鳞癌7例,纤维瘤病样化生性癌1例.按照美国癌症联合委员会(American Joint Committee on Cancer,AJCC)临床分期标准,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期患者分别为12例(14.3％)、54例(64.3％)、17例(20.2％)和1例(1.2％).全组患者5年无疾病生存率(disease-free survival,DFS)和总生存率(overall survival,OS)分别为74.4％及72.8％.单因素分析显示,腋窝淋巴结阴性的患者DFS和OS明显好于阳性者(均P<0.001),临床分期Ⅰ～Ⅱ期患者DFS和OS好于Ⅲ～Ⅳ期患者(POS=0.002,PDFS=0.004),放疗后照射野外无进展的患者DFS和OS也明显好于出现进展的患者,均P<0.001.结论 手术是治疗MBC的主要方法,术后建议化疗,具有放疗指征的患者应术后放疗,可有效的局部控制肿瘤,有利于预后.

食管鳞癌根治术后失败模式分析

目的 食管鳞癌单纯手术治疗疗效欠佳,放化疗是术后常见的巩固治疗手段,但疗效仍存争议.本研究评估Ⅱ～Ⅲ期食管鳞癌根治性切除术后的失败模式及术后放化疗的有效性.方法 回顾性分析山东大学附属山东省肿瘤医院2008-10-27—2014-11-12行食管癌根治术的256例患者病例资料.随访评估首次治疗失败部位(包括区域复发和远处转移),分析术后失败模式与临床病理因素及术后辅助治疗方式之间的关系.统计分析采用SPSS 22.0进行.结果 256例术后随访的患者中,胸腔内局部复发162例(63.3％),吻合口复发22例(8.6％),纵隔淋巴结转移51例(19.9％),远处转移53例(20.7％),其中局部复发合并远处转移者28例(10.9％),中位复发转移时间11.8个月(2～57个月).Ⅲ期患者局部复发率高于Ⅱ期(69.9％vs 56.1％,χ2=5.258,P=0.022),影响远处转移率的因素中,不同的分化程度差异有统计学意义,χ2=12.660,P=0.002.生存分析表明,TNM分期(χ2=4.226,P=0.040、肿瘤分化程度(χ2=11.147,P=0.001)、有无术后辅助治疗(χ2=13.817,P<0.001)是影响无病生存期的独立因素.结论 Ⅱ～Ⅲ期食管鳞癌根治术后失败模式以局部区域复发尤其是纵隔淋巴结转移为主,肿瘤分化程度、临床分期、阳性淋巴结与术后复发转移相关,适当的术后辅助治疗能显著改善淋巴结阳性或Ⅲ期食管癌患者的无病生存期.

副乳腺癌23例临床病理特点及预后分析

目的 副乳腺癌是一种罕见且预后较差的恶性肿瘤.本研究通过探讨副乳腺癌的临床病理特点以及预后情况,以提高对该病的认识.方法 回顾性的分析新疆医科大学附属肿瘤医院1992-03-01-2016-12-31经病理确诊为副乳腺癌的23例患者以及同期经系统抽样的276的常规乳腺癌临床病理资料,分析两者的临床病理特点及预后情况.结果 两组患者就诊时肿块大小(χ2=4.752,P=0.029)、淋巴结转移率(χ2=13.894,P<0.001)、临床分期(χ2=19.978,P<0.001)、术后接受放射治疗(χ2=33.729,P<0.001)和复发或远处转移率(χ2=65.359,P<0.001)相比较差异均有统计学意义,副乳腺癌的10年总生存率和10年无病生存率与常规乳腺癌相比均偏低,χ2值分别为21.37和27.71,均P<0.001.结论 副乳腺癌诊断主要依靠临床表现,影像学检查和病理结果,治疗应遵循以手术为主的综合治疗原则.早期发现,早期诊断,早期治疗是提高副乳腺癌预后的关键.

