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三种精子质膜完整性检测方法的比较
目的 对6-羧基二乙酸荧光素/碘化丙啶(6-CFDA/PI)双荧光标记方法进行改良并应用于人精子质膜完整性的检测,并与单用伊红Y染色、低渗肿胀试验(HOS)两种检测方法进行比较. 方法 随机选择30例本所人类精子库志愿者精液标本(密度≥20×106/ml、活力(a+b)≥50%),分别采用单用伊红Y染色、HOS和6-CFDA/PI双荧光标记试验检测精子质膜完整性. 结果 30例精液标本伊红Y染色活精子比率、HOS肿胀精子数比率、6-CFDA/PI双荧光标记结果分别为(68.8±7.6)%、(68.7±7.8)%和(67.9±7.8)%,两两比较,无显著性差异(P均＞0.05),但双荧光标记能显示死活精子的过渡状态.相关性分析结果显示,三种方法检测的活精子比率均与前向运动(a+b)精子呈显著正相关. 结论 6-CFDA/PI双荧光标记检测方法与单用伊红染色、HOS两种常用检测精子质膜完整性方法具有一致性,同时能鉴定出精子过渡的中间状态.
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水溶性伊红Y不同配置法对HE染色效果的影响
HE染色效果除与组织是否新鲜、固定是否及时以及脱水包埋过程是否恰当有关外,染色液的配置和使用也是重要的环节之一,染色液的质量终决定染色的效果[1].本实验室使用伊红染色剂均是水溶性伊红Y,在长期的工作实践中发现,采用不同的伊红配置法所得的染液,HE染色效果差异明显,为了使染色效果更佳、更稳定和更可控,我们对伊红的配置方法和染色效果进行对比实验,现将实验过程及结果详述如下.
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组织染色剂伊红Y的化学性质及改良配制法探讨
组织切片常规的染色方法是苏木精-伊红染色法,简称HE染色法.对胞核染色剂苏木精的探讨有许多文献报道过,但对胞质染色剂伊红化学性质探讨的文献,目前不多.其实,在切片染色中,伊红染液的质量好坏和苏木精染液一样重要,直接关系到切片染色的成败.掌握了它们的化学性质,在配制染液过程中有很大的发挥空间.配制优质苏木精、伊红染液是组织、病理切片制作人员的愿望.为此,笔者就伊红Y染料的化学性质在此进行了一些探讨,并将伊红染液的配制改良法作一介绍,以供参考.
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一种新方法测定脑脊液蛋白及临床应用报告
脑脊液蛋白测定对中枢神经系统疾病的诊断和鉴别有着重要价值,目前尚无理想的测定方法.磺柳酸比浊法[1]无论在敏感度和特异性方面都存在较多问题.20世纪90年代初,Lin等[2]报告用伊红Y染色聚丙烯酰胺凝胶电泳中的蛋白质,据称它比考马斯亮兰R-250染色法敏感.随后,Waheed等[3,4]先后报告用伊红B和伊红Y染料测定生物制品(酶制剂)中蛋白质含量,方法简单、敏感、准确,只见用于研究工作的报道.为此,作者对Waheed等的方法进行了系统的研究,提出一个适合临床实验室常规使用的脑脊液蛋白测定新方法,经初步试用,效果满意,现介绍如下.
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伊红Y染料结合法测定脑脊液蛋白在全自动生化分析仪上的应用
目的 在全自动生化分析仪上建立一种测定脑脊液蛋白含量的分析方法.方法 在Brij-35存在下,伊红Y和脑脊液中的蛋白质进行结合显色,测定脑脊液中的蛋白含量,并用于自动化分析.结果 通过实验分析,蛋白质和伊红Y染液的复合物大吸收峰为532 nm,呈色稳定,可达2 h,线性范围50～1 000 mg/L,批内CV为1.66%～4.40%,批间CV为2.65%～4.02%.结论 本法测定结果准确可靠,能够满足临床常规检测.
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伊红Y水试验结合低渗肿胀试验对睾丸穿刺精子质量评估的应用性研究
目的应用伊红Y水试验结合低渗肿胀试验对10例生育男性和10例不育男性及25例无精子睾丸穿刺的精子做精子膜功能的评估与研究.方法通过两种试验对精子膜功能的完整性、特别是睾丸穿刺精子的功能做质量判断.结果睾丸穿刺精子伊红Y水试验头部着色率38.45±15.39%;尾部肿胀率34.51±14.58%;均低于生育组和不育组.结论当睾丸穿刺精子,精子膜功能实验阳性率<10%应考虑放弃做ICSI.
