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口腔脱落细胞乙醇现场固定法微核试验的研究
目的 建立乙醇现场固定口腔脱落细胞进行微核试验的方法 .方法 利用无水乙醇现场固定口腔脱落细胞,保存0～30 h后进行微核试验与常规口腔脱落细胞微核试验、外周血淋巴细胞微核试验进行比较.结果 乙醇现场固定法的口腔脱落细胞在4、8、24 h后的微核率与常规口腔脱落细胞微核率和外周淋巴细胞法微核率(Oh)差异无统计学意义(P＞0.05),而常规法口腔脱落细胞在保存4 h后则出现微核率下降,与外周血培养法的微核率差异有统计学意义(P＜0.05).结论 无水乙醇现场固定口腔脱落细胞能够有效延长保存时间,微核试验结果 稳定,适合用于现场采样.
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口腔脱落细胞检测Y染色体无精子因子基因微缺失
不育症患病率正逐年上升,一年以上规律性生活而不能怀孕的夫妇约占所有新婚夫妇的10%,其中男性不育因素占40%左右.Y染色体微缺失,特别是无精子因子(azoospermia factor,AZF)基因微缺失,与男性不育有关[1].目前AZF基因检测通常采用血液样本,过程复杂且有创,不利于临床大规模开展和流行病学调查.本次研究通过口腔脱落细胞和血细胞AZF检测比较,对口腔脱落细胞检测AZF的可行性和准确性进行评估和探讨,报道如下.
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口腔脱落细胞检测无精子因子微缺失的临床应用
目的 探讨同一个体口腔脱落细胞和血液检测无精子因子(AZF)缺失的相关性,研究口腔脱落细胞检测AZF的可行性.方法 选择287例研究对象,其中严重少弱精症120例,无精症80例,正常男性87例.同一受试对象的血液和口腔脱落细胞样本统一编号.应用多重PCR技术,分别检测口腔脱落细胞、血液基因组中AZF区域的Y染色体微缺失情况.结果 血液和口腔脱落细胞检出AZF缺失的样本编号一一对应,并且缺失类型一致.在200例患者中,29例检出基因组AZF基因微缺失,余171例患者和87例正常对照者未检出AZF基因微缺失.结论 在进行Y染色体微缺失筛查中,口腔脱落细胞检测AZF简便、无创,可以替代血液AZF检测.
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口腔标本检测男性不育症Y染色体微缺失
目的:通过探讨男性不育症同一个体口腔脱落细胞和血液检测AZF缺失的关系,研究口腔脱落细胞检测AZF的可行性.方法:选择128例研究对象,其中少弱精症、无精症128例,应用多重PCR技术,分别检测口腔脱落细胞、血液基因组中AZF区域的Y染色体微缺失.结果:同一个体检测AZF缺失情况,口腔脱落细胞和血液是完全一致.结论:在进行Y染色体微缺失筛查中,口腔脱落细胞检测AZF作为一种简便、无创、准确的方法,是完全可以替代血液AZF检测.
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饮料瓶口腔脱落细胞DNA检测侦破爆炸案1例
1 案例某日10:00许,云南省德宏州邱某在家中被炸死,当地公安机关在现场勘查过程中又发生了二次爆炸,炸伤一民警,后在相关部门的协助下,确定爆炸装置是人为安装,并在现场周围找到了3个塑料饮料瓶,分析应是罪犯所留.
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微量口腔脱落细胞检材的DNA检验
目的 寻求提高微量口腔脱落细胞检材的DNA检验成功率的简便有效的提取方法.方法 对不同载体上的100份微量口腔脱落细胞检材采用小体积Chelex-100法提取DNA,在ABI7500型荧光定量PCR仪上进行定量,同时用IdentifilerTM复合扩增系统扩增.在ABl3130遗传分析仪上进行STR分型.结果 从25根饮料吸管上提取的DNA量在0.72～116.7.8 ng,16个水杯杯缘提取的DNA量在2.15-142.5 ng, 31个饮料瓶(罐)口提取的DNA量在1～34.65ng,10根筷子上提取的DNA量在3.35～26.6ng,12个果核中提取的DNA量在0.294～21.4ng,6份吃剩的骨头中提取的DNA量在0.88～5.88ng.100份检材性别及9个以上STR位点分型成功率平均为59.38%.除了使用者的个人原因外,检材的提取送检方式、检材的质地、饮料的性质对提取的DNA量有显著影响,是否加蛋白酶K对提取的DNA量无显著影响. 结论 采用小体积Chelex-100法可对60%左右的微量口腔脱落细胞检材提取DNA进行STR分型.
