首页 > 文献资料
-
Fas配体表达对同种胰岛移植的影响
目的探究睾丸细胞FasL表达能否对共移植的胰岛移植物提供免疫豁免作用以及胰岛细胞FasL基因转染对同种胰岛移植的影响。方法 将同种大鼠胰岛及睾丸细胞同时移植于糖尿病受体，重组腺病毒AdV-FasL感染胰岛细胞后移植，观察移植物存活情况、胰岛功能，并检测移植物内浸润淋巴细胞以及基因转染胰岛细胞凋亡情况。结果 单纯移植胰岛组平均存活期为(6.3±0.6)d。与胰岛细胞同时移植的睾丸细胞数增加至1×107时，存活期大于50d（P<0.05）。表达FasL的睾丸细胞在移植物内诱导浸润淋巴细胞凋亡。FasL基因转染组出现排斥加速，存活期缩短至(3.4±0.2)d。FasL转染的胰岛细胞在移植后24h见FasL表达，48h表达增强，移植后FasL转染胰岛细胞凋亡。结论 表达FasL的睾丸细胞与胰岛同时移植可诱导活化的淋巴细胞凋亡，使胰岛移植物获得免疫豁免、存活期延长，但通过FasL基因转染使胰岛细胞直接表达FasL引起胰岛细胞凋亡和粒细胞浸润，导致排斥加速。
-
抗原特异性CD4+CD25+T细胞对同种异体胰岛移植影响及作用机制研究
目的 探讨抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞免疫对同种异体胰岛急性移植排斥反应的影响和机制.方法 用MACS分选供体抗原特异性D4+CD25+Treg细胞免疫糖尿病BALB/cByJ受体小鼠,以ICR小鼠胰岛为供体行同种异体胰岛移植.观察移植后小鼠的存活时间、移植前外周血CD4+和CD8+T细胞亚群的变化和移植物中,Th1/Th2细胞因子mRNA表达水平的变化.结果 抗原特异性Treg细胞联合胰岛移植组(C)胰岛移植物平均生存期为(34.57±17.15)d,显著长于单纯胰岛移植组(B组)的(10.6±1.82)d(P<0.01);移植后第3天,C组外周血D4+/CD8+的值显著低于B组(P<0.01);C组移植物中IL-10,TGF-β mRNA表达比B组显著增强.B组移植物中IL-1β,IL-2及IFN-γmRNA表明显强于C组.结论 抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞可通过调节Th2/Th1之间的反应平衡而延长同种异体胰岛移植物的存活时间.
关键词： 胰岛/移植 CD4+CD25+调节性T细胞 免疫耐受 细胞因子 -
低温微重力培养对大鼠胰岛细胞质量影响的实验
目的 研究低温微重力对大鼠胰岛移植质量的影响,以期减少体外培养对胰岛活性和数量的影响,提高胰岛移植质量.方法 将分离纯化的大鼠胰岛分为3组:大鼠新鲜胰岛移植组(于移植前在普通培养基中培养21 d,对照组);实验1组(大鼠新鲜胰岛在37 ℃ RCCS中培养21 d);实验2组(新鲜大鼠胰岛在26 ℃ RCCS中培养14 d后复温至37 ℃继续在37 ℃ RCCS中培养7 d). 观察各种培养液中的胰岛素含量.并将上述3个实验组不同条件培养的胰岛分别以2000IEQ胰岛移植量植入糖尿病大鼠体内,并观察10周.结果 实验2组的胰岛存活率、胰岛素分泌水平及胰岛素刺激指数均高于对照组和实验1组,差异有统计学意义(P＜0.05).21 d时实验2组胰岛存活率高达(67.4±4.6)%,而对照组和实验1组胰岛存活率分别降至(28.1±3.3)%和(50.3±3.5)%,3组间差异有统计学意义(P＜0.05).给糖尿病大鼠移植实验1,2组的胰岛后均能控制血糖至正常水平,但实验2组胰岛移植对糖尿病大鼠7 d内血糖控制优于实验1组;对照组血糖控制差,3组间两两比较均有统计学差异(均P＞0.05).结论 大鼠胰岛经低温微重力培养后移植,可以明显提高1型糖尿病大鼠的治疗效果.
-
CFSE标记抗原特异性CD4+CD25+T细胞在胰岛移植体内归巢的研究
目的:观察抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞在小鼠同种异体胰岛移植后体内的分布特点,探讨抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞免疫调节可能机制.方法:构建小鼠同种异体胰岛移植模型.CFSE对抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞标记,经尾静脉输注.用组织冰冻切片和流式细胞术动态了解CFSE标记的抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞在受体内的分布和增殖变化.结果:抗原特异性CD4+CD25+ Treg细胞联合胰岛移植组胰岛移植物平均生存期为(34.57±17.15) d,较胰岛移植组生存时间(10.6±1.82) d,差异有统计学意义(P<0.01).抗原特异性CD4+CD25+ Treg 细胞在各级淋巴结均有能定居,但是胰腺淋巴结定居的细胞数量明显多于其他淋巴结.结论:抗原特异性Treg细胞抑制STZ诱导的糖尿病小鼠的急性移植排斥反应,细胞抑制功能与细胞在体内淋巴结的归巢有关.
关键词： CD4+CD25+调节性T细胞 胰岛/移植 CFSE -
联合阻断CD28和ICOS对移植胰岛功能影响的实验研究
目的:探讨CTLA-4Ig及可溶性B7RP-1融合蛋白联合阻断CD28和ICOS对移植胰岛功能的影响.方法:在异种胰岛移植模型的基础上48只实验动物随机分成4组,每组12只,供体为SD大鼠,受体为近交系昆明小鼠.联合处理组(A组):分别于移植后0、2、4d和1、3、5d腹腔内注射CTLA-4Ig和可溶性B7RP-1融合蛋白组;可溶性B7RP-1融合蛋白处理组(B组):移植后1、3、5d腹腔内注射可溶性B7RP-1融合蛋白组;CTLA-4Ig处理组(C组):移植后0、2、4d腹腔内注射CTLA-4Ig组;对照组(D组):单纯胰岛移植,不做CTLA-4Ig和可溶性B7RP-1融合蛋白处理组.通过观察大鼠胰岛移植后移植物存活时间和移植胰岛病理改变,并用RT-PCR方法检测IL-2和IL-10在移植组织中的表达情况.结果:联合处理组大鼠移植胰岛存活时间较对照组及CTLA-4Ig处理组和可溶性B7RP-1融合蛋白组明显延长,移植胰岛光镜检查接近正常,IL-2mRNA表达差异有显著性[(42.55±6.34)%VS(112.55±15.34)%,P＜0.01],Ⅱ-10mRNA表达差异无显著性[(105.35±15.16)%VS(102.23±16.02)%,P＞0.05].结论:应用CTLA-4Ig+可溶性B7RP-1融合蛋白联合阻断CD28和ICOS,可以明显的抑制排斥反应,提高移植物的存活率.
