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针刺督脉对脑缺血再灌注大鼠FADD-Caspase-8通路的影响
目的 观察针刺督脉经穴对脑缺血再灌注大鼠FADD-Caspase-8 通路的调节作用.方法 采用雄性SD 大鼠,利用线栓法制作大脑中动脉栓塞(MCAO)模型.利用蛋白印迹法检测针刺后FADD 和Caspase-8 蛋白表达的变化.结果 大鼠MCAO 后FADD 和Caspase-8 蛋白表达增加,针刺督脉组MCAO24h 和72hFADD 和Caspase-8 蛋白表达降低.结论 针刺督脉经穴可能通过抑制FADD 和Caspase-8 的过度表达,减少细胞凋亡,从而改善脑缺血再灌注损伤.
关键词： 针刺 督脉 缺血性中风 Fas死亡区域连接蛋白 半胱氨酸蛋白酶8 -
姜黄素诱导人肺癌细胞凋亡的作用机制初步研究
目的探讨姜黄素对人肺腺癌细胞(SPC-A1)抗癌作用机制.方法采用细胞培养、荧光显微镜、原位末端标记、放射免疫、原位杂交等技术,探讨姜黄素抗癌作用及其机制.结果①姜黄素作用于癌细胞后,光镜下可见有细胞脱壁,悬浮培养液中;荧光镜下可见细胞核破碎,裂解成大小不等的凋亡小体,原位末端标记法进一步证实20 μmol*L-1姜黄素作用24 h凋亡率达42.67%.②姜黄素作用于癌细胞后,使细胞内cAMP浓度升高.③20 μmol*L-1姜黄素作用于癌细胞24 h后,使人肺癌细胞半胱氨酸蛋白酶8(Caspase-8)mRNA表达明显增高.结论姜黄素可诱导人肺癌细胞凋亡,其作用机制可能与细胞内cAMP浓度升高、Caspase-8表达增高有关.
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食管鳞癌组织中EphrinB2、半胱氨酸蛋白酶8蛋白和mRNA的表达
目的:探讨人食管鳞癌组织中EphrinB2与半胱氨酸蛋白酶8(Caspase-8)的表达.方法:运用实时荧光定量PCR和免疫组化方法检测96例食管鳞癌患者的癌组织和癌旁正常组织中EphrinB2与Caspase-8的表达,采用Cox回归进行食管癌患者生存分析.结果:癌组织中Caspase-8 mRNA(△Ct)与蛋白的表达水平分别为(7.38±2.47)和(2.51±2.38)%,低于配对正常组织的(5.46±1.87)和(8.85±7.88)%(t=1.375和-22.761,P均＜0.001);癌组织中EphrinB2蛋白的表达水平为(11.67±2.48)%,高于配对正常组织中的(1.71±0.60)%(t=-38.322,P＜0.001).癌组织中EphrinB2与Caspase-8蛋白的表达水平相关(r=-0.340,P＜0.001).COX回归分析:有家族史和Caspase-8 mRNA低表达是影响食管癌患者生存的危险因素(95%CI分别为1.990-8.547和0.152-0.788,P均＜0.05).结论:人食管鳞癌组织中EphrinB2的高表达和Caspase-8的低表达可作为食管癌发生发展的评估指标.
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半胱氨酸蛋白酶8在姜黄素诱导人肺癌细胞凋亡中的作用
目的探讨姜黄素对人肺癌细胞(SPC-A1)抗癌作用机制.方法采用细胞培养、荧光显微镜、细胞凋亡检测、 原位杂交等技术.结果姜黄素处理后的癌细胞, 光镜下可见有细胞脱壁, 悬浮培养液中; 荧光镜下可见细胞核破碎, 裂解成大小不等的凋亡小体;20 μmol/L姜黄素作用24 h凋亡率达43.67%,人肺癌细胞半胱氨酸蛋白酶8 mRNA表达明显增高.结论姜黄素可诱导人肺癌细胞凋亡, 其作用机制可能与半胱氨酸蛋白酶8表达增高有关.
