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  • 补肾益气和血方对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜周期蛋白D3表达的影响

    作者:黄冬梅;黄光英;陆付耳

    目的观察补肾益气和血方对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜cyclin D3表达的影响. 方法妊娠雌鼠随机分为正常组、模型组、治疗组各20只,模型组取非孕子宫和妊娠子宫,余两组取妊娠子宫.采用免疫印迹法和免疫组织化学法,分别测定雌、孕激素、cyclin D3. 结果胚泡着床障碍小鼠子宫内膜cyclin D3表达在时空上明显滞后,补肾益气和血方能促进胚泡着床障碍小鼠子宫内膜cyclin D3及时有序地表达. 结论补肾益气和血方可促进子宫内膜cyclin D3的表达,并可能与子宫内膜的蜕膜化有关,可能有助于胚泡着床.

  • 白桦脂酸对Jurkat白血病细胞增殖和凋亡的影响

    作者:陈子;吴秋玲;陈燕;何静

    目的 观察白桦脂酸对人T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响,并探讨其分子机制.方法 以不同浓度的白桦脂酸处理Jurkat细胞,采用二苯基溴化四氮唑蓝(MTY)法检测细胞的增殖活性,Hoechst 33258染色和Annexin-V/PI双标法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期分布,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Jurkat细胞中cyclin D3和bcl-xlmRNA含量的变化,Western blot法检测cyclin D3和bcl-xl蛋白的表达.结果 白桦脂酸对Jurkat细胞有明显的增殖抑制作用,并呈时间和浓度依赖性.白桦脂酸可诱导Jurkat细胞凋亡,Hoechst 33258染色可见典型的凋亡小体;Annxin-V/PI双标法显示,20、60和100 μmol/L白桦脂酸作用于Jurkat细胞24 h时,细胞的早期凋亡率分别为8.7%±0.3%、28.0%±1.3%和33.6%±2.0%.白桦脂酸可使Jurkat细胞的细胞周期阻滞于G0/G1期.白桦脂酸可使Jurkat细胞中凋亡相关基因cyclin D3和bcl-xl mRNA及蛋白的含量均明显减少,并呈浓度依赖性.结论 白桦脂酸可抑制Jurkat细胞增殖并诱导其凋亡,可使细胞阻滞于G0/G1期;其可能通过下调cyclin D3和bcl-xl mRNA及蛋白的表达而发挥抗肿瘤作用.

  • Cyclin D3与Ki-67在涎腺腺泡细胞癌中的表达及意义

    作者:贾祝强;张福胤

    目的 研究cyclin D3和Ki-67在ACC中的表达情况及意义.方法 采用免疫组织化学法,分别检测cyclin D3和Ki-67蛋白在10例正常涎腺组织(NSG)及34例ACC组织标本中的表达情况.结果 Cyclin D3 LI在ACC组高于NSG组(P<0.05).复发组的cyclin D3 LI高于无复发组(P<0.05).Ki-67 LI在ACC组明显高于NSG组(P<0.05).小涎腺组的Ki-67 LI低于腮腺组显著性(P<0.05).Ki-67 LI在复发组高于无复发组(P<0.05).在ACC中cyclin D3的表达与Ki-67的表达呈正相关(r=0.392,P<0.05).结论 Cyclin D3的表达在ACC的发展过程中有一定作用,促进了细胞增殖.并可能与复发有关.Ki-67可能是一个重要的ACC预后因子.

  • cyclin D3与淋巴瘤细胞增殖相关性的初步研究

    作者:程纯;邵晓轶;沈爱国;严美娟;张冬梅;刘海鸥

    目的:初步探讨cyclin D3与淋巴瘤细胞增殖活性的相关性.方法:运用荧光免疫细胞化学法结合激光共聚焦显微镜观察,分析淋巴瘤细胞株Raji细胞内cyclin D3与Ki67表达、定位的关系.通过转染pDsRed-cyclin D3和pSuPER-cyclin D3 siRNA质粒,分析改变cyclin D3表达水平对肿瘤细胞增殖能力的影响.结果:在分裂增殖旺盛的Raji细胞中,Ki67与cyclin D3共定位于细胞核内.导入外源性cyclin D3引起相应细胞核Ki67的表达增加,阻断内源性cyclin D3基因表达,导致同一细胞相同部位Ki67表达水平下降.结论:cyclin D3的表达水平与NHL细胞增殖活性密切相关,提示其可能在淋巴瘤的发生、发展过程中发挥重要作用.

