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DNA分子标记技术在中药鉴定学中的应用
DNA分子标记技术是近年来发展起来的一种新的分子生物学技术.本文介绍了几种DNA分子标记技术的基本原理和特点,概述了近年来该技术在药用植物鉴别中的应用进展,并展望了其应用前景.
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DNA分子标记技术在枇杷种质鉴定中的应用
DNA分子标记直接以DNA的形式表现,不受组织类别、发育时期、环境条件等干扰,相对传统遗传育种研究的形态学性状具有无与伦比的优越性.本文主要综述近年用于枇杷属种质资源鉴定与分类的DNA分子标记技术的研究进展.
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DNA分子标记技术在中药材品质鉴定中的应用进展
目的 了解DNA分子标记技术在中药材品质鉴定中的应用进展.方法 检索本领域国内外相关文献资料并进行分析、整理和总结.结果 DNA分子标记技术在该领域中得到了广泛应用.结论 DNA分子标记技术可以作为中药材品质鉴定的重要手段.
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中药材DNA分子标记技术的研究进展
近年来,许多新科学理论和技术不断渗透到中药鉴定领域,中药分子鉴定方法得到不断的发展.尤其是中药DNA分子标记鉴定技术得到快速发展,其方法主要是通过直接分析遗传物质的多态性来诊断生物内在基因排布规律及其外在性状表现规律的技术,也称DNA分子诊断技术,在药用植物亲缘与进化关系、分类和鉴定、道地药材等研究领域已广泛应用.本文总结目前常见中药材鉴别的DNA分子标记技术种类及中药材基因组DNA提取方法,展望中药材DNA发展前景,以期为中药材的鉴定发展提供理论.
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三七特异性PCR真伪鉴别方法研究
目的:建立一种用于鉴别三七的特异性PCR鉴别方法.方法:通过比较三七及其混伪品的psbA-trnH基因序列差异,根据变异位点设计三七的特异性鉴别引物,优化反应体系,并对此方法进行耐受性和适用性的考察和验证.结果:构建了鉴别三七特异性PCR方法,在47℃的退火温度下,用鉴别引物对所有样品进行扩增,仅三七正品能扩增得到约241 bp的特异性条带,其他药材均为阴性扩增.结论:该鉴别引物能准确、特异性地鉴别三七,可用于三七药材的鉴定.
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多重PCR方法同时鉴别人参、西洋参、三七
目的:建立一种能同时鉴别人参属人参、西洋参、三七3种药材的多重聚合酶链反应(PCR)方法.方法:通过分析人参、西洋参、三七psbA-trnH基因序列的差异设计了特异性引物对1,利用随机扩增多态性DNA(RAPD)分子标记技术筛选获得的特异性片段的基因序列,设计了特异性引物对2;优化了多重PCR鉴别体系并验证其耐受性和实用性.结果:构建的多重PCR鉴别体系能够成功地鉴别人参、西洋参、三七,人参样本可扩增出片段大小约为150 bp的特异性条带,西洋参样本可扩增片段大小出约为150 bp和400bp 2条特异性片段,三七样本可扩增出片段大小约为400 bp的特异性条带.结论:本多重PCR鉴别体系特异性好,可准确、可靠地鉴别人参、西洋参、三七.
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采用RAPD技术对人参属的亲缘关系和鉴别的分析
目的:分析人参属3种植物的亲缘关系及其可用于鉴别的特异性DNA片段.方法:采用随机扩增多态性DNA分子标记技术(RAPD)对人参属3种药材的基因组DNA进行多态性分析,筛选特异性片段并进行切胶回收、克隆及测序.结果:从120条随机引物中筛选出12条随机引物用于聚合酶链式反应(PCR)扩增,共扩增出111条扩增片段,其中多态性位点107,多态性百分率为96.40％;从聚类分析图可以看出:人参与西洋参的种间亲缘关系近,聚为一类,而三七相对其他2种较远,单独聚为一类;将筛选出的显性标记的特异性片段进行切胶回收、克隆并测序获得其DNA序列.结论:aRAPD标记技术从分子水平提示了人参属3种植物的亲缘关系,并为后期的特异性鉴别提供基础.根据序列设计用于鉴别人参、西洋参、三七的特异性PCR引物,实现从理论研究向药材鉴别实际运用的转变.