干细胞介导的酶前药策略与肿瘤靶向治疗研究进展

目的 传统化疗在杀灭肿瘤细胞的同时也给患者机体带来了较大的毒副作用,严重影响患者生活质量.近年来,人们利用干细胞定向肿瘤迁移特性将其作为细胞载体,配合酶前药体系共同杀灭肿瘤细胞实现了较好的效果,本文综述了近年来干细胞介导的酶前药策略在肿瘤靶向治疗中的发展现状.方法 应用PubMed分别以"Stem cell,En-zyme,Prodrug,Tumor"等为关键词检索相关文献,检索时间为建库开始到2017-08,共检索到有关英文文献89篇,主要选取近10年文献纳入分析.检索CNKI、维普、万方等中文数据库未发现有关文献,故未纳入中文文献.纳入标准:(1)应用于肿瘤治疗的干细胞及酶前药体系;(2)干细胞介导的酶前药策略治疗肿瘤的原理;(3)干细胞介导酶前药体系治疗肿瘤的疗效与存在问题.依据纳入标准,符合分析的文献共有38篇.结果 干细胞介导的酶前药策略治疗肿瘤的原理在于通过基因工程使干细胞携带抗肿瘤前药的代谢酶基因,干细胞进入体内后定向迁移至肿瘤部位并在肿瘤局部表达药物代谢酶,全身给予抗肿瘤前药后,肿瘤局部可以生成浓度高的细胞毒性代谢产物可起杀肿瘤细胞作用.此法不仅可以提高治疗效率还可以减少药物治疗带来的毒副作用.结论 干细胞介导的酶前药策略为肿瘤靶向治疗提供了一种新方法,也是近年来肿瘤领域研究的热点之一.随着研究的深入,干细胞介导的酶前药体系将有望更好地应用到肿瘤靶向治疗中.

EBV抗原特异性T细胞体外抗淋巴瘤细胞机制研究

目的 Epstein-Barr病毒(Epstein-Barr virus,EBV)在淋巴瘤的发生发展中发挥重要作用,EBV相关淋巴瘤预后较差,在临床治疗过程中面临挑战.本研究旨在体外培养获得EBV抗原特异性T细胞,检测其功能及体外抗肿瘤能力.方法 采集2015-02-22-2016-05-01北京大学肿瘤医院淋巴瘤科10例结外NK/T细胞淋巴瘤患者外周血,分离获得外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),体外培养获得EBV抗原特异性T细胞.检测特异性T细胞比例,测定EBV抗原特异性T细胞对自体淋巴母细胞系(lymphoblastoid cell lines,LCL)杀伤作用以及对来自EB病毒潜伏膜蛋白1(Epstein-Barr virus latent membrane protein1,LMP1)、LMP2和EB病毒核抗原1(Epstein-Barr virus nuclear antigen,EBNA1)不同部位肽段的反应性.结果 采集10例EBV阳性NK/T细胞淋巴瘤患者外周血,体外培养发现随时间延长,抗原特异性T细胞比例升高.培养2周后的EBV抗原特异性T细胞,在再次遭遇抗原后,效应细胞比例可以达到(6.837±1.031)％,与阴性对照(1.447±0.566)％相比较,差异有统计学意义,t=5.622,P=0.001.EBV抗原特异性T细胞可以识别已经证实的LMP2表位.抗原特异性T细胞中同时含有EBV抗原反应性CD4和CD8细胞.体外杀伤试验证实,EBV抗原特异性T细胞能够杀伤患者自体来源的EBV病毒转化的B细胞产生淋巴母细胞细胞系(lymphoblastoid cell lines,LCL),但对人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)不相合的异体LCL却不具备杀伤活性,即具有HLA限制性.结论 EBV抗原特异性T细胞有可能用于治疗EBV相关淋巴瘤,为后续开展相关体内研究提供理论基础.

