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分光光度法测定元胡止痛片中延胡索总生物碱的含量
目的 采用分光光度法测定元胡止痛片中延胡索总生物碱的含量,确定佳的提取及测定方法.方法 用溴甲酚绿与生物碱结合成有机络合物,以定量的有机溶剂提取,用分光光度法在波长413 nm 处测定.结果 平均回收率为100.9%,RSD 为0.53%.结论 本方法准确、可靠、重复性好,可作为元胡止痛片的质量控制标准.
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延胡索与白芷组分配伍对延胡索乙素在大鼠肝微粒体中酶促反应动力学的影响
目的:研究延胡索总生物碱(TA)中延胡索乙素(TET)在肝微粒体中的酶促反应动力学,并比较白芷有效组分白芷香豆素(Cou)、挥发油(VO)与TA配伍后对TET酶促反应动力学的影响.方法:超速离心法制备大鼠肝微粒体,采用高效液相色谱法测定孵育液中TET原形药物的浓度.比较TA、TA-Cou、TA-VO、TA-Cou-VO配伍各组中TET的酶促反应动力学,推导出药物米氏常数(Km)和大反应速度(Vmax.)；并计算TET肝内清除率(CLint).结果:TA配伍组中的TET在大鼠肝微粒体内代谢反应的Vmax、Km和CLint分别为0.12μmol/(L·min·mg)、5.40μmol/L、0.022L/(min·mg)；TA-Cou组分别为0.27μmol/(L·min·mg)、40·18μmol/L、0.006L/(min·mg);TA-VO组分别为0.57μmol/(L.min.mg)、22.60μmol/L、0.025L/(min.mg)；TA-Cou-VO组分别为0.84μmol/(L.min.mg)、23.25μmol/L、0.036L/(min·mg).结论:TA配伍白芷有效组分可降低TA中TET在肝内的Cint.
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延胡索总生物碱对急性心肌缺血大鼠心功能下降影响的研究
目的:观察延胡索总生物碱对异丙肾上腺素(Isoprenaline,Iso)诱导急性心肌缺血大鼠心功能下降的影响.方法:本实验室自己提取延胡索总生物碱,并给予大鼠2次/日灌胃,然后腹腔注射Iso致心肌缺血,第4天经左侧颈动脉插入心导管,记录给药及造模前后左心室内压变化曲线并进行数据分析.结果:观察心功能曲线表明,延胡索总生物碱高剂量组(2.0mg/kg)、总生物碱中剂量组(1.0mg/kg)具有缓解Iso导致的大鼠心功能下降的趋势,统计数据表明两组的LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax与模型组比较具有显著性差异(P＜0.05).结论:延胡索总生物碱高剂量、中剂量具有缓解Iso所致心肌缺血大鼠心功能下降的作用.
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高效液相色谱法测定延胡索总生物碱滴丸中巴马汀碱和脱氢紫堇碱含量
目的:采用高效液相色谱法测定延胡索总生物碱滴丸中巴马汀碱和脱氢紫堇碱含量.方法:色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18柱,流动相为乙腈-水(含0.4％冰乙酸和0.1％三乙胺)(22:78),检测波长为338nm,柱温30℃.结果:盐酸巴马汀碱浓度在0.044 8～0.268 8μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.999 3,平均回收率为98.29％,硝酸脱氢紫堇碱浓度在0.23 ～1.15μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.999 4,平均回收率为99.83％.结论:方法简便、准确、重现性好,可用于延胡索总生物碱滴丸中含量测定质控指标.
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基于GSE-1细胞相关活性评价体系的延胡索总生物碱萃取纯化工艺研究
目的 通过体外抗溃疡活性来评价延胡索总生物碱有机溶剂萃取的纯化工艺.方法 采用酸性染料比色法,以延胡索总生物碱纯度为指标,考察大孔吸附树脂结合有机溶剂萃取纯化的总生物碱纯度,并采用MTT法测定GSE-1细胞相关活性评价,对总生物碱纯度和药效进行相关性分析.结果 佳纯化工艺为1 mol/L的HCl溶解树脂纯化物,1倍药液体积的三氯甲烷除杂,药液加氨水碱化,以1倍药液体积的有机溶剂,按照三氯甲烷-乙酸乙酯-正丁醇的顺序分段综合萃取,合并有机溶剂层.结论 所建立的纯化工艺稳定可行,总生物碱纯度＞90％,体外抗GSE-1溃疡量效关系明确.
