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大鼠脑挫伤后碱性成纤维细胞生长因子的表达变化与损伤时间的推断研究
目的 研究大鼠脑挫伤后脑组织中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)时序性表达的规律,探讨bFGF的表达与脑损伤经过时间的关系,旨在为法医实践中推断早期脑损伤时间提供科学依据.方法 参照Feeney′s法建立SD大鼠脑损伤模型,每组8只将实验动物(n = 64)随机分为8个组(7个实验组,1个对照组),其中实验组依据损伤时间的不同分为1、6、12 h、1、2、3、7 d共7个亚组.应用免疫组化(SABC)法及免疫印迹(Western blot)法检测大鼠脑组织bFGF的含量.结果 脑挫伤后6 h阳性细胞数逐渐增多,3 d达峰值,7 d已开始下降,但仍高于基础水平.结论 挫伤后脑组织中bFGF的表达呈现出一定的时序性规律,为早期脑损伤时间的推断提供了实验依据.
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Fhit、Survivin基因在宫颈病变中的表达与高危型HPV感染的相关性研究
目的 探讨Fhit、Survivin在宫颈正常组织、宫颈上皮内瘤变和宫颈癌中的表达与HR-HPV感染的相关性,并探讨其在宫颈癌发生发展中的意义.方法 应用SABC法检测Fhit和Survivin基因的表达,并于术前采用HC-Ⅱ法检测HR-HPV感染情况.结果 Fhit和Survivin表达成负相关(P<0.05).Fhit表达与宫颈癌患者的年龄、临床分期、肿瘤大小、病理分级和淋巴转移均无相关性(P>0.05).Survivin表达与宫颈癌病理分级、临床分期及淋巴转移相关(P<0.05).Survivin在宫颈癌中的表达和HR-HPV感染率均高于正常宫颈组织(P<0.05),而Fhit在宫颈癌中的表达与以上两者成负相关(P<0.05).结论 Fhit表达缺失发生在CIN期,Survivin则参与了宫颈癌发生、侵袭和转移的过程,并与HR-HPV感染导致的宫颈上皮细胞异常增生有关.
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抗凋亡蛋白survivin在急性白血病细胞中的表达及临床意义
目的:观察survivin在急性白血病患者骨髓细胞中的表达,并分析其与预后的关系.方法:SABC免疫组化法检测survivin在初发急性白血病患者和非肿瘤患者骨髓细胞中的表达,分析急性白血病患者阳性表达和阴性表达者间完全缓解率(CR)的差别.结果:survivin在急性白血病患者骨髓细胞中的表达明显高于正常对照者(P<0.01),且阳性表达患者的完全缓解率低于阴性表达者(P<0.05).结论:survivin的阳性表达可能是白血病细胞对药物不敏感的原因之一,可作为判断白血病患者预后的指标之一.
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MMPs,TIMPs,nm23在肺癌病人中的表达及其与预后的相关性
目的:研究MMP1-3,TIMP1-2,nm23蛋白及mRNA在人肺癌组织中的表达及与病人预后的关系.方法:应用免疫组化、SABC、原位杂交.结果:TIMP1-2在Ⅲ、Ⅳ期肿瘤中强阳性表达的强度明显高于Ⅰ、Ⅱ期肿瘤(P<0.05),NSCLC术后存活1年以下和存活1~4年者其MMP1,MMP2蛋白强阳性表达率显著高于4年以上存活者(P<0.05)nm23高表达的患者术后2年和3年生存率较nm23低水平表达者明显增高(P<0.05和P<0.01).结论:MMP1-3,TIMP1-2在肺癌组织中的表达强度与肺癌病人预后相关.
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三种不同抗原修复法对二种免疫组化染色法的影响
目的:采用高温加热和微波加热及酶消化进行组织抗原修复的免疫组织化学技术,比较三种抗原修复方法暴露抗原之间的区别,以及与用sABC三步法、Envision二步法等二种免疫方法搭配使用结果的区别,寻求佳的免疫组化方法.方法:微波修复组,高压加热组和酶消化组,各组分别用sABC、Envision试剂盒,检测ER、PR、C-erBb-2、CK、LCA染色结果.结果:三种抗原修复方法有明显差异,高压加热佳;微波加热其次;酶消化不稳定.结论:高压加热组织抗原修复方法经济,操作简单,适合大量标本使用;试剂盒sABC阳性度高,Envision次之,但背景清晰.
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多发性骨髓瘤患者Survivin、VEGF表达及其相关性
目的:研究多发骨髓瘤(MM)患者血清及骨髓Survivin、VEGF表达及意义.方法:酶联免疫法(ELASA)检测60例初诊多发骨髓瘤患者及30例对照组患者血清Survivin、VEGF表达情况;免疫细胞化学法(SABC法)检测骨髓单个核细胞中Survivin、VEGF阳率.酶联免疫法(ELASA)检测VAD联合沙利度胺治疗4周期后患者血清Survivin、VEGF水平,与治疗前比较.结果:初诊多发骨髓瘤患者血清Survivin、VEGF表达水平较对照组明显升高;初诊骨髓瘤患者骨髓单个核细胞Survivin、VEGF阳率较对照组明显提高;经统计学分析,P<0.05,差异有统计学意义.治疗后患者,血清Survivin、VEGF在不同疗效组有差异,疗效良好组与疗效较差组差异比较,P <0.05.骨髓中Survivin与VEGF表达阳率呈正相关,与疾病疗效呈负相关.结论:Survivin及VEGF在多发骨髓瘤患者中表达增加,二者表达水平与疾病疗效密切相关.二者存在协同关系,可作为评估疗效、预后标.
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大鼠脑出血后的细胞凋亡及其与NF-κB和Ⅰ-κBα蛋白表达的关系
目的:探讨大鼠脑出血(ICH)后细胞凋亡及其与NF-κB和Ⅰ-κBα蛋白表达的关系和演变规律,本实验用Ⅶ胶原酶联合肝素注入大鼠右侧脑纹状体制备脑出血模型.方法:TUNEL染色(末端脱氧核糖核苷转移酶介导的dUTP缺口末端标记法)观察细胞凋亡的变化;免疫组化SABC法检测NF-κB和Ⅰ-κBα蛋白的表达;West-ern Blot技术检测NF-κB和Ⅰ-κBα蛋白相对光密度值.结果:(1)ICH组TUNEL阳性细胞于出血后12 h可检测到,3 d达高峰,7 d仍有较高表达(P<0.01);(2)ICH组Ⅰ-κBα和NF-κB蛋白免疫阳性细胞分别于出血12 h、3 d达高峰,7 d仍高于假手术组和正常对照组(P<0.01);(3)Western Blot结果显示NF-κB相对光密度比值在ICH 3d出血侧达高峰,I-κBα蛋白相对光密度比值在ICH组ICH侧12 h达高峰,7 d时仍明显高于正常对照组(P<0.05).结论:ICH后存在细胞凋亡;NF-κB和Ⅰ-κBα参与了ICH所致的细胞凋亡.
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SP,ABC,SABC和EnVision法敏感性的比较
0引言自从免疫组织化学方法应用至今,在技术方法上不断得以改进,又涌现了一批新的技术方法,如SP,ABC,SABC和EnVision等方法[1].它们各有其特点,我们用上述4种方法对肝癌组织中Bad,Bag-1染色,并比较其敏感性.