非小细胞肺癌CD73表达与微血管密度及预后相关性研究

目的 5′胞外核苷酸酶(ecto-5′-nucleotidase,CD73)是胞外腺苷生成的关键酶,在多种肿瘤组织中高表达并与肿瘤的发生发展、转移扩散及不良预后有关.CD73在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达与肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD)关系尚未完全阐明.本研究应用免疫组化法检测CD73与MVD,分析二者之间的相关性及与临床病理特征的关系和对预后的影响.方法 选取山东省医学科学院附属医院2008-06-01-2014-06-01经手术切除的72例NSCLC标本.应用免疫组化法检测CD73在NSCLC组织中的表达,用CD34标记微血管进行MVD计数.结果 CD73阳性表达率为70.8％(51/72),其中弱阳性12.5％(9/72),中等阳性34.7％(25/72),强阳性23.6％(17/72).CD73表达强度在TNM分期Ⅲ期强于Ⅰ、Ⅱ期(秩均值46.00>31.45),z=-2.931,P=0.003;有淋巴结转移强于无转移(秩均值44.57>30.74),z=-2.884,P=0.004.肿瘤组织中TNM分期Ⅲ期MVD计数为49.72±10.44,Ⅰ、Ⅱ期为31.55±8.75,t=-7.836,P<0.001;肿瘤直径>3 cm MVD计数为39.82±12.41,肿瘤直径≤3 cm为31.53±12.02,t=-2.423,P=0.018;有淋巴结转移组MVD计数为47.13±10.76,无淋巴结转移组为31.24±9.56,t=-6.600,P<0.001;CD73阳性组MVD计数为41.71±11.592,阴性组为28.52±10.543,t=-4.498,P<0.001.CD73阳性表达与MVD计数呈正相关,r=0.674,P<0.001.通过Kaplan-Meier单因素生存分析发现,CD73阳性组生存率较低,χ2=4.09,P=0.043;多变量Cox回归分析发现,CD73阳性表达(HR=0.378,95％CI:0.172～0.831)是一个不良预后的独立预测指标.结论 CD73在NSCLC中高表达,与不良预后和肿瘤新生血管生成正相关.CD73有望成为一个新的有价值的肿瘤治疗靶点.

ATF3在结肠癌组织中表达及其对HCT116细胞增殖和迁移影响机制探讨

目的 激活转录因子3(activating transcription factor 3,ATF3)是转录因子ATF/CREB(cyclic AMP-respon-sive element binding protein)家族中的一员,在正常细胞中表达低,但是通过信号刺激可以诱导其短时间快速表达发挥作用.本研究旨在探讨ATF3在结肠癌中的表达及临床病理特征相关性,揭示ATF3过表达对结肠癌HCT116细胞Wnt/β-catenin信号通路和EMT的影响.方法 利用免疫组化法分析ATF3在结肠癌组织中的表达及其临床病理特征相关性.分别向HCT116细胞转染空载和ATF3过表达质粒:采用细胞增殖检测试剂盒8(cell counting kit 8,CCK8)法检测ATF3对细胞增殖的影响;利用划痕实验观察ATF3对细胞迁移的影响;采用蛋白质印迹法检测ATF3过表达对Wnt/β-catenin信号通路和EMT过程中蛋白的影响.结果 ATF3在正常结肠黏膜上皮中高表达,在癌组织及转移癌中低表达,χ2=27.2,P<0.001.细胞实验显示,转染前两组细胞增殖差异无统计学意义,t=0.60,P=0.566;与对照组相比,观察组48 h的吸光度值降低,t=4.21,P=0.003.转染质粒48 h观察组划痕愈合速度变慢;转染48 h观察组ATF3蛋白表达量明显多于对照组;观察组β-catenin、c-myc、Cyclin D1、TCF7 L2和N-cadherin蛋白表达减少,GSK-3β和E-cadherin增多.结论 ATF3过表达可以抑制结肠癌细胞的增殖和迁移;ATF3过表达可以抑制Wnt/β-catenin信号通路和上皮-间质转化,抑制结肠癌的发生及转移;ATF3可能在结肠癌的发生发展起着重要的作用.

