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HPLC法测定大蒜油胶丸中二烯丙基三硫醚的含量
目的建立HPLC测定大蒜油胶丸中主要有效成份二烯丙基三硫醚的方法.方法采用HPLC法,spherisorb ODS柱(250mm×4.6mm B Fitting),流动相乙腈-水-四氢呋喃(7∶27∶3),检测波长240nm,流速 0.7ml/min.结果在检测范围内,二烯丙基三硫醚的线性关系良好,回归方程为Y=0.012 5X+2.888 6,r为0.999 7,回收率平均为99.65%,RSD为1.78%(n=8).结论本方法可用于蒸镏法制备的大蒜油胶丸中二烯丙基三硫醚的含量测定.
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大蒜素的分析方法研究近况
大蒜系百合科植物大蒜的鳞茎,化学成分复杂,具有很好的药用价值.研究表明大蒜具有杀菌、抗病毒、抗肿瘤、降血脂、降血糖、解毒和提高肌体免疫力等功效[1].大蒜破碎后生成的主要成分为大蒜素,其结构为CH2=CH-CH2-S-S-S-CH2-CH=CH2(二烯丙基三硫醚)[2],是一种淡黄色油状液体,d1.5 4=1.085,n20D=1.5850,沸点112～122℃/16mmHg[3],是大蒜的药理活性的化学基础,因此对其进行分析研究十分重要.近二十年来,分析工作者在这方面做了大量的工作,对多种测试方法作了研究,如GC、HPLC、UV等,并广泛地应用于大蒜素的测定,本文就近年来大蒜及其制剂中大蒜素的分析方法进展予以综述.
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大蒜活性成分二烯丙基三硫醚抑制氧化应激诱导的肝星状细胞活化作用研究
目的 探究大蒜主要活性成分二烯丙基三硫醚(diallyltrisulfide,DATS)体外对氧化应激诱导肝星状细胞(HSC)活化的影响.方法 大鼠肝星状细胞体外培养,以噻唑蓝法筛选过氧化氢(H2O2)刺激肝星状细胞增殖的佳作用浓度,建立氧化应激诱导肝星状细胞活化的体外细胞模型.在此基础上,以乳酸脱氢酶释放实验检测二烯丙基三硫醚对肝星状细胞的毒性作用,以噻唑蓝法检测二烯丙基三硫醚在非毒性浓度下对肝星状细胞增殖的影响;以流式细胞仪检测二烯丙基三硫醚对肝星状细胞细胞周期的影响;以Hoechst 33258染色与流式细胞仪检测二烯丙基三硫醚对肝星状细胞凋亡的影响;以Western blot法检测二烯丙基三硫醚对肝星状细胞中凋亡相关蛋白及纤维化标志物表达的影响.结果 H2O2在5μmol·L-剂量下即可显著促进肝星状细胞增殖,将其作为体外刺激肝星状细胞活化的有效浓度.二烯丙基三硫醚可剂量依赖性地抑制H2O2诱导的肝星状细胞增殖,在1 μmol·L-1剂量下即有显著抑制效应.二烯丙基三硫醚可阻滞H2O2诱导活化的肝星状细胞的细胞周期于G2/M期,该作用与下调细胞周期调控蛋白Cyclin B1和CDK1相关.二烯丙基三硫醚剂量依赖性地促进H2O2诱导活化的肝星状细胞发生凋亡,与调控凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-9及Caspase-8相关.此外,二烯丙基三硫醚还抑制肝星状细胞中一系列纤维化标志物的蛋白表达.结论 二烯丙基三硫醚体外对于氧化应激诱导的肝星状细胞活化具有显著的抑制作用,表现为抑制肝星状细胞增殖、阻滞细胞周期、诱导凋亡以及减少纤维化标志物的表达.本实验为将二烯丙基三硫醚作为潜在的抗肝纤维化药物研究提供实验依据.
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二烯丙基三硫醚对幽门螺杆菌生物膜的杀菌作用
目的 探讨二烯丙基三硫醚(DATS)对幽门螺杆菌生物膜的杀菌作用,进一步研究生物膜耐药的机制.方法 微量肉汤法测定药物的小抑菌浓度,平板培养法构建幽门螺杆菌生物膜的体外模型,XTT法检测药物处理后浮游状态与生物膜状态下的幽门螺杆菌活性,激光共聚焦显微镜观察生物膜深层的细菌状态以及活性变化.结果 克拉霉素与DATS对浮游状态的幽门螺杆菌均有良好的杀菌作用;使用不同浓度克拉霉素处理后的幽门螺杆菌生物膜活性明显低于对照组;DATS处理后的幽门螺杆菌生物膜活性下降明显,与对照组和克拉霉素组有统计学差异.结论 DATS对浮游状态和生物膜状态下的幽门螺杆菌均具有良好的杀菌活性,可以为耐药菌临床治疗提供参考.
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大蒜油及其软胶囊中二烯丙基三硫醚等硫醚类化合物的分析
目的:建立大蒜油及其软胶囊中二烯丙基三硫醚等硫醚类化合物的气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析方法.方法:用水蒸气蒸馏法从新鲜大蒜中提取大蒜油,取大蒜油软胶囊内容物,用丙酮溶解并稀释,利用GC-MS法进行分析.GC条件:色谱柱DB-5MS(30 m ×0.25 mm i.d.,0.25μm);进样口温度190℃,升温程序:50℃保留 1 min,以20℃/min 升至160℃,保留5 min;氦气柱流量0.5 ml/min,总流量6.7 ml/min,柱头压48.4 kPa.MS条件:接口温度160℃;检测器电压1.0 kV;电离方式EI,电离能量70 eV;全扫描测定方式,扫描范围:m/z 30～350,扫描速度:500 amu/s;溶剂切除时间:3.0 min.结果:分析了从鲜蒜中提取的大蒜油和市售大蒜油软胶囊中二烯丙基三硫醚等甲基、烯丙基硫醚类有机化合物,用面积归一化法得到各化合物的相对含量.与大蒜油的分析结果进行比较,测定的8个样品中有1个未鉴定出任何硫醚类化合物.结论:利用本方法可以判断大蒜油软胶囊产品真伪与质量优劣.
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HPLC法测定大蒜素胶囊中二烯丙基三硫醚的含量
目的:用高效液相色谱法测定大蒜素胶囊中的二烯丙基三硫醚的含量.方法:以kromasil C18为色谱柱;甲醇-水-甲酸(85∶15∶0.1)为流动相;流速0.8ml·min-1;紫外检测波长252 nm.结果:二烯丙基三硫醚的浓度在0.22～7.62μg·ml-1范围内与峰面积呈良好线性关系,r=0.999 8;平均加样回收率为105.7%,RSD为5.4%;低检出限为:0.2μg·ml-1.结论:本法快速、准确、灵敏,有利于实现对大蒜素胶囊的质量监控.
