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单纯性胰腺创伤后大鼠胰腺磷脂酶A2活性及其亚型表达特点
目的 构建大鼠单纯性胰腺创伤模型并观察大鼠血清与胰腺组织中磷脂酶A2(PLA2)活性及其亚型表达特点.方法 将120只Wistar大鼠按1:2随机分为对照组及撞击组,并分别分为6h、24h、72h、7d4个亚组,对照组每个时间点10只,撞击组每个时间点20只.各撞击组采用BIM-Ⅲ生物撞击机构建胰腺创伤大鼠模型;对照组仅行开腹手术,翻动胰腺数次后关腹.检测各组大鼠血清与胰腺组织PLA2活性及PLA2各亚型在胰腺组织中的表达与分布特点.结果 撞击组大鼠血清与胰腺组织中PLA2活性在创伤后6h开始升高,血清PLA2于72h达高峰,胰腺组织PLA2于24h达高峰,7d时血清与胰腺组织PLA2活性仍高于对照组(P＜0.05).胰腺组织中分泌型磷脂酶A2(sPLA2)在RNA水平及蛋白水平表达均高于胞质型磷脂酶A2(cPLA2)与钙非依赖型磷脂酶A2(iPLA2).结论 胰腺创伤后,血清与胰腺组织PLA2活性均显著增高,PLA2各亚型中,sPLA2在胰腺表达增强为显著.胰腺创伤后6h～7d均可检出血PLA2活性,有助于胰腺创伤的辅助诊断.
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LPS诱导的胸腺细胞凋亡对瘦素的抑制作用
Objective To study the signaling transduction mechanism of leptin, including phosphatidylinositol 3-kinase/AKT (PI3-K/ AKT) and cPLA2 signal pathway.Methods MTT colorimetric assay and Annexin V-FITC/PI double staining for flow cytometry were used to demonstrate the inhibitory effect of leptin on lipopolysaccharide(LPS)-induced toxicity and apoptosis of thymocytes with a cPLA2 activity kit.RT-PCR was performed to show the suppressive effect of leptin on cPLA2 activity and cPLA2 mRNA level in proteins and genes.Effect of a specific inhibitor (LY294002) of PI3-K on apoptosis of thymocytes was detected by flow cytometry.Caspase3 mRNA was determined by RT-PCR.Results Leptin inhibited lipopolysaccharide (LPS) -induced toxicity and apoptosis of thymocytes, decreased the cPLA2 activity and cPLA2 mRNA level in proteins and genes.Conclusion Leptin inhibits toxicity and apoptosis of thymocytes through the PI3-K/AKT and cPLA2 signal pathway.
关键词： Leptin cPLA2 Thymocytes Apoptosis -
L-谷氨酰胺通过p38MAPK/cPLA2信号通路抑制变应性接触性皮炎
[目的]探讨L-谷氨酰胺(Gln)对变应性接触性皮炎(ACD)模型小鼠的影响及其机制.[方法]利用2,4-二硝基氟苯反复刺激小鼠皮肤建立ACD模型,观察Gln对ACD模型小鼠耳肿胀度、组织病理改变、耳组织p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)及胞浆型磷酯酶A2(cPLA2)蛋白表达和血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素4(IL-4)等细胞因子表达的影响.[结果]与正常对照组比较,Gln显著抑制ACD模型小鼠耳肿胀度(P＜0.05),明显降低皮肤组织p38 MAPK,cPLA2蛋白及血清TNF-α,IL-4炎性细胞因子表达水平(P＜0.05).[结论] Gln治疗小鼠ACD有效,机制认为与p38 MAPK/cPLA2信号通路及TNF-α,IL-4炎性细胞因子表达有关系.
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高盐饮食增强内皮细胞TRPV4与cPLA2的空间偶联作用
目的：探究内皮细胞中香草素受体4型瞬时感受器电位通道（TRPV4通道）与胞浆型磷脂酶A2（cPLA2）在空间上的偶联作用。方法通过设定梯度盐（培养基中外源加入20、40、80、160 mol·L－1 NaCl）确定高盐处理内皮细胞的适盐浓度；在细胞水平上，通过免疫荧光能量共振转移（im-muno-FRET）技术检测人微血管内皮细胞（HMEC）和小鼠胸主动脉原代内皮细胞中TRPV4与cPLA2的空间偶联作用；在动物组织水平，通过同样的技术检测正常小鼠与高盐诱导的高血压小鼠的胸主动脉血管环上的内皮细胞中TRPV4与cPLA2的空间偶联情况。结果高盐诱导内皮细胞的适盐浓度为40 mol·L－1 NaCl；在细胞水平和动物组织水平上，高盐处理的HMEC、小鼠胸主动脉原代内皮细胞和高盐诱导的高血压小鼠胸主动脉血管环上的内皮细胞中，TRPV4与cPLA2的空间偶联作用均明显增强。结论在细胞和组织水平上，高盐饮食能增强内皮细胞中TRPV4与cPLA2的空间偶联作用，这种空间偶联可能进一步引起两者的功能偶联，为血管内皮功能紊乱的研究提供了新的思路。
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cPLA2和COX-2在肺癌组织中的表达及生物学意义
目的 探讨磷脂酶A2(cPLA2)和环氧合酶(COX-2)在肺癌中的表达及生物学意义,为肺癌的靶向治疗提供参考依据.方法 采用RT-PCR检测肺癌及癌旁组织中cPLA2、COX-2 mRNA的表达,同时采用免疫组织化学SP法检测相应标本中cPLA2和COX-2蛋白的表达.结果 肺癌组织中cPLA2和COX-2 mRNA的表达量均明显高于癌旁组织(P＜0.05).cPLA2蛋白在肺癌组织中的阳性表达率为76.7％(46/60),癌旁组织中未见表达.肺癌组织中cPLA2蛋白的阳性表达率与肿瘤大小、组织类型、TNM分期、分化程度和淋巴结转移均无关(P＞0.05).COX-2蛋白在肺癌组织中的阳性表达率为73.3％(44/60),明显高于在相应癌旁组织中的表达[13.3％(8/60)](x2 =21.99,P＜0.01).肺癌组织中COX-2蛋白的阳性表达率与肿瘤大小、组织类型无关(P＞0.05)；而与淋巴结转移、TNM分期、分化程度有关,随着淋巴结的转移、组织分化程度的降低和临床分期的增加,肺癌组织中COX-2蛋白的阳性表达率逐渐增高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 COX-2和cPLA2的高表达可能在肺癌的发生发展起着重要作用,它们可能为肺癌的早期诊断和开发肺癌的靶向治疗提供一定的临床依据.