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姜黄素对人肺癌细胞凋亡及相关信号的影响
目的研究姜黄素对人肺癌细胞内凋亡相关信号的影响.方法取对数生长期SPC-A1细胞,用20 μmol/L姜黄素作用SPC-A1细胞0、1、2、3、4 h,用荧光探测的方法测定细胞内Ca2+浓度.用原位杂交的方法检测人肺癌细胞caspase8 mRNA表达.结果 20 μmol/L姜黄素处理SPC-A1细胞后,细胞内Ca2+浓度随作用时间增高而升高;20μmol/L姜黄素作用于癌细胞24h后,使人肺癌细胞caspase8mRNA表达明显增高.结论姜黄素诱导SPC-A1细胞的凋亡可能与细胞内Ca2+浓度升高以及caspase8 mRNA表达增高有关.
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半胱氨酸蛋白酶8基因-652 6N I/D多态性与高脂血症的相关性
目的 分析半胱氨酸蛋白酶8 (CASP8)基因-652 6N L/D多态性与高脂血症的相关性.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术结合DNA测序的方法对四川地区350例正常人和357例高脂血症患者进行CASP8基因-652 6N I/D基因型检测.结果 正常对照组和高脂血症组I/I、I/D和D/D的基因频率分别为54.3％、41.4％、4.3％和55.2％、36.1％、8.7％,两组基因型频率差异有统计学意义(P=0.038);但两组等位基因I和D的频率差异无统计学意义.与I/I基因型或合并I/I与I/D基因型相比,D/D基因型发生高脂血症的风险增加,OR值分别为1.993(95％CI为1.043～3.810,P=0.034)和2.124(95％CI为1.125～4.008,P=0.018),且高脂血症患者中D/D基因型者血清甘油三酯水平高于I/D和I/I基因型者.结论 CASP8基因-652 6N I/D多态性与四川地区高脂血症的发生相关.
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螺内酯抑制心肌细胞凋亡机制的初步研究
目的 初步探讨螺内酯(spironolactone,SPI)抑制心肌细胞凋亡的机制以及心肌梗死后对心室重构的影响.方法 45只SD大鼠分为3组:假手术假手术组、心肌梗死(myocardial infarction,MI)组和心肌梗死后SPI干预组.测量大鼠左心室功能、观察标本病理形态改变,缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡程度,免疫组化观察半胱氨酸蛋白酶8 (caspase8)、半胱氨酸蛋白酶9(caspase9).结果 (1)MI组心功能较假手术组明显下降,SPI干预组较MI组改善;(2)假手术组心肌结构完整,MI组心肌结构损害严重,SPI组心肌结构损害较轻;(3)与假手术组相比,MI组凋亡细胞数显著增加,差异有统计学意义(P＜0.05);与MI组相比,SPI组心肌细胞凋亡数显著减少,差异有统计学意义(P＜0.0l);(4)与假手术组相比,MI组半胱氨酸蛋白酶8、半胱氨酸蛋白酶9表达显著增加,差异有统计学意义(P＜0.01);与MI相比,SPI组半胱氨酸蛋白酶8表达无明显差异,而半胱氨酸蛋白酶9表达明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 螺内酯通过抑制细胞凋亡改善了心室重构和心力衰竭的发生发展,可能通过凋亡的内源性途径抑制了心肌细胞的凋亡.
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CASP 8基因-6526N I／D多态性与2型糖尿病易感性的关系
目的：分析半胱氨酸蛋白酶8（CASP 8）基因-6526N I/D 多态性与2型糖尿病（T2DM）易感性的关系。方法：采用PCR-RFLP技术结合DNA测序检测414例正常人和410例2型糖尿患者 CASP 8基因-6526N I/D 的多态性。结果：对照组和糖尿病组I/I、I/D和 D/D的基因型频率分别为56．5％、38．9％、4．6％和58．0％、32．9％、9．0％，差异有统计学意义（P＜0．05）。D/D基因型发生T2DM的风险为I/I基因型的1．916倍（95％CI＝1．199～3．054，P＜0．05）。 D/D 基因型的空腹血糖高于I/D和I/I基因型（P＜0．05）。结论：CASP 8基因-6526N I/D多态性与2型糖尿病的发生相关。
