首页 > 文献资料
-
半翼基因蛋白在实验鼠卵细胞联会复合体中的表达位置
目的：探讨半翼基因（ wings apart-like，Wapl ）蛋白在实验鼠粗线期的卵细胞中联会复合体（synaptonemal complex，SC）的表达位置。方法从受孕18.5d胎鼠的卵巢中分离出处于粗线期的卵细胞，然后用抗-联合复合体蛋白2（anti-synaptonemal complex protein 2，SYCP2）和抗-Wapl蛋白进行双免疫染色。结果 SYCP2和Wapl在所检查粗线期的卵细胞位置重叠。结论 Wapl可能是粗线期卵细胞SC的一部分。
-
减数分裂特异基因sycp1在小鼠精母细胞中的表达
目的 检测减数分裂基因sycp1在小鼠精子发生过程中的特异表达及其蛋白产物在小鼠精母细胞中的定位.方法 利用半定量RT-PCR技术分析了sycp1基因在1,2,3,5,8周龄小鼠睾丸发育过程中的阶段特异性表达,以及脑、心脏、肺、肝脏、肾脏、脾、胸腺和睾丸中的组织特异性表达;采用免疫组织化学染色方法检测了SYCP1在小鼠曲细精管中的细胞定位;通过间接免疫荧光染色初步显示了SYCP1在粗线期精母细胞中的分布.结果 RT-PCR分析证实sycp1 mRNA具有明显的组织特异性和阶段特异性表达特征;免疫组织化学染色结果显示,SYCP1只存在于减数分裂期的精母细胞核内;间接免疫荧光分析表明SYCP1在粗线期精母细胞核内的分布与核染色体的分布相一致.结论 SyCp1为减数分裂特异基因,其编码蛋白在雄性小鼠精母细胞核内的表达与SC的形成和成熟同步,参与了同源染色体之间的联会和重组.
-
雄性小鼠联会复合体形成过程的电镜观察
目的:通过观察小鼠精母细胞联会复合体形成过程,研究减数分裂时同源染色体的配对行为.方法:用本室改进的微铺展-硝酸银染色技术制备小鼠精母细胞联会复合体样品,进行电镜观察.结果:同源染色体配对时,大多数是两个端粒开始接触,联会复合体似拉链一样扩展.有的在同源染色体内部区域的一点或多点同时开始配对,联会以扣纽扣方式进行.XY染色体配对仅限于部分区域.一个细胞内不同对染色体的联会不同步.同源染色体交叉在联会过程中形成,大多数同源染色体形成一个或多个交叉,但有的一个交叉也没有.结论:大多数同源染色体以不同方式进行配对,交叉互换的数目也各不相同.
-
小鼠联会复合体超微结构畸变的观察与分析
目的:用改进的微铺展技术观察分析小鼠联会复合体超微结构的畸变.材料和方法:以滨州医学院实验动物室饲养的性成熟雄性小鼠为材料,制备小鼠精母细胞联会复合体样品,硝酸银染色,电镜观察、分析.结果:有联会复合体结构畸变和配对异常的细胞占观察细胞总数的12.4%.其中联会复合体断裂占异常联会复合体总数的52.17%,侧生组分断裂31.52%,易位6.52%,联会紊乱4.35%,不联会3.26%,圆环2.17%.结论:实验小鼠各类联会复合体畸变百分率均高于国内文献报道的正常小鼠的联会复合体畸变率.改进的微铺展制备联会复合体样品技术简便易行,效果良好.
-
联会复合体的硝酸银染色技术
联会复合体是减数分裂前期Ⅰ出现的一种核内非永久性细胞器,与同源染色体联会、交换、重组、分离有着密切的关系,早期研究联会复合体是通过减数分裂前期细胞连续超薄切片进行三维重组.这种方法费时费力,观察细胞数目有限,不仅不能用光镜观察,而且在一张超薄切片上不可能观察到一条完整的联会复合体,更谈不上一整套联会复合体.
-
1例携带环状4号染色体的Wolf-Hirschhorn综合征合并少精子症患者减数分裂Ⅰ期缺陷的分析
目的 报道1例Wolf-Hirschhom综合征携带1条环状4号染色体合并严重少精子症的病例,并探讨精子发生障碍的可能机制.方法 为检测患者初级精母细胞染色体的联会、重组和转录失活情况,用荧光标记联会复合体蛋白3(synaptonemalcomplex protein 3,SCP3)、错配修复基因蛋白(mut L homolog 1,MLH1)和乳腺癌易感基因1(breast cancer susceptibility gene 1,BRCA1)蛋白对睾丸活检样本进行免疫荧光染色.结果 SCP3染色显示对照组偶线期精母细胞占5.2％,而患者偶线期的精母细胞显著增高占35.4％,表明患者的生精阻滞在初级精母细胞的偶线期.MLH1染色显示每个细胞的结合位点数对照组为47.8±4.5,患者为45.9±5.9,后者明显减少(U=2.62,P＜0.05).BRCA1染色显示患者所有粗线期细胞中都带有1条环状4号染色体,并有不同程度的不配对区域.结论 环状4号染色体可能影响生殖细胞减数分裂Ⅰ期的进展,影响联会复合体的形成及未联会区域基因转录的活性,从而使精子的生成障碍,导致不育.
