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人牙髓成牙本质细胞和神经组织中钠钙交换体1型通道蛋白的免疫组化研究
目的 通过免疫组化法观察钠钙交换体1型(Na+/Ca2+exchanger 1,NCX1)通道蛋白在人牙髓成牙本质细胞(odontoblasts,OD)和神经纤维组织中的表达,为解释牙髓组织的修复和感觉传导功能奠定基础.方法 选取就诊于天津医科大学口腔医院口腔颌面外科18～ 25岁患者因阻生或正畸拔除的健康完整的第三磨牙20颗,通过牙本质涎磷蛋白抗体染色与改良Bielschowsky嗜银染色分别定位OD层和神经组织,通过特异性抗体染色分析NCX1通道蛋白在人牙髓组织OD细胞层和神经组织中的表达情况,并用Image Pro Plus软件半定量比较20例离体牙样本冠部和根部上1/3两个部位牙髓OD中NCX1通道蛋白的表达情况.结果 免疫组化结果显示人牙髓OD胞体和神经组织的NCX1通道蛋白均为阳性表达.Image Pro Plus分析显示,NCX1通道蛋白在牙冠部与根部上段OD中的表达(A值分别为0.146±0.021、0.120±0.034)差异无统计学意义(P＞0.05).结论 人牙髓组织OD层和神经组织均明显表达NCX1通道蛋白;NCX1在牙冠部和根部上段OD中的表达无明显差异.
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补肾、健脾、活血法对骨质疏松症大鼠骨NCX1表达影响比较研究
目的:观察中医不同治法对骨质疏松症大鼠骨组织NCX1基因和蛋白表达的影响,探讨骨质疏松症的发病机制及中药治疗的作用机理.方法:将132只Wistar大鼠(雌雄各半)随机分为正常、模型、补肾、健脾、活血及骨疏康组.以地塞米松(2.5 mg/kg,2次/周)肌注造模.除正常组及模型组外,各治疗组予以相应的中药治疗.9周后,测定离体股骨骨密度(BMD)及血清骨代谢相关指标,测定骨组织NCX1 mRNA和蛋白表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠BMD降低(P＜0.01),血清TRAP含量升高(p＜0.01),骨NCX1 mRNA和蛋白表达水平均上升(P＜0.01).与模型组比较,补肾组BMD升高(P＜0.01),血清TRAP含量下降(P＜0.01),骨NCX1mRNA和蛋白表达水平下调(P＜0.01).结论:补肾中药可能通过下调骨NCX1表达而抑制破骨细胞骨吸收,从而起到治疗骨质疏松症的作用,其作用优于健脾及活血中药.
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NCX1在肝癌中的表达、调控Ca2+浓度及其对肝癌细胞增殖和迁移的影响
背景与目的：钠钙交换体亚型1(Na+-Ca2+ exchanger isoform 1，NCX1)可通过对细胞Ca2+平衡的调节参与癌症的发生，但是否参与肝癌的发生、发展及其作用机制的研究鲜见报道。该研究旨在探讨NCX1在肝癌中的表达变化，对人肝癌细胞HepG2增殖、迁移能力的影响及其可能的机制。方法：运用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction，RTFQ-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测NCX1 mRNA及蛋白在人正常肝细胞株LO2、肝癌细胞株HepG2、人正常肝组织和原发性肝细胞癌患者癌组织中的表达。采用共聚焦显微镜技术观察NCX1在细胞外无钠溶液刺激活化后，对正常肝细胞LO2及肝癌细胞HepG2中钙离子浓度的调控。采用MTT法、细胞划痕实验检测NCXl特异性的阻断剂KB-R7943对人肝癌细胞HepG2增殖、迁移的影响。结果：在肝癌细胞株HepG2和肝细胞癌组织中，NCX1 mRNA和蛋白质的表达均高于正常肝细胞株LO2和正常肝组织(P<0.05)。共聚焦显微镜实验发现，细胞外无钠溶液可以激活细胞内钙升高，正常肝细胞LO2及肝癌细胞HepG2细胞内钙离子浓度均增高，但肝癌细胞HepG2细胞内钙离子增高的幅值明显高于LO2细胞(P<0.05)，NCXl特异性阻断剂KB-R7943可以显著阻断胞外无钠诱导的细胞内钙离子升高(P<0.05)。KB-R7943可以显著抑制肝癌细胞HepG2的增殖及迁移(P<0.05)。结论：原发性肝癌中NCX1的表达量上调，NCX1的活化可以调节细胞内钙变化，抑制NCX1的活性可以进一步抑制肝癌细胞的增殖和迁移。这提示NCX1可能在原发性肝癌的发生、发展中起了重要的作用。