  • Cyclin D3正、反义表达质粒在淋巴瘤细胞系Raji中的转染与鉴定

    作者:邵晓轶;程纯;严美娟;王夏强

    目的:构建人类cyclinD3正义和反义真核表达质粒,分别转染到淋巴瘤细胞系Raji细胞中,为探讨cyclinD3基因对淋巴瘤细胞生物学行为的影响提供研究基础.方法:以Raji细胞总RNA为模板,通过RT-PCR获取cyclinD3全长cDNA,克隆入pGEM-T载体,再亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,构成含cyclin D3的表达质粒pcDNA3-cyclinD3.再运用DNA重组技术将cyclin D3基因反向克隆到pcDNA3.1中,构建成cyclin D3反义表达质粒pcDNA3-ascyclin D3.用脂质体介导的基因转染方法,将cyclin D3正、反义表达质粒和空质粒分别导入Raji细胞,经G418筛选建立稳定转染细胞株,用WesternBlot方法鉴定cyclinD3基因的表达.结果:酶切鉴定和测序分析证实,实验成功构建了cyclin D3正、反义表达质粒.与转染cyclin D3正义表达质粒和空质粒的细胞相比,转染cyclin D3反义表达质粒的Raji细胞中cyclin D3表达水平下降.结论:正、反义cyclin D3在淋巴瘤细胞中的转染和表达,为进一步研究cyclin D3在淋巴瘤细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡中的作用奠定了基础.

  • 皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤中P27及Cyclin D3的表达及其意义

    作者:杨翰君;徐晨;邹宇;万川;王琳;阚蓓;李俸媛;廖殿英;刘卫平;李甘地

    目的:探讨皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤(SPTL)中P27及Cyclin D3的表达和意义.方法:应用免疫组化检测20例SPTL标本中P27及Cyclin D3的表达.结果:P27及Cyclin D3在SPTL均出现较高表达,且P27蛋白与肿瘤细胞浸润血管有关(P<0.05);P27与Cyclin D3蛋白表达之间无相关性(P>0.05).结论:P27及Cyclin D3在SPTL发生发展中起着一定作用.

  • CDK11P58和Cyclin D3在损伤后大鼠坐骨神经中的表达变化

    作者:王夏强;程纯;邵晓轶;张冬梅;刘海鸥;沈爱国

    为了探讨大鼠坐骨神经损伤对CDK11P58和Cyclin D3表达的影响,本实验将成年SD大鼠随机分为假手术组和夹伤组,运用Western blot结合免疫荧光组织化学双标技术,观察了坐骨神经损伤后坐骨神经夹伤段、脊髓腰膨大前角和伤侧腓肠肌内CDK11P58和Cyclin D3的表达变化.结果显示:(1)坐骨神经夹伤后,坐骨神经夹伤段及脊髓腰膨大前角、伤侧腓肠肌中的CDK11P58蛋白的表达先逐渐下降,后又逐渐上升;而Cyclin D3的表达无明显变化;(2)在假手术组的坐骨神经、脊髓腰膨大前角和腓肠肌内都可观察到CDK11P58和Cyclin D3的表达;而坐骨神经夹伤后,在上述部位可检测到CDK11P58的表达强度明显减弱,但Cyclin D3无明显变化;(3)免疫荧光双标结果显示CDK11P58和Cyclin D3在假手术组的坐骨神经、脊髓腰膨大前角和伤侧腓肠肌内都有共存;而在坐骨神经损伤后这种共存强度明显降低.以上结果提示,坐骨神经损伤可影响坐骨神经及脊髓腰膨大、伤侧腓肠肌内CDK11P58的表达,但对Cyclin D3无明显影响,表明CDK11P58可能在周围神经损伤和修复中发挥重要作用.

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