-
无精子症患者减数分裂遗传重组的研究
目的 探讨无精子症患者精母细胞减数分裂过程中染色体联会与遗传重组的情况.方法 对7名汉族正常人(对照组)和7例汉族无精子症患者,包括2例梗阻性无精子症(obstructive azoospermia,OA)和5例非梗阻性无精子症(non-obstructive azoospermia,NOA)进行睾丸组织精母细胞免疫荧光染色.联会复合体蛋白3(synaptonemal complex protein 3,SCP3)抗体标记联会复合体,DNA修复蛋白(human mutL homologl,MLHl)抗体定位遗传重组位点.结果 OA组和NOA组偶线期细胞比例较对照组均显著增加,差异具有统计学意义(P＜0.05).详细分析粗线期精母细胞MLH1位点数目及分布情况,发现NOA组患者中每个细胞MLH1位点数较对照组显著减少(P＜0.05),常染色体上无MLH1位点的染色体数目较对照组显著增加(P＜0.01),含有至少1条染色体臂上无MLH1位点的细胞比例较对照组增高.分析粗线期精母细胞中SCP3形态时发现,NOA患者中SCP3不完全联会的粗线期精母细胞比例显著高于对照组(P＜0.01).结论 无精子症患者减数分裂过程有延迟现象；NOA患者精母细胞遗传重组MLH1位点的数目和分布出现异常,染色体联会不完全现象增加,这些异常事件可能与NOA患者精子发生障碍有关.
-
FKBP6基因278C/A单核苷酸多态性与原发无精症相关研究
目的对 FKBP6基因第3、4外显子进行突变和多态性筛查,研究第3外显子278C/A位点及第2内含子C/T位点(rs7797242)在无精症患者和正常男性中的多态性,初步探讨与原发无精症的相关性.方法采用变性高效液相色谱和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法,对第3、4外显子进行突变和多态性筛查,对177例无精症患者和231名正常男性的278C/A和C/T(rs7797242)多态性进行基因分型.结果 278C和278A等位基因频率符合Hardy-Weinberg平衡.无精症患者278A显著低于正常对照,差异有统计学意义(P＜0.05).C/T多态性在两组中均未检出,第3、4外显子未筛查到新的变异.结论 278A等位基因可能与原发无精症相关.C/T(rs7797242)及370G/A, 430G/C, 467T/C, 468G/A在中国人群中非常罕见.
-
可育男性减数分裂遗传重组分析
目的 探讨可育男性减数分裂前期Ⅰ同源染色体的联会和重组.方法 应用铺展技术制备精母细胞联会复合体,以SCP3抗体、MLH1抗体和CREST抗血清孵育来显示联会复合体侧轴、重组位点和着丝点.结果 5例可育男性中,粗线期细胞的比例介于67%～78%;每个细胞中重组位点数平均为46.1±3.9,范围为34～61,具有显著的个体差异;联会复合体上出现缺口(gap)或未配对区(split)的细胞比例分别为14.3%和2.9%.结论 可育男性的遗传重组频率具有显著的个体差异.
-
雷公藤多甙对雄性小鼠生殖细胞毒性的研究
背景与目的:研究雷公藤多甙对雄性小鼠生殖细胞的遗传毒性作用,为临床将雷公多甙藤作为抗牛育剂和治疗药的安全使用提供理论基础和依据.材料与方法:昆明种雄性小鼠共3o只,随机分成阴性、阳性对照组,雷公藤多甙抗生育剂量组[10 mg (ks·d)]、中间剂量组[20 mg (kg·d)]和治疗剂量组[30 mg (ks·d)],共5组,每组6只.分别采用骨髓微核实验、精子畸形实验、染色体畸变实验和联会复合体技术,研究雷公藤多甙对雄性小鼠牛殖细胞的遗传毒性.结果:雷公藤多甙20和30 mg (kg·d)剂量组可产生体细胞遗传毒性,与阴性对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05).雷公藤多甙3个剂量组均可致精子畸形并对初级精母细胞产生损伤,以及具有生殖细胞联会复合体损伤,与阴性对照组比较差异均具存统计学意义(P均<0.05).结论:雷公藤多甙具有遗传毒性和生殖细胞毒性,生殖细胞对雷公藤多甙的敏感性高于体细胞,作为治疗药物忌大剂量长时间使用.