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延胡索总生物碱对异丙肾上腺素诱导的心肌梗死大鼠的心肌保护作用
目的 探讨延胡索总生物碱对异丙肾上腺素(ISO)诱导的心肌梗死大鼠损伤心肌的保护作用.方法 SD大鼠60只,随机分为四组(每组15只),A组大鼠采用ISO诱导心肌梗死,并使用1.0 mg/kg延胡索总生物碱预处理.B组大鼠采用ISO诱导心肌梗死,并使用2.0 mg/kg延胡索总生物碱预处理.C组大鼠仅用ISO诱导心肌梗死.对照组大鼠不接受ISO和延胡索总生物碱处理.检测各组大鼠血流动力学参数和左心室功能参数.采集各组大鼠血浆及心肌组织标本,检测心肌组织中的氧化应激指标变化及凋亡相关蛋白的表达变化.检测血浆标本中心肌损伤标志物的水平.光学显微镜下观察各组大鼠心肌损伤情况.结果 与C组大鼠相比,延胡索总生物碱预处理可以有效抑制ISO引起的收缩动脉压、舒张动脉压及平均动脉压的降低,同时能够缓解ISO引起的心率降低(P均＜0.05).A组和B组大鼠的左心室大收缩压变化速率及左心室大舒张压变化速率均高于C组,左心室舒张末压均低于C组,上述差异具有统计学意义(P均＜0.05).与C组大鼠相比,A组和B组大鼠的丙二醛水平降低,谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶及谷胱甘肽过氧化物酶的水平有所回升(P均＜0.05).A组和B组大鼠血浆中的心肌损伤指标肌酸激酶-MB和乳酸脱氢酶水平明显低于C组(P均＜0.05).光镜下对各组心肌组织的形态学检查可见,A组和B组大鼠心肌组织的坏死、炎性细胞浸润及心肌细胞水肿情况轻于C组.Western blot分析可见,A组和B组大鼠心肌组织的抗凋亡蛋白Bcl-2表达量高于C组,而促凋亡蛋白Bax低于C组.结论 延胡索总生物碱可减轻ISO诱导心肌梗死大鼠的氧化应激,稳定血流动力学参数,保护心功能,减轻心肌损伤和凋亡.
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延胡索总生物碱对D-半乳糖所致衰老模型小鼠相关指标的影响
目的 探讨延胡索总生物碱(YHS)对D-半乳糖所致衰老模型小鼠相关指标的影响.方法 以D-半乳糖所致衰老小鼠为实验动物,检测小鼠的学习记忆能力及脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、乙酰胆碱转移酶(ChAT)、乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性.结果 延胡索总生物碱能使D-半乳糖所致衰老模型小鼠记忆恢复正常,能升高脑组织中SOD、CAT、ChAT的含量,降低AChE的含量.结论 延胡索总生物碱有抗衰老的作用.
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延胡索总生物碱不同提取纯化工艺的研究
目的 通过对延胡索不同提取方法及阳离子交换树脂纯化,比较了延胡索总生物碱提取量与纯度,为延胡索总生物碱有效部位的提取应用提供实验参考依据.方法 采用酸水回流、乙醇回流、酸水渗漏三种不同的提取方法,通过苯乙烯强酸性阳离子交换树脂对生物碱进行纯化,用酸性染料比色法测定总生物碱的含量,HPLC高效液相色谱法测定盐酸巴马汀含量,比较提取纯化效果.结果 5％醋酸水溶液回流法提取纯化总生物碱后所得纯化干燥品含量为5.6％,总生物碱纯度为5.08％,出率为0.29％,盐酸巴马汀纯度为0.58％,出率为0.03％;55％乙醇回流法提取纯化总生物碱后所得纯化干燥品含量为3.4％,总生物碱纯度为7.75％,出率为0.26％,盐酸巴马汀纯度为1.14％,出率为0.04％;0.3％醋酸渗漏法提取纯化总生物碱后所得纯化干燥品含量为4.3％,总生物碱纯度为10.74％,出率为0.46％,盐酸巴马汀纯度为4.01％,出率为0.17％.结论 酸水渗漏法提取纯化工艺总生物碱纯度及出率高.
