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抗人巨细胞病毒重组抗原gp52单克隆抗体的研制及应用研究
目的:为了获得抗人巨细胞病毒(HCMV)单克隆抗体(McAb),并将其用于人HCMV感染后的抗体检测.方法:采用杂交瘤技术获得抗重组HCMV(rhCMV)gp52蛋白的McAb.并用抗人μ链抗体包被、rhCMV gp52蛋白作抗原和HRP-McAb作标记抗体,建立了检测抗HCMV抗体的捕获ELISA.用该法检测献血员、病毒性肝炎患者及疑似CMV感染的肝炎综合征患者血清共计939份.结果:终获得4株(3E9,5A6,4G12,2H2)能稳定分泌高效价抗rhCMV McAb的杂交瘤细胞.它们分别识别gp52蛋白上的2个不同抗原表位,2H2识别gp52蛋白上的一个表位,3E9,5A6和4G12则共同识别另一个表位.用其建立的捕获ELISA,gp52蛋白抗原佳浓度为1μg@mL-1,酶标单抗的工作浓度为1:1 600,批内平均变异系数3.7%,批间平均变异系数7.9%.634例献血员IgM抗体阳性17例(2.7%);288例病毒性肝炎患者,阳性10例(3.5%);17例肝炎综合征患者,阳性11例(64.7%).均经免疫印迹法证实.结论:用gp52蛋白及其单抗建立的捕获ELISA,特异性强,灵敏度高,不受类风湿因子的影响,结果可靠,优于全病毒抗原构成的检测试剂,适用于临床诊断和流行病学调查.
关键词: 人巨细胞病毒 重组gp52蛋白 单克隆抗体 捕获酶联免疫吸附试验 -
001基于3种抗原以IgM捕获酶联免疫吸附试验对登革病毒血清分型
关键词: 抗原 捕获酶联免疫吸附试验 登革病毒 -
两种血小板抗体检测方法的比较
血小板抗体可以引起多种临床疾病或症状,如同种或自身免疫性血小板减少症、输血后紫癜、血小板输注无效等.目前,血小板抗体的检测方法,已报道的有多种[1,2],如血小板免疫荧光试验、固相红细胞粘附试验(SPRCA)、单克隆抗体特异性血小板抗原固定术(MAIPA)、改进的抗原捕获酶联免疫吸附试验(MACE)等.