肺癌相关间充质干细胞分离及生物学特征探讨

目的 目前,关于肿瘤来源间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的研究多是肝癌、卵巢癌、胃癌和乳腺癌等,肺癌来源MSCs报道较少.本研究目的在于建立分离人肺癌相关MSCs的方法,进而对肺癌相关MSCs的生物学特征进行初步探讨.方法 采用组织块分离法分离人肺癌组织来源的MSCs,倒置显微镜下观察细胞形态,绘制细胞生长曲线.利用慢病毒感染的方法建立表达绿色荧光蛋白(CopGFP)的人肺癌细胞A549细胞株(A549-GopGFP)和H1299细胞株(H1299-GopGFP).在体外,采用Brdu增殖实验分别检测肺癌MSCs对A549和H1299增殖的影响;划痕和Transwell实验分别检测肺癌相关MSCs对A549和H1299迁移和侵袭能力的影响.在体内,接种肺癌相关MSCs和A549细胞,观察肺癌MSCs对A549细胞生长的影响.结果 成功建立组织块法分离人肺癌相关MSCs的方法.所分离的细胞呈成纤维样形态,并呈漩涡式生长;其CD73(99.8％)、CD90(99.8％)、CD105(57.1％)和CD166(98.0％)呈阳性表达,CD14、CD19、CD34、CD45和HLA-DR均呈阴性表达,且具有向成骨细胞、脂肪细胞和成软骨细胞分化的能力.体外,肺癌相关MSCs对A549细胞(t=0.246,P=0.818)和H1299细胞(t=0.331,P=0.757)增殖均无明显影响,但对A549细胞(t=3.377,P=0.028)和H1299细胞(t=7.107,P=0.002)的迁移有显著促进作用,也能显著增强A549细胞(t=6.170,P=0.004)和H1299细胞(t=13.16,P<0.001)的侵袭能力.体内实验表明,肺癌相关MSCs促进A549细胞早期成瘤.结论 利用组织块法能够分离获得人肺癌相关MSCs,此细胞影响体内肺癌细胞的生长,显著提高体外肺癌细胞迁移和侵袭能力.

RNA干扰沉默AMPK对前列腺癌细胞生物学行为影响

目的 细胞能量代谢的调控因子腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)与肿瘤的发生、发展和转移密切相关,且在前列腺癌中研究较少.本研究探讨siRNA转染下调AMPK表达对人前列腺癌细胞PC-3生物学行为的影响.方法 将合成AMPK干扰序列转染至人前列腺癌细胞系PC-3作为实验组(AMPK抑制组),并以空白组(未做任何处理)、阴性对照组(转染阴性干扰片段)作为对照,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测各组细胞中AMPK表达情况,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞中Ki-67和VEGF-A的mRNA表达情况.用细胞增殖检测试剂盒8(cell counting kit 8,CCK8)法检测细胞的增殖能力,Transwell法检测AMPK对细胞侵袭、迁移能力的影响.结果 AMPK抑制组细胞AMPK的mRNA表达水平为0.083±0.039,与空白组(1.014±0.194)和阴性对照组(0.841±0.302)相比显著降低,差异有统计学意义,F=34.786,P<0.001;AMPK抑制组细胞AMPK的蛋白表达水平为0.725±0.041,与空白组(2.108±0.400)和阴性对照组(1.461±0.405)相比显著降低,差异有统计学意义,F=13.238,P=0.006.AMPK抑制组细胞Ki-67的mRNA表达水平为0.731±0.045,与空白组(1.034±0.304)和阴性对照组(0.838±0.234)相比,差异无统计学意义,F=1.424,P=0.312;AMPK抑制组细胞VEGF-A的mRNA表达水平为0.542±0.162,与空白组(1.009±0.170)和阴性对照组(1.163±0.546)相比,差异无统计学意义,F=2.662,P=0.149.沉默AMPK基因后,CCK8结果显示,PC-3细胞的增殖能力在48、72和96 h显著降低,F值分别为273.206、290.868和90.377,均P<0.001;AMPK抑制组细胞侵袭数目为36.866±9.226,与空白组(56.333±7.087)和阴性对照组(51.866±5.717)相比显著降低,差异有统计学意义,F=27.843,P<0.001;AMPK抑制组细胞迁移数目为39.533±9.132,与空白组(64.200±4.901)和阴性对照组(57.266±4.787)相比显著降低,差异有统计学意义,F=55.863,P<0.001.结论 特异性抑制AMPK能够引起人前列腺癌细胞PC-3生物学行为的改变,抑制PC-3的增殖、侵袭和迁移能力,从而抑制肿瘤的发生发展,但其分子机制可能不是通过调控Ki-67和VEGF-A而发挥作用.

网络药理指导下大黄对慢性粒细胞白血病作用机制研究

目的 近年来,随着蛋白质相互作用网络与分子对接技术等方法论的不断创新,为探索慢性粒细胞白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)的发生发展机制及中药治疗CML的内在机制提供了新的研究思路.本研究在CML蛋白质相互作用网络构建与分子对接技术指导,并进行体外实验验证,探讨大黄干预CML的内在分子生物学机制.方法 使用人类孟德尔遗传数据库(Online Mendelian Inheritance in Man,OMIM)筛选CML相关基因,导入Cyto-scape 3.2.1实现蛋白质相互作用网络的可视化,插件CentiScaPe 2.1实现网络拓扑分析.大黄活性小分子物质从第三方数据库获取,Chemoffice 8.0与SYBYL 8.1对其再构建、结构优化,得到大黄小分子配体结构库,再通过Surflex-Dock模块与受体靶点进行分子对接,打分后得到关键靶标丝裂原活化蛋白激酶3(mitogen activated protein kinase 3,MAPK3).随后针对其进行实验验证,通过四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测对照组(无药血清)与实验组(1.2、6、12 g/kg的大黄含药血清)在24、48、72、96 h对K562细胞的增殖抑制率,蛋白质印迹法检测MAPK3蛋白的表达情况.结果 构建了由705个节点(蛋白质)和2058条边(相互作用)组成的蛋白质相互作用网络,分析得出关键靶标MAPK3.MTT法结果表明大黄能显著抑制K562细胞的增殖,且抑制率与动物给药剂量(所获含药血清)高低与作用时间成正相关.各实验组48、72、96 h抑制作用优于24 h,P<0.05;各实验组与对照组比较,差异均有统计学意义,P<0.05.蛋白质印迹法结果显示,大黄能显著降低MAPK3蛋白的表达.结论 CML是一个受多基因、多功能蛋白调控的复杂疾病,MAPK3很可能是CML的关键节点,而大黄可通过降低MAPK3蛋白的表达干预K562细胞增殖.

卵巢癌组织ALDH1表达与预后相关性Meta分析

目的 乙醛脱氢酶1(Aldehyde dehydrogenase 1,ALDH1)在卵巢癌患者中的预后价值仍是有争议的.因此,采用Meta分析方法评价ALDH 1表达水平与卵巢癌患者预后的相关性.方法 利用计算机检索PubMed、EMBASE、中国知网、万方数据库资源系统、中国生物医学文献数据库和维普中文期刊全文数据库从建库至2017-07公开发表的中英文文献,纳入符合标准的文献,提取基本信息,并进行方法学质量评价.选用Stata 12.0对所提取的数据进行Meta分析,并进行亚组分析、敏感性分析及发表偏倚的检测.结果 终纳入13篇原始文献,共2141个病例.对所有卵巢癌患者总生存率进行Meta分析,风险比(hazard ratio,HR)的合并值为1.50(95％CI:1.17～1.91),P=0.001.Begg's检验显示不能说明发表偏倚存在,P=0.06.亚组分析结果示,ALDH1表达程度分组、组织学类型、染色标准、患者来源都可能影响ALDH1表达与卵巢癌患者预后的关系.结论 ALDH1高表达可能是卵巢癌患者不良预后的危险因素.

《中华肿瘤防治杂志》